硫化水素産生不全を伴う硫黄転移酵素ノックアウトマウスに関する網羅的研究

2014 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 24590392
• 研究機関: 日本医科大学
• 研究代表者: 永原 則之 日本医科大学, 医学部, 准教授 (10208043)
• 研究分担者: 伊藤 隆明 熊本大学, その他の研究科, 教授 (70168392) ; 永野 昌俊 日本医科大学, 医学部, 講師 (60271350)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2015-03-31
• キーワード: ノックアウトマウス / メルカプトピルビン酸硫黄転移酵素 / メルカプト乳酸システイン尿症 / 硫化水素 / 硫黄酸化物 / 抗酸化作用 / 不安行動 / ポリスルフィド

研究実績の概要

1) 平成26年度に引き続きホモマウス同士の交配によるMST-KOマウスの系統維持および繁殖を行った。本学と業者の両動物センターで行っている。また、バッククロスを開始した。昨年度の行動学的実験では不安行動が観察されたが、コントロールとして同腹マウスを使用して、再現性を確認するため、ヘテロマウス同士の交配による系統維持作業を薬理学教室で開始した。前頭葉と海馬において、HPLCを用いたドーパミン分析ではコントロールと有意な差は認められなかったが、セリトニンと５－ヒドロキシインドール酢酸は前頭葉で有意に増加していた。この原因として前頭葉と海馬でセロトニン1A受容体の発現量はRT-PCRを用いて定量すると有意の差は認めなかったが、前頭葉ではセロトニン2A受容体の発現量が有意に増加していた。以上の結果を学会（3rd Interbational Congress on H2S Biology and Medicine（招待講演）、第87回日本生化学会大会）等で発表した。
2) 海外（アテネ大学）と国内（明治薬科大学）にMST-KOマウスを提供して、血管内皮細胞が関与する循環不全の病態および脳内レセプターの異常と統合失調症との関連について共同研究を開始した。また、脳内のポリスルフィドの半定量を試みているが、結果が一定していない。
3) MST-KOマウに薬物投与による酸化ストレスを与える実験では組織変化に有意な差は認めなかった。

研究成果

• [雑誌論文] Sex differences in shotgun proteome analyses for chronic oral intake of cadmium in mice (2015)
  • 著者名/発表者名: Yamanobe Y, Nagahara N, Matsukawa T, Ito T, Niimori-Kita K, Chiba M, Yokoyama K, Takizawa T
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 10 ページ: 1-20
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0121819
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Proteome Analysis for Downstream Targets of Oncogenic KRAS - the Potential Participation of CLIC4 in Carcinogenesis in the Lung (2014)
  • 著者名/発表者名: Okudela K, Katayama A, Woo T, Mitsui H, Suzuki T, Tateishi Y, Umeda S, Tajiri M, Masuda M, Nagahara N, Kitamura H, Ohashi K
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 9 ページ: 1-10
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0087193
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Identification of nuclear phosphoproteins as novel tobacco markers in mouse lung tissue following short-term exposure to tobacco smoke (2014)
  • 著者名/発表者名: Niimori-Kita K, Ogino K, Mikami S, Kudoh S, Koizumi D, Kudoh N, Nakamura F, Misumi M, Shimomura T, Hasegawa K, Usui F, Nagahara N, Ito T
  • 雑誌名: FEBS Open Bio 巻: 4 ページ: 746-754
  • DOI: 10.1016/j.fob.2014.08.002
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] A mechanism of inactivation of rat mercaptopyruvate sulfurtransferase by bromopyruvate (2014)
  • 著者名/発表者名: Nagahara N
  • 学会等名: 第87回日本生化学会大会
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2014-10-04
• [学会発表] Mercaptopyruvate sulfurtarnsferase and hydrogen sulfide (2014)
  • 著者名/発表者名: Nagahara N
  • 学会等名: 3rd Interbational Congress on H2S Biology and Medicine
  • 発表場所: kyoto
  • 年月日: 2014-06-06
  • 招待講演