ゴルジ・小胞体ストレス応答によりもたらされる癌幹細胞自己複製機構の解明

2014 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 24590472
• 研究機関: 秋田大学
• 研究代表者: 大森 泰文 秋田大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (90323138)
• 研究分担者: 吉岡 年明 秋田大学, 医学部, 講師 (80302264) ; 山本 洋平 秋田大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (70400512) ; 榎本 克彦 秋田大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (20151988) [辞退]
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2015-03-31
• キーワード: コネキシン / 癌幹細胞 / 小胞体ストレス / ゴルジ体ストレス / ATF6α / 癌進展

研究実績の概要

コネキシン32(Cx32)のゴルジ体内貯留によるATF6α活性化に伴う下流遺伝子の発現解析：　培養液からdoxycycline(Dox)を除くことで外来性のCx32を過剰発現させることのできるHuH7 Tet-off Cx32細胞を用いて、Cx32のゴルジ体内貯留を誘導しATF6αを活性化させた際に、転写因子ATF6αにより転写される下流遺伝子の発現量の変化を定量的RT-PCRで調べた。GRP78やCalnexinといった小胞体ストレスを解除する適応応答関連タンパクのmRNAが著明に増加したのに対し、GADD153などの小胞体ストレス時にアポトーシスを誘導する破壊的応答関連タンパクのmRNAは変化がなかった。また、これらのmRNAの発現変化はATF6αに対するsiRNAを導入すると認められなくなったことから、ATF6αの活性化は適応応答を惹起することが明らかとなった。

Cx32とATF6αとの複合体形成の検討：　Cx32とATF6αがゴルジ体で複合体を形成していることを確認するために、Cx32の過剰発現時に抗Cx32抗体を用いて免疫沈降を行い、ATF6αの共沈を検討したが、Cx32とATF6αの直接的な複合体形成は確認できなかった。

活性化型ATF6α過剰発現細胞の作製と癌幹細胞(CSC)数の変化および造腫瘍能の検討：　HuH7細胞に、活性化型ATF6αのcDNAをレトロウイルスベクターを用いて導入し、活性化型ATF6α過剰発現株を作製した。これらの細胞におけるCSCの増減を、FACSでside population(SP)画分を解析したところ、ATF6α過剰発現株ではSPが増加していた。したがって、ATF6αはCSCの自己複製を亢進することが分かった。また、SCIDマウス皮下への異種移植により造腫瘍能を検討したところ、ATF6α過剰発現株はより高い造腫瘍能を示した。

