研究課題
膵管を含めた管腔組織には、apical membraneより管腔内へ突出するprimary ciliaが存在する。本研究は、primary ciliaの機能が障害されている多発性嚢胞腎症のモデル動物であるPolycystic kidney(PCK)ラットの膵臓の機能と形態を解析する。primary ciliaの超微形態を解析するために、PCKラットの膵臓から単離した小葉間膵管の管腔をN-acetylcysteineを含む溶液で灌流して粘液層と取り除き、glutaraldehyde液に浸して固定した後、管腔を縦方向に切り開く。オスミウム染色し、凍結乾燥したサンプルを走査電子顕微鏡で観察した。管腔を観察すると、敷石状に並んだ膵導管細胞の1つ1つに、細胞のほぼ中心から管腔内に突出する長さ5ミクロン程度のprimary ciliaを観察することができた。固定前の灌流方向、管腔内のATPおよび圧変化による細胞内カルシウム反応と、primary ciliaの走行と形態(長さ、太さ)との関係を解析中である。Fura-2を用いて、細胞内カルシウム濃度の変化を解析した。管腔内圧を変化させた時の細胞内カルシウム反応は、PCKラットから単離した膵管の方が反応が大きかった。また、管腔内灌流液のカルシウムを除くと、PCKラットから単離した膵管では、自然発生的に細胞内カルシウム振動が観察されたが、正常ラットからの単離膵管では見られなかった。
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