| 研究課題/領域番号 |
24590884
|
|---|
| 研究機関 | 神戸大学 |
|---|
研究代表者 |
大田 美香 神戸大学, 医学部附属病院, 学術研究員 (20274706)
|
|---|
| 研究分担者 |
高岡 裕 神戸大学, 医学部附属病院, 准教授 (20332281)
一瀬 晃洋 神戸大学, 医学部附属病院, 特命准教授 (90362780)
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
2012-04-01 – 2015-03-31
|
| キーワード | 鍼治療 / 東洋医学 / Aig1l / 立体構造解析 / ホモロジーモデリング法 / フラグメントアセンブリ法 |
|---|
| 研究実績の概要 |
本研究の目的は、鍼治療効果のメカニズム研究に際して発見したAcupuncture-induced 1-L (Aig1l)タンパク質機能の解明と鍼治療効果機序の解明である。今年度は、(1)特異性の高いAig1l抗体の選択と、鍼治療効果に関与するシグナル伝達経路の解析系を確立した。(2) ホモロジーモデリング法とフラグメントアセンブリ法を組み合わせて、Aig1lタンパク質の立体構造の解析を行った。
(1)では、昨年度に候補とした2種類のAig1l抗体のうち、1種類が特異性の高い抗体であった。この抗体は組織解析には不適応であることが判明した。作成したポリクローナル抗体よりも特異性が高いモノクローナル抗体の作製の可否を検討したが、最近抗体の販売が開始されたため、市販の抗体を入手した。この抗体を用いてAig1lタンパク質の脳内局在や細胞局在を解明するため、現在も実験を継続している。次に、PI3K/AKTシグナル伝達経路が鍼治療効果に関与する結果を得た。PI3K/AKTシグナル伝達経路に関連するAkt, mTOR、p70S6Kのタンパク質のウェスタンブロティング法の解析条件を決定した。
(2)では、Aig1lタンパク質の立体構造の解析により、3個のCUBドメインと5個のSushiドメインの位置関係を明らかにした。そして、MOEプログラム（Chemical Computing Group社）とNAMD (イリノイ大学)を利用した新たな解析系を確立し、解析時間の短縮が実現した。また、1つの構造最適化計算を複数の計算機で分散処理できる解析系を確立した。本研究で作成した解析プログラムにより鋳型のない部分の立体構造を解析した結果、解析プログラムの改良点も明らかになった。引き続き、解析プログラムの研究開発に取り組む。
|
