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2013 年度 実施状況報告書

カンピロバクターによる食鳥処理肉の汚染メカニズムの解明と制御技術の開発

研究課題

研究課題/領域番号 24580447
研究機関宮崎大学

研究代表者

三澤 尚明  宮崎大学, 産業動物防疫リサーチセンター, 教授 (20229678)

キーワードカンピロバクター / 食鳥 / 付着 / 食中毒 / 微生物制御
研究概要

Campylobacter属菌の鶏と体皮膚への付着のメカニズムは不明であり、その研究も進んでいないのが現状である。考えられる付着のメカニズムの要因として、Campylobacter 属菌の菌体側の要因、宿主の鶏皮膚の要因、環境要因などが挙げられる。これまでの研究成果から、と体皮膚のアルカリ抽出物中にCampylobacter属菌と付着する100~150kDaの因子が含まれるが、酸抽出物中には付着因子が検出されないことが判明したことから、両者の蛋白の差異を解析することにより、付着に関与する宿主側の因子を究明した。
ブロイラーの中抜きと体の背部から25cm2の皮膚を採取し、直径3cmの円筒の底部に貼りつけて固定した。これに0.01M 塩酸(pH2.0)または01.M 水酸化ナトリウム (pH13.0)を添加し、室温で30分静置して皮膚表層の抽出液を回収し、中和後に濃縮した抽出液の二次元電気泳動による解析を実施した。
酸またはアルカリ抽出液中のタンパク質を蛍光標識してから二次元電気泳動を行い、それぞれのサンプルのスポットの違いを解析したところ、全体で700以上のスポットに違いが認められた。このうち、100~150kDaのタンパク質で、かつ、アルカリ処理液中のタンパク質が酸処理液中のタンパク質の発光量の2倍以上を示す、2スポットが検出された。MALDI-TOF-MSを用いたペプチドマスフィンガープリント(PMF)法により2スポットのタンパク質の同定を試みたが、鶏のタンパク質に関するデータベースが完備されていなかったため同定には至らなかった。同定できた他のタンパク質との比較から、この2スポットのタンパク質の等電点は約6.85、8.31であると推定された。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

食鳥処理工程でカンピロバクターが食鳥と体皮膚を汚染するメカニズムを明らかにする研究で、細菌および食鳥側の主要な付着因子を明らかにすることができており、効果的な微生物制御法の開発につながる成果が得られている。

今後の研究の推進方策

食鳥処理では、湯漬け、予備冷却、チラーなど、工程により温度が大きく異なる。そこで、今後は温度やpH等の環境要因が皮膚への付着にどのような影響を及ぼすのか明らかにする。カンピロバクターの食鳥と体皮膚への付着機序を明らかにした上で、その基礎的な知見をこれまで開発してきたマイクロバブルや共振超音波処理等の食鳥と体の微生物制御技術にフィードバックし、さらに効果的な殺菌法の開発を行う。

  • 研究成果

    (17件)

すべて 2014 2013

すべて 雑誌論文 (7件) (うち査読あり 6件) 学会発表 (10件) (うち招待講演 1件)

  • [雑誌論文] Rapid identification and subtyping of Helicobacter cinaedi strains by intact-cell mass spectrometry profiling with the use of matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry.2014

    • 著者名/発表者名
      Taniguchi, T., Sekiya, A., Higa, M., Saeki, Y., Umeki, K., Okayama, A., Hayashi, T., Misawa, N.
    • 雑誌名

      J. Clin. Microbiol.

      巻: 52 ページ: 95-102

    • DOI

      10.1128/JCM.01798-13.

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Draft Genome Sequence of Clostridium botulinum Type B Strain Osaka05, Isolated from an Infant Patient with Botulism in Japan.2014

    • 著者名/発表者名
      Sakaguchi, Y., Hosomi, K., Uchiyama, J., Ogura, Y., Umeda, K., Sakaguchi, M., Kohda, T., Mukamoto, M., Misawa, N., Matsuzaki, S., Hayashi, T., Kozaki, S.
    • 雑誌名

      Genome Announc.

      巻: 23 ページ: not available

    • DOI

      10.1128/genomeA.01010-13.

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Intragenus generalized transduction in Staphylococcus spp. by a novel giant phage.2014

    • 著者名/発表者名
      Uchiyama, J., Takemura-Uchiyama, I., Sakaguchi, Y., Gamoh, K., Kato, S., Daibata, M., Ujihara, T., Misawa, N., Matsuzaki, S.
    • 雑誌名

      ISME J.

      巻: not available ページ: not available

    • DOI

      10.1038/ismej.2014.29.

    • 査読あり
  • [雑誌論文] A PCR-RFLP assay for the detection and differentiation of Campylobacter jejuni, C. coli, C. fetus, C. hyointestinalis, C. lari, C. helveticus and C. upsaliensis.2014

    • 著者名/発表者名
      Kamei, K., Asakura, M., Somroop, S., Hinenoya, A., Nagita, A., Misawa, N., Matsuda, M., Nakagawa, S., and Yamasaki, S.
    • 雑誌名

      J. Med. Microbiol.

      巻: not available ページ: not available

    • DOI

      10.1099/jmm.0.071498-0.

