研究課題/領域番号 |
24590954
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研究機関 | 群馬大学 |
研究代表者 |
山崎 勇一 群馬大学, 医学部附属病院, 助教 (00582404)
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研究分担者 |
柿崎 暁 群馬大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (80344935)
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研究期間 (年度) |
2012-04-01 – 2017-03-31
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キーワード | 核内受容体CAR / 肝再生 / オーバル細胞増殖 |
研究実績の概要 |
1. CARおよびPXRノックアウトマウスを用いた解析 CARおよびPXRノックアウトマウスを用いて14、21日間のDDC添加食での解析を進めた。CARを活性化するためTCPOBOPを投与した野生マウスを加え、DDC添加食後マウス肝で病理組織標本を作製し、HE染色及び、EpCAM、CK19の免疫組織染色によりオーバル細胞増殖を再確認した。CARおよびPXRノックアウトマウスを用いて14、21日間の0.165%エチオニン添加水コリン欠乏(CDE)食での解析を進めた。CDE食後マウス肝で、病理組織標本を作製し、HE染色及び、EpCAM、CK19の免疫組織染色によりオーバル細胞増殖を再確認した。また、CDE食後のマウス肝でCARにより調節される遺伝子およびオーバル細胞増殖に特異的な遺伝子発現をリアルタイムPCRを用いて再検討した 2. フローサイトメトリー法によるオーバル細胞の分離、同定 フローサイトメトリー法によりCARノックアウトマウス、野生マウスからオーバル細胞の分離、同定を行った。CARを活性化するためTCPOBOPを投与したCARノックアウトマウス、野生マウスからもオーバル細胞の分離、同定を行った。RNAを抽出し、CARにより調節されるCYP2Bl0、GADD45α などの遺伝子発現、オーバル細胞増殖に特異的なEpCAM、CK19などの遺伝子発現、肝再生に関連する遺伝子発現をリアルタイムPCRを用いて検討した。
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現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
CARおよびPXRノックアウトマウスを用いた解析およびフローサイトメトリー法によるオーバル細胞の分離、同定ともにおおむね順調に進展しているが、学会発表、論文作成のため追加実験を行う必要がある。
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今後の研究の推進方策 |
CARおよびPXRノックアウトマウスを用いた解析、初代培養オーバル細胞を用いたinvitroの実験系ともにこれまでの実験結果を再確認し、学会発表、論文発表に必要な追加実験を行う。
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次年度使用額が生じた理由 |
前年度までに購入した試薬、抗体、特別食を節約して使用した結果、物品費が節約された。
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次年度使用額の使用計画 |
CARおよびPXRノックアウトマウスを用いた解析および初代培養オーバル細胞を用いたinvitroの実験系においてこれまで得られた結果を再検討し、学会発表、論文発表に必要な追加実験に必要な試薬、抗体などの物品費、学会への出張費、英文校正、投稿料などに使用する。
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