消化器癌に対するＨＢ－ＥＧＦ－ＣＴＦを標的とした新規治療法とバイオマーカーの開発

2013 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 24590923
• 研究機関: 名古屋市立大学
• 研究代表者: 志村 貴也 名古屋市立大学, 医学(系)研究科(研究院), 研究員 (90405192)
• 研究分担者: 海老 正秀 名古屋市立大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (40611629) ; 吉田 道弘 名古屋市立大学, 医学(系)研究科(研究院), 研究員 (20636328)
• キーワード: HB-EGF / 胃癌 / 大腸癌 / EGFR

研究概要

申請者らは過去にHB-EGF-mC強制発現胃癌細胞株では、常にHB-EGF-CTFの核移行が阻害されることを報告している。wt-HB-EGF強制発現胃癌細胞株ではHB-EGF-CTFが核移行することから、wt-HB-EGF強制発現胃癌細胞株とHB-EGF-mC強制発現胃癌細胞株を比較検討することによりHB-EGF-CTFの核移行シグナルの機能解析を行うことが可能となった。我々はこのモデルの検討によりHB-EGF-CTFが核移行することにより胃癌細胞の遊走能および浸潤能が促進されることを見出したがそのメカニズムは不明であった。
そこでHB-EGF-CTFが胃癌浸潤能を誘導するメカニズムの解明のため、wt-HB-EGFおよびHB-EGF-CTF強制発現胃癌細胞株を使用し、浸潤・転移に関与する基知の遺伝子とHB-EGF-CTFとの関連性を検討し胃癌浸潤に関わる候補遺伝子を抽出した。次に、抽出した責任遺伝子と胃癌進展における臨床的意義を検討するため、臨床ステージの異なる35例の胃癌組織検体を使用しそれら数種のタンパクの免疫組織化学染色を行ないある種の関連性を同定した。
また近年HER2陽性胃癌に対しtrastuzumabが使用されているが、trastuzumab不応例および耐性例も存在しその耐性メカニズムは依然として不明である。HB-EGF-CTFはHER2と同じEGFRファミリーのリガンドであり胃癌細胞増殖・浸潤に深く関わることから、HER2耐性にも関わる事が示唆され、HER2発現胃がん細胞株を使用し、HB-EGF-CTFの意義に関しても同時に検討した。

現在までの達成度 (区分)

3: やや遅れている

理由

HB-EGF-CTFの胃がん浸潤に関わる候補遺伝子ならびにタンパクを数種同定し、現在その詳細を検索中である。
しかしながらブロードワイドな網羅的解析はまだ未施行であり、そのため次ステップの細胞実験の遂行が遅れている。

今後の研究の推進方策

まずは現時点で抽出したHB-EGF-CTF関連タンパクを用い、胃癌臨床検体に対してさらに追加の免疫組織化学染色を行う。
DNAマイクロアレイを用いて、HB-EGF-CTFの胃癌進展に関わる遺伝子のブロードワイドな網羅的検索を行う。
引き続き胃癌細胞レベルでのHB-EGF-CTFの浸潤ならびに抗がん剤耐性に対するメカニズムについて検討を行い、これらでよい結果が得られれば、腫瘍移植モデルによる追加検討を行う。

次年度の研究費の使用計画

2013年度中にマイクロアレイを施行し、ブロードワイドに網羅的探索をする予定であったが、別のプロジェクトに時間を取られ既知のHB-EGF関連遺伝子の解析・探索にとどまった。また腫瘍移植動物モデルを本年度中に開始する予定であったが、胃がん浸潤に関わる候補遺伝子スクリーニングに時間を要し開始できなかった。
早期にマイクロアレイを施行し、さらにブロードワイドな関連遺伝子の探索を行い、胃癌細胞実験を行い、さらに腫瘍移植動物モデルへと移行する。

研究成果

• [雑誌論文] Preoperative drainage using a transanal tube enables elective laparoscopic colectomy for obstructive distal colorectal cancer. (2013)
  • 著者名/発表者名: Yamada T, Shimura T, Sakamoto E, Kurumiya Y, Komatsu S, Iwasaki H, Nomura S, Kanie H, Hasegawa H, Orito E, Joh T
  • 雑誌名: Ｅｎｄｏｓｃｏｐｙ 巻: 45(4) ページ: 265-71
  • DOI: doi: 10.1055/s-0032-1326030
  • 査読あり
• [雑誌論文] Telmisartan inhibits cell proliferation by blocking nuclear translocation of ProHB-EGF C-terminal fragment in colon cancer cells (2013)
  • 著者名/発表者名: Ozeki K, Tanida S, Morimoto C, Inoue Y, Mizoshita T, Tsukamoto H, Shimura T, Kataoka H, Kamiya T, Nishiwaki E, Ishiguro H, Higashiyama S, Joh T
  • 雑誌名: PLoS One. 2013 巻: 8(2) ページ: e56770
  • DOI: doi: 10.1371/journal.pone.0056770
  • 査読あり
• [雑誌論文] Novel nasogastric tube-related criteria for urgent endoscopy in nonvariceal upper gastrointestinal bleeding (2013)
  • 著者名/発表者名: Iwasaki H, Shimura T, Yamada T, Aoki M, Nomura S, Kusakabe A, Kanie H, Ban T, Hayashi K, Joh T, Orito E
  • 雑誌名: Dig Dis Sci. 巻: Sep;58(9) ページ: 2564-71
  • DOI: doi: 10.1007/s10620-013-2706-x
  • 査読あり
• [雑誌論文] Annexin A2 regulates a disintegrin and metalloproteinase 17-mediated ectodomain shedding of pro-tumor necrosis factor-α in monocytes and colon epithelial cells. (2013)
  • 著者名/発表者名: Tsukamoto H, Tanida S, Ozeki K, Ebi M, Mizoshita T, Shimura T, Mori Y, Kataoka H, Kamiya T, Fukuda S, Higashiyama S, Joh T
  • 雑誌名: Inflamm Bowel Dis. 巻: Jun;19(7) ページ: 1365-73
  • DOI: doi: 10.1097/MIB.0b013e318281f43a
  • 査読あり
• [雑誌論文] Infliximab salvage therapy for patients with ulcerative colitis who failed to respond to tacrolimus. (2013)
  • 著者名/発表者名: Tsukamoto H, Tanida S, Mizoshita T, Ozeki K, Ebi M, Shimura T, Mori Y, Kataoka H, Kamiya T, Joh T
  • 雑誌名: Eur J Gastroenterol Hepatol. 巻: Jun;25(6) ページ: 714-8
  • DOI: doi: 10.1097/MEG.0b013e32835eb999
  • 査読あり
• [学会発表] Multicenter, Prospective, Ccomparative Trial of magnifying chromoendoscopy and endoscopic ultrasonography for stage diagnosis of early colorectal cancer. (2013)
  • 著者名/発表者名: Ebi M, Shimura T, Yamada T, Hirata Y, Nishiwaki H, Mizushima T, Asukai K, Togawa S, Takahashi S, Joh T
  • 学会等名: 21th UEG Week Berlin 2013
  • 発表場所: ICC Berlin - Internationales Congress-Centrum Berlin (Berlin)
  • 年月日: 20131012-20131016