| 研究課題/領域番号 |
24590745
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 研究機関 | 信州大学 |
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研究代表者 |
堺 温哉 信州大学, 医学部, 委嘱講師 (20303555)
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| 研究分担者 |
日高 義彦 信州大学, 医学部, 助教 (40624713)
津田 洋子 信州大学, 医学部, 助手 (80512904)
塚原 照臣 信州大学, 医学部, 講師 (50377652)
稲葉 雄二 信州大学, 医学部, 准教授 (30334890)
野見山 哲生 信州大学, 医学部, 教授 (70286441)
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| 研究期間 (年度) |
2012-04-01 – 2015-03-31
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| キーワード | 環境 / アレルギー・ぜんそく / 衛生 / ゲノム |
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| 研究概要 |
本研究では汚染物質ばく露によりgDNAのメチル化異常が発生し、これにともなう免疫異常が喘息発症に関与すると仮説を立て、小児喘息患者におけるgDNAのメチル化異常の実態と大気環境との関連性を明らかにする調査を計画した。
小児の喘息患者は近年増加傾向にあり、化学物質など環境因子の関与が推測されるが、現在まで科学的知見が不足し、因果関係など詳細は不明である。しかし、大気汚染地域に居住する小児喘息患者は対象地域に居住する患者に比し、制御性T細胞（Treg）のFoxp3プロモーター領域が高メチル化状態にあり、これによってTreg機能抑制、異常免疫が発生したとの報告があり、喘息との関連を示唆している。又、汚染物質ばく露によるゲノムDNA（gDNA）のグローバルな低メチル化状態の発生が複数の研究で報告されている。グローバルな低メチル化は炎症性サイトカインの生産増加や、自己免疫疾患への関与が推測される。こうした背景から、既報を参考にメチル化解析の条件検討を行い、メチル化解析プロトコールの検討を行った。また、調査対象者のリクルートについて、対象地域の病院の小児科と打ち合わせを行った。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
メチル化解析プロトコールの検討、ならびに調査対象者のリクルートについて協議を重ね、おおむね予定通り進んでいる。
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| 今後の研究の推進方策 |
リクルートを継続し対象者の口腔内粘膜からｇDNAを抽出・精製する。25年度中に目標リクルート数を達成する。
24年度に確立させたメチル化解析プロトコールを用いて、対象者のgDNAにおけるLINE-1およびAluIリピート配列におけるDNAメチル化状態と、Foxp3のプロモーター領域におけるDNAメチル化状態を解析する。
また、関連学会に出席して最新情報を収集するとともに、24年度と25年度の途中成果についても発表を行う。
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| 次年度の研究費の使用計画 |
初年度に関しては、当初の計画で見込んだ費用よりも安価に研究が完了した。次年度の研究費の費用は、主に対象者から収集した口腔内粘膜資料からのゲノムDNAの抽出、精製、Bisulfite PCRの全処理および生成物の精製に際して必要となる備品に充てる。
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