研究成果

• [雑誌論文] 舌癌細胞の悪性度を規定するConnexin26の細胞内局在 (2015)
  • 著者名/発表者名: 飯川延子，大森泰文，本田耕平，榎本克彦，石川和夫
  • 雑誌名: 耳鼻咽喉科ニューロサイエンス 巻: 29 ページ: 印刷中
  • オープンアクセス
• [雑誌論文] Dysfunction in gap junction intercellular communication induces aberrant behavior of the inner cell mass and frequent collapses of expanded blastocysts in mouse embyos. (2015)
  • 著者名/発表者名: Togashi K, Kumagai J, Sato E, Shirasawa H, Shimoda Y, Makino K, Sato W, Kumazawa Y, Omori Y, Terada, Y.
  • 雑誌名: J. Assist. Reprod. Genet. 巻: 32 ページ: 印刷中
  • DOI: 10.1007/s10815-015-0479-1
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Hepatic angiomyolipoma: differential diagnosis from other liver tumors in a special reference to vascular imaging - importance of early drainage vein. (2015)
  • 著者名/発表者名: Yoshioka M, Watanabe G, Uchinami H, Kudoh K, Hiroshima Y, Yoshioka T, Nanjo H, Funaoka M, Yamamoto Y.
  • 雑誌名: Surg. Case Rep. 巻: 1 ページ: 11
  • DOI: 10.1186/s40792-014-0008-y
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] The transformation of a nonfunctioning islet cell tumor of the pancreas into a proinsulinoma under conditions of lung metastasis. (2015)
  • 著者名/発表者名: Yoshioka M, Shibata S, Uchinami H, Watanabe G, Miyazawa H, Iida M, Yoshida M, Yoshioka T, Nanjo H, Yamamoto Y.
  • 雑誌名: Intern. Med. 巻: 54 ページ: 785-790
  • DOI: 10.2169/internalmedicine.54.3772
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Rapid immunohisto-chemistry based on alternating current electric field for intraoperative diagnosis of brain tumors. (2015)
  • 著者名/発表者名: Tanino M, Sasajima T, Nanjo H, Akesaka S, Kagaya M, Kimura T, Ishida Y, Oda M, Takahashi M, Sugawara T, Yoshioka T, et al.
  • 雑誌名: Brain Tumor Pathol. 巻: 32 ページ: 12-19
  • DOI: 10.1007/s10014-014-0188-y
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] ギャップ結合の破綻と癌幹細胞の自己複製亢進―その病理学的意義 (2014)
  • 著者名/発表者名: 大森泰文
  • 雑誌名: 秋田医学 巻: 41 ページ: 63-69
  • 謝辞記載あり
• [雑誌論文] IMP3 RNP safe houses prevent miRNA-directed HMGA2 mRNA decay in cancer and development. (2014)
  • 著者名/発表者名: Jonson L, Christiansen J, Hansen TV, Vikesa J, Yamamoto Y, Nielsen FC.
  • 雑誌名: Cell Rep. 巻: 7 ページ: 539-551
  • DOI: 10.1016/j.celrep.2014.03.015
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] Can exosomal miRNAs derived from human gallbladder cancer cells regulate angiogenesis? (2015)
  • 著者名/発表者名: Yamamoto Y, Nishijima A, Enomoto K, Omori Y.
  • 学会等名: 第74回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 名古屋市
  • 年月日: 2015-10-08 – 2015-10-10
• [学会発表] ゴルジ体に貯留するconnexin26は頭頸部癌細胞の造腫瘍能を亢進する (2015)
  • 著者名/発表者名: 飯川延子，大森泰文，本田耕平，石川和夫
  • 学会等名: 第39回日本頭頸部癌学会
  • 発表場所: 神戸市
  • 年月日: 2015-06-03 – 2015-06-06
• [学会発表] 肥大した成熟脂肪細胞径は肝の脂肪沈着と相関する (2015)
  • 著者名/発表者名: 西島亜紀，山本美保子，内橋和芳，青木茂久，大森泰文，杉原甫，戸田修二
  • 学会等名: 第104回日本病理学会総会
