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2012 年度 実施状況報告書

消化器癌における新規癌関連遺伝子REICの機能解析と臨床応用に関する研究

研究課題

研究課題/領域番号 24590977
研究種目

基盤研究(C)

研究機関岡山大学

研究代表者

加藤 博也  岡山大学, 大学病院, 助教 (60619039)

研究分担者 堤 康一郎  岡山大学, 大学病院, 助教 (40610910)
白羽 英則  岡山大学, 大学病院, 講師 (40379748)
山本 和秀  岡山大学, 医歯(薬)学総合研究科, 教授 (90140491)
那須 保友  岡山大学, 大学病院, 教授 (20237572)
研究期間 (年度) 2012-04-01 – 2015-03-31
キーワードREIC/Dkk-3 / 癌抑制遺伝子 / 癌遺伝子治療
研究概要

膵癌細胞株ASPC1,MIAPaCa2,Panc1,BxPC3,SUIT2,KLM1,T3M4を用い、REIC発現をウエスタンブロット法により確認した。また膵癌臨床検体についてREIC発現を免疫組織染色で確認した。いずれの膵癌細胞株においてもREIC発現は低下していた。膵癌臨床検体においても、66.7%(14/21)において発現低下が認められた。アデノウィルスベクター(Ad-REIC)を用いてREICを強制発現させ、細胞数をMTT assayで、細胞死をHoechst染色により評価した。コントロール遺伝子にはLacZ遺伝子を用いた。膵癌細胞株へのREIC導入により細胞数は減少し(ASPC1;33.5±7.8%, MIAPaCa2;48.9±26.6%)、アポトーシスが亢進した(ASPC1;292.8±54.6%, MIAPaCa2;365±110.2%)。このデータをもとに動物実験を開始した。15匹のヌードマウスをcontrol群、Ad-LacZ投与群、Ad-REIC投与群の3群に分け、全てのマウス皮下に膵癌細胞株ASPC1を2×106/100L接種した。翌週形成された腫瘍に対してAd-LacZ群、Ad-REIC群に対してはベクターを1.0×10*9pfu局所投与、contorol群にはPBSを投与したのち、腫瘍のサイズを経時的に評価した。Ad-REIC投与群では、Ad-LacZ群に比べてやや腫瘍縮小の傾向(80.3±16.0%)であったが、有意な差としては認められなかった。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

in vitroにおいて、難治癌である膵臓癌に対する治療効果が証明された。

今後の研究の推進方策

動物実験を継続して行っていく。Ad-REICの投与量、投与回数の検討や、immunocompetentマウスを用いて、免疫学的機序に伴う癌ワクチンとしての治療効果も検討していく。また膵臓癌に限らず、肝細胞癌、胆管癌においての実験も推進予定である。

次年度の研究費の使用計画

一部試薬などの未購入の物品があるため前年度からの繰越金が生じた。次年度はこれらの試薬に加え、実験動物の購入、各種ウェスタンブロットや免疫染色に用いる試薬、抗体の購入に使用する予定である。

  • 研究成果

    (1件)

すべて 2013

すべて 学会発表 (1件)

  • [学会発表] REIC/Dkk-3遺伝子導入による膵癌治療の検討2013

    • 著者名/発表者名
      内田大輔、白羽英則、加藤博也、永原照也、片岡淳郎、岩室雅也、堀口繁、堤 康一郎、渡部昌実、那須保友、公文裕巳、山本和秀
    • 学会等名
      日本すい臓学会大会
    • 発表場所
      仙台国際センター
    • 年月日
      20130725-20130726

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公開日: 2014-07-24  

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