| 研究概要 |
研究実施計画の実施状況
1)6種類のヒト・トリプシノーゲン遺伝子のプロモーターのクローニング及び構造、機能解析:ヒト・トリプシノーゲン遺伝子hPRSS1,hPRSS2,hPRSS3-v1/v3,v2,v4のプロモーターをクローニングし、各種IRF分子、及びMyD88等のアダプター分子のトリプシノーゲン遺伝子・プロモーター活性への影響を見た。2)6種類のヒト・トリプシノーゲンcDNAsのクローニング及びReal-time PCRによる特異的mRNA定量法の確立:hPRSS1,hPRSS2,hPRSS3-v1,v2,v3,v4のcDNAをクローニングし、Real-time PCR法を用いて各分子の発現量を定量可能にした。3)ヒト・トリプシノーゲンcDNAsを強制発現させた細胞を使っての酵素学的解析:これらトリプシノーゲンcDNAを293T細胞に強制発現させ、エンテロキナーゼにより、活性化されることを確認した。4)Ca2+-結合蛋白質(Anxa10、S100-G)遺伝子のプロモーターとcDNAsのクローニング及び解析:Ca2+-結合蛋白質ANXA10,FETUB,REG3G,AHSGのcDNAをクローニングした。
5)IAV(A型インフルエンザ・ウイルス)感染実験:同じ肺癌由来ではあるが、IAV感染感受性の異なる2培養細胞にIAVを感染させ、IRFs、Trypsinogens、Interferon-stimulated genes (ISGs)を含む約100種類の遺伝子発現の変化をReal-time PCR法を用いて調べた。
6)HIV(Human immunodeficiency virus)感染モデル系での実験、7)HTLV-1(human T cell leukemia virus-1)感染細胞株を使った実験、8)分子創薬的視点からの検討に関しては実施準備中。
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