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Identification of O-serotypes, -genotypes and Virulotypes of Shiga Toxin-Producing Escherichia coli Isolates including non-O157 from Beef Cattle in Japan.2014

    • 著者名/発表者名
      Mekata, H., Iguchi, A., Kawano, K., Kirino, Y., Kobayashi, I., Misawa, N.
    • 雑誌名

      J. Food Protect.

      巻: not available ページ: not available

    • 査読あり
  • [雑誌論文] 人獣共通感染症としてのカンピロバクター感染症2013

    • 著者名/発表者名
      三澤尚明
    • 雑誌名

      G. I. Research

      巻: 21 ページ: 22-27

  • [雑誌論文] Characterisation of methicillin-resistant Staphylococcus intermedius and pseudintermedius (MRSI and MRSP) isolated from dogs and cats.2013

    • 著者名/発表者名
      Bardiau, M., Yamazaki, K., Ote, I., Misawa, N., and Mainil, J. G.
    • 雑誌名

      Microbiol. Immunol.

      巻: 57 ページ: 496-501

    • DOI

      10.1111/1348-0421.12059.

    • 査読あり
  • [学会発表] 牛趾皮膚炎病変部の治療前後における細菌叢の比較解析2014

    • 著者名/発表者名
      山崎渉、谷口喬子、後藤恭宏、林哲也、三澤尚明
    • 学会等名
      第87回日本細菌学会総会
    • 発表場所
      東京都
    • 年月日
      20140326-20140328
  • [学会発表] Comparison of analytical sensitivity for loop-mediated isothermal amplification and conventional PCR assays in the detection of trh gene of Vibrio parahaemolyticusb2014

    • 著者名/発表者名
      Yamazaki, W., Taniguchi, T., Misawa, N.
    • 学会等名
      U.S.-Japan Cooperative Medical Sciences Program Regional Conference on Emerging Infectious Diseases 2014
    • 発表場所
      Dhaka, Bangladesh
    • 年月日
      20140209-20140213
  • [学会発表] シャワートイレの普及に伴うトイレットペーパーの紙質の変化が食中毒細菌の浸透性に及ぼす影響2013

    • 著者名/発表者名
      谷口喬子、佐々木賢美、山崎渉、三澤尚明
    • 学会等名
      九州地区日本獣医公衆衛生学会
    • 発表場所
      大分市
    • 年月日
      20131012-20131013
  • [学会発表] 鶏および牛由来Campylobacter jejuniのPenner血清型とLOS合成遺伝子オペロンのタイピング2013

    • 著者名/発表者名
      下田洋子、Kihn Maun Latt、佐々木賢美、谷口喬子、山崎渉、三澤尚明
    • 学会等名
      九州地区日本獣医公衆衛生学会
    • 発表場所
      大分市
    • 年月日
      20131012-20131013
  • [学会発表] カンピロバクターとヒトとの戦い―人類は多様な生存戦略を持つカンピロバクターを防除できるのか?―2013

    • 著者名/発表者名
      三澤尚明
    • 学会等名
      第34回日本食品微生物学会学術総会
    • 発表場所
      東京都
    • 年月日
      20131003-20131004
    • 招待講演
  • [学会発表] 細胞膨化致死毒素(cdt)遺伝子を標的としたPCR-RFLP法によるCampylobacter7菌種の検出・同定法の開発2013

    • 著者名/発表者名
      亀井数正、Somroop Srinuan、朝倉昌博、日根野谷淳、名木田章、三澤尚明、松田基夫、中川晋作、山崎伸二
    • 学会等名
      第156回日本獣医学会学術集会
    • 発表場所
      岐阜市
    • 年月日
      20130921-20130923
  • [学会発表] ヒトおよび動物由来Helicobacter cinaediのヒト株化上皮細胞に対する付着・侵入能に関する比較解析2013

    • 著者名/発表者名
      谷口喬子、比嘉万理子、山崎渉、佐伯裕二、岡山昭彦、林哲也、三澤尚明
    • 学会等名
      第156回日本獣医学会学術集会
    • 発表場所
      岐阜市
    • 年月日
      20130921-20130923
  • [学会発表] 趾皮膚炎罹患牛の歩様と病態の関係2013

    • 著者名/発表者名
      千葉香菜子、眞鍋弘行、山本匠、花田直子、三澤尚明、佐藤繁、岡田啓司
    • 学会等名
      第156回日本獣医学会学術集会
    • 発表場所
      岐阜市
    • 年月日
      20130921-20130923
  • [学会発表] Comparative analysis of three cytolethal distending toxin genes in Campylobacter hyointestinalis and its gene products2013

    • 著者名/発表者名
      Kamei, K., Samosornsuk, W., Asakura, M., Hinenoya, A., Misawa, N., Nakagawa, S., Yamasaki, S.
    • 学会等名
      CHRO2013
    • 発表場所
      Aberdeen, England
    • 年月日
      20130915-20130919
  • [学会発表] Campylobacter jejuniの付着因子の検索2013

    • 著者名/発表者名
      谷口喬子、新木泰輔、大城昇太郎、佐々木賢美、三澤尚明
    • 学会等名
      第50回日本ウイルス学会九州支部総会
    • 発表場所
      長崎市
    • 年月日
      20130906-20130907

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公開日: 2015-05-28  

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