免疫疾患関連転写因子ＺＦＡＴのコンディショナルノックアウトマウスを用いた機能解析

2013 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 24590465
• 研究機関: 福岡大学
• 研究代表者: 土井 佳子 福岡大学, 医学部, 講師 (10341538)
• キーワード: T細胞 / ZFAT

研究概要

免疫疾患関連転写因子ZFAT(zinc-finger gene in AITD susceptibility region / zinc-finger with AT-hook)の免疫担当細胞における機能的役割の解明とその機能発現のための分子機序の解明を目指して、T細胞特異的にZFATを欠失したコンディショナルZFAT欠損マウスの胸腺内T細胞分化を中心にZFATの機能解析を進め、以下のような研究成果を得た。
T細胞特異的コンディショナルZFAT欠損マウス(LckCre-Zfatf/f mice)を樹立・解析した結果、胸腺内CD4+CD8+　double positive細胞数、CD4+　single positive細胞数およびCD8+　single positive 細胞数が著しく減少し、ポジティブセレクションの阻害が示された。LckCre-Zfatf/f miceとT cell antigen receptor (TCR)トランスジェニックマウスとの交配によって、ポジティブセレクションの阻害は回復されることはなかった。さらに、その詳細な分子メカニズムの解析の結果、LckCre-Zfatf/f miceでは、TCRからの刺激応答におけるCD3ζのリン酸化の阻害を伴う、セレクションのためのシグナリングにおいてERKおよびEgrの活性化の減弱が示された。ZFATがTCRからの適切な初期シグナリングにおける制御とERKおよびEgrの活性化を介したポジティブセレクションに必須であることを明らかにした。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

ZFATが胸腺内T細胞分化に重要な遺伝子であることを明らかにし、CD4+CD8+　double positive細胞数、CD4+　single positive細胞数およびCD8+　single positive 細胞数の減少等における更なるZFATの分子機序の解明に向けて研究が進んでいる。

今後の研究の推進方策

ZFATの生物学的機能ネットワークの解明を目指して、一次リンパ組織である胸腺T細胞を中心に、ZFATの機能解析とさらなる分子機序の解明を引き続き進めながら、ZFAT転写制御遺伝子の同定を試みる。表現型解析および発現変動遺伝子群から推察されるZFATの機能が、どのような標的遺伝子を転写制御することにより、もたらされている現象であるのかの解明を試み、研究を遂行する。

研究成果

• [雑誌論文] Zfat-deficiency results in a loss of CD3ζ phosphorylation with dysregulation of ERK and Egr activities leading to impaired positive selection. (2013)
  • 著者名/発表者名: Ogawa M, Okamura T, Ishikura S, Doi K, Matsuzaki H, Tanaka Y, Ota T, Hayakawa K, Suzuki H, Tsunoda T, Sasazuki T, Shirasawa S.
  • 雑誌名: PLoS One. 巻: 8 ページ: e76254
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0076254. eCollection 2013.
  • 査読あり
• [学会発表] 転写制御分子ZFAT欠損による胸腺内T細胞分化異常に関するZFAT分子機序の解明 (2013)
  • 著者名/発表者名: 土井佳子、小川雅弘、岡村匡史、石倉周平、角田俊之、田中陽子、白澤専二
  • 学会等名: 日本人類遺伝学会第58回大会
  • 発表場所: 仙台
  • 年月日: 20131121-20131121