Ｉｎ ｖｉｖｏの膵星細胞を標的とした慢性膵炎の治療戦略の開発

2014 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 24591016
• 研究機関: 熊本大学
• 研究代表者: 大村谷 昌樹 熊本大学, 生命資源研究・支援センター, 准教授 (60398229)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2015-03-31
• キーワード: 膵星細胞 / 慢性膵炎

研究実績の概要

本研究課題では、①活性化した膵星細胞に特異的に薬剤を取り込ませるシステムの開発、②治療効果を評価するための慢性膵炎（膵線維症）モデル動物の開発、を行った。まず、モデルマウスの開発はヒト膵分泌性トリプシンインヒビターSPINK1 (マウスホモログはSpink3)を改変することで、3系統の慢性膵炎モデルマウスを作出することができた。1つめはヒトSPINK1遺伝子をX染色体に置換して、雌ではX染色体不活性化によって、モザイク状に発現させ、正常腺房細胞と死細胞が膵臓内において混在するモデルである。8週齢で線維化と腺房細胞の脱落が見られた。2番目は野生型SPINK1遺伝子をSpink3 locusに置換して、ノックインマウスを樹立し、片方のアリルの発現を抑制すると4週齢で同様に慢性膵炎モデルとなった。3番目はヒト遺伝子膵炎で見られるSPINK1の変異体をマウスに置換して、遺伝性膵炎と同じような表現型のモデルの作出にも成功した。後者になるほど、ヒトの病態を良く反映していると考えられた。すべてのモデルにおいて、膵星細胞の活性化が顕著に見られ（aSMAのウエスタンで確認）、活性型星細胞がビタミンAを取り込みやすい性質を利用し、ビタミンA表出リポソーム（ローダミン含有）を作製し、このマウスに投与したが、星細胞への取り込みは僅かにしか見られなかった。