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リゾホスファチジン酸（LPA）は多様な生理活性を示す脂質メディエーターであり、その作用はLPA受容体（LPA1～LPA6）を介して生じる。これまでLPAシグナルががん発生・増殖・進展に関与していることが示唆されており、がん治療の新規標的と考えられている。しかしながら、LPAシグナル変動とがんの関連について、その詳細は未だ不明である。これまで、がん組織で発現しているLPA1変異体（Phe295Ser、Pro308Ser、Ile310Thr、Tyr311His）が異常な細胞内分布を示すこと、その情報伝達も破綻していることを見いだした。本年度は、LPA1変異体の機能解析を非クローン細胞集団を用いて検討した。また、LPAの分解により産生される脂肪酸の作用機序およびLPAの分解酵素を調べた。
（１）変異体の機能解析；これまで見られたLPA1変異体の細胞内分布の異常や情報伝達の破綻が、用いた細胞株に特有（クローナルバリエーションの結果）であるかどうかについて非クローン細胞集団を用いて検討した。レトロウイルスによりLPA1変異体を導入した細胞集団を作成し、細胞内分布ならびにLPA刺激による細胞骨格変化を調べたが、いずれの変異体もクローン細胞を用いたときと同様の異常が認められた。これらのことから、LPA1変異体の分布および機能異常は細胞クローン特有のものではなく、普遍的であることがわかった。
（２）脂肪酸の作用解析；オレイン酸による細胞死抑制作用の一部がグルコース輸送体の発現亢進によることが分かった。また、細胞膜可溶性画分を種々のクロマトグラフィーに適用し、LPAを分解するリパーゼ活性の単離を試みた。SDS電気泳動において分子量250kDa程度の部分にリパーゼ活性が認められた。
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