リステリア主要病原因子によるキナーゼを介したインフラマソーム制御機構の解析

2012 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 24590524
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 研究機関: 京都大学
• 研究代表者: 原 英樹 京都大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (30456892)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2015-03-31
• キーワード: リステリア / リステリオリシン O / インフラマソーム

研究概要

宿主インフラマソーム形成は、種々の微生物感染を感知することでカスパーゼ1の活性化を経て細胞死やIL-1beta、IL-18といったサイトカイン産生を含む多彩な細胞応答を誘導する自然免疫機構である。申請者の所属する研究室ではListeria monocytogenes（リステリア）感染においてAIM2とNLRP3を介したインフラマソームが主に活性化することを報告している。また、申請者はこれまでにリステリア感染で誘導されるインフラマソーム応答に主要病原因子であるリステリオリシンO（LLO）が関与することを突き止めており、今回の研究から4つのドメインから構成されるLLOのうち、ドメイン3が同活性に重要であることを見出した。AIM2とNLRP3はどちらもアダプター分子であるASCを必要とすることから、まずASC欠損型マウスを用いて、このインフラマソーム応答がin vivo感染においてどのような働きを示すか検討を行った。その結果、野生型マウスと比較してASC欠損型マウスでは脾臓における菌の増殖が低下しており、リステリア感染に対する抵抗性が上昇していた。このことからリステリア感染においてASCは宿主免疫に不利に作用することが判明した。次にインフラマソーム形成誘導機構についてin vitroにおける解析を行った。近年、種々のキナーゼがNLRP3インフラマソームに関与することが示唆されている。そこで、リステリア感染マクロファージにおいてキナーゼの関与を検討したところ、すでに報告のあるSykに加えてJNKが新たにインフラマソーム応答に関与することが判明した。今後、このキナーゼ応答におけるLLOの役割を解析していく。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

一部当初の計画と順番を変更して研究を進めているが、順調に進展しているため。

今後の研究の推進方策

当初の計画と一部順番を変更して研究を進めているが研究の進展および計画に問題はなく、今後も予定通り研究を遂行していく。

次年度の研究費の使用計画

必要に応じて研究費を執行したため当初の見込額と執行額は異なったが、研究計画に変更はなく、前年度の研究費も含めて予定通りに使用していく。

研究成果

• [雑誌論文] Cutting edge: nitric oxide inhibits the NLRP3 inflammasome. (2012)
  • 著者名/発表者名: Hernandez-Cuellar E, Tsuchiya K, Hara H, Fang R, Sakai S, Kawamura I, Akira S, Mitsuyama M.
  • 雑誌名: J. Immunol. 巻: 189 ページ: 5113-5117
  • DOI: 10.4049/jimmunol.1202479.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Induced pluripotent stem cells from CINCA syndrome patients as a model for dissecting somatic mosaicism and drug discovery. (2012)
  • 著者名/発表者名: Tanaka T, Takahashi K, Yamane M, Tomida S, Nakamura S, Oshima K, Niwa A, Nishikomori R, Kambe N, Hara H, Mitsuyama M, 他11名
  • 雑誌名: Blood 巻: 120 ページ: 1299-1308
  • DOI: 10.1182/blood-2012-03-417881.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Listeria monocytogenes strain-specific impairment of the TetR regulator underlies the drastic increase in cyclic di-AMP secretion and beta interferon-inducing ability. (2012)
  • 著者名/発表者名: Yamamoto T, Hara H, Tsuchiya K, Sakai S, Fang R, Matsuura M, Nomura T, Sato F, Mitsuyama M, Kawamura I.
  • 雑誌名: Infect. Immun. 巻: 80 ページ: 2323-2332
  • DOI: 10.1128/IAI.06162-11.
  • 査読あり
• [学会発表] The Thr223 in listeriolysin O is essential for the ability to induce the inflammasome activation (2013)
  • 著者名/発表者名: Hideki Hara, Kohsuke Tsuchiya, Ikuo Kawamura and Masao Mitsuyama
  • 学会等名: 第86回日本細菌学会総会
  • 発表場所: 幕張メッセ
  • 年月日: 20130318-20130320
• [学会発表] Involvement of the domain 3 of listeriolysin O in the inflammasome activation induced by Listeria monocytogenes infection (2012)
  • 著者名/発表者名: Hideki Hara, Kohsuke Tsuchiya, Ikuo Kawamura and Masao Mitsuyama
  • 学会等名: 第41回日本免疫学会学術集会
  • 発表場所: 神戸国際会議場
  • 年月日: 20121205-20121207
• [学会発表] リステリア感染で誘導されるインフラマソーム応答における 主要病原因子listeriolysin Oの関与とその責任領域の検討 (2012)
  • 著者名/発表者名: 原 英樹、土屋 晃介、河村 伊久雄、光山 正雄
  • 学会等名: 第59回トキシンシンポジウム
  • 発表場所: 帯広 とかちプラザ
  • 年月日: 20120830-20120831
• [学会発表] リステリア感染マクロファージで誘導されるインフラマソーム応答における主要病原因子listeriolysin Oの関与とその責任領域の検討 (2012)
  • 著者名/発表者名: 原 英樹、土屋 晃介、河村 伊久雄、光山 正雄
  • 学会等名: 第6回細菌学若手コロッセウム
  • 発表場所: 八王子 大学セミナーハウス
  • 年月日: 20120808-20120810
• [学会発表] リステリア感染における主要病原因子listeriolysin O依存的なインフラマソーム応答の役割 (2012)
  • 著者名/発表者名: 原 英樹、河村 伊久雄、土屋 晃介、光山 正雄
  • 学会等名: 第23回日本生体防御学会学術総会
  • 発表場所: 品川区総合区民会館
  • 年月日: 20120709-20120711
• [備考] 微生物感染症学
  • URL: http://www.med.kyoto-u.ac.jp/organization-staff/research/doctoral_course/r-009/