  • 発表場所: 名古屋市
  • 年月日: 2015-04-30 – 2015-05-02
• [学会発表] 頭蓋骨の完全欠損を含む多発奇形を伴った羊膜索症候群の一剖検例 (2015)
  • 著者名/発表者名: 鈴木麻弥，吉岡年明，山本洋平，西島亜紀，佐藤朗，大森泰文
  • 学会等名: 第104回日本病理学会総会
  • 発表場所: 名古屋市
  • 年月日: 2015-04-30 – 2015-05-02
• [学会発表] ヒト前立腺癌幹細胞におけるインテグリンβ4の役割 (2015)
  • 著者名/発表者名: 吉岡年明，山本洋平，鈴木麻弥，西島亜紀，南條博，榎本克彦，大森泰文
  • 学会等名: 第104回日本病理学会総会
  • 発表場所: 名古屋市
  • 年月日: 2015-04-30 – 2015-05-02
• [学会発表] 迅速免疫染色技術 (R-IHC) を用いた術中迅速病理診断―当院における180症例の検討― (2015)
  • 著者名/発表者名: 南條博，吉岡年明，廣嶋優子，南谷佳弘，笹嶋寿郎，吉田誠，後藤明輝，大森泰文，中村竜太，赤上陽一
  • 学会等名: 第104回日本病理学会総会
  • 発表場所: 名古屋市
  • 年月日: 2015-04-30 – 2015-05-02
• [学会発表] ヒト胆嚢癌産生exosome中のmiRNAsが血管新生に与える影響の検討 (2015)
  • 著者名/発表者名: 山本洋平，西島亜紀，吉岡年明，榎本克彦，大森泰文
  • 学会等名: 第104回日本病理学会総会
  • 発表場所: 名古屋市
  • 年月日: 2015-04-30 – 2015-05-02
• [学会発表] β4integrin promotes tumorigenesis of human prostate cancer by amplifying ErbB2 and c-Met signaling. (2014)
  • 著者名/発表者名: Yoshioka T, Yamamoto Y, Nanjo H, Omori Y.
  • 学会等名: 第73回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 横浜市
  • 年月日: 2014-09-25 – 2014-09-27
• [学会発表] Prognostic role of Reg 1 (2014)
  • 著者名/発表者名: Aboshanif M, Kawasaki Y, Ishikawa K, Omori Y.
  • 学会等名: 第73回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 横浜市
  • 年月日: 2014-09-25 – 2014-09-27
• [学会発表] Anti-tumor effect of novel anti-HER3 rat monoclonal antibodies. (2014)
  • 著者名/発表者名: Okita K, Abe S, Ueda S, Yagi H, Inoue M, Yoshioka T, Omori Y, Ogura D, Niwa S, Masuko T.
  • 学会等名: 第73回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 横浜市
  • 年月日: 2014-09-25 – 2014-09-27
• [学会発表] Specificity of novel monoclonal antibodies recognizing CD44v8, v9 and v10 of CD44R1 in human epithelial cancers. (2014)
  • 著者名/発表者名: Ueda S, Tokiwa R, Okazaki S, Okita K, Yagi H, Yoshioka T, Omori Y, Masuko T.
  • 学会等名: 第73回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 横浜市
  • 年月日: 2014-09-25 – 2014-09-27
• [学会発表] 舌癌細胞の悪性度を規定するConnexin26の細胞内局在 (2014)
  • 著者名/発表者名: 飯川延子，大森泰文，本田耕平，榎本克彦，石川和夫
  • 学会等名: 第32回耳鼻咽喉科ニューロサイエンス研究会
  • 発表場所: 大阪市
  • 年月日: 2014-08-29 – 2014-08-29
• [学会発表] 腹腔内腫瘍の一例 (2014)
  • 著者名/発表者名: 廣嶋優子，南條博，吉岡年明，大森泰文，後藤明輝，羽渕友則，山本雄造，柴田浩行
  • 学会等名: 第79回日本病理学会東北支部学術集会
  • 発表場所: 盛岡市
  • 年月日: 2014-07-19 – 2014-07-20
• [学会発表] 電界非接触撹拌迅速免疫染色技術を用いた術中迅速病理診断 (2014)
  • 著者名/発表者名: 南條博，吉岡年明，南谷佳弘，笹嶋寿郎，廣嶋優子，吉田誠，後藤明輝，赤上陽一
  • 学会等名: 第103回日本病理学会総会
  • 発表場所: 広島市
  • 年月日: 2014-04-24 – 2014-04-26
• [学会発表] 新生児に発症したFetal lung interstitial tumor(FLIT)の一例 (2014)
  • 著者名/発表者名: 吉岡年明，南條 博，伊藤 智，蛇口 琢，矢野道広，新井浩和，吉野裕顕，後藤明輝，大森泰文
  • 学会等名: 第103回日本病理学会総会
  • 発表場所: 広島市
  • 年月日: 2014-04-24 – 2014-04-26
• [学会発表] 右血胸から出血性shockに陥った心臓原発血管肉腫の1剖検例 (2014)
  • 著者名/発表者名: 山本洋平，吉岡年明，鈴木麻弥，大森泰文
  • 学会等名: 第103回日本病理学会総会
  • 発表場所: 広島市
  • 年月日: 2014-04-24 – 2014-04-26
• [備考] 秋田大学大学院医学系研究科 分子病態学・腫瘍病態学講座
  • URL: http://www.med.akita-u.ac.jp/~byouri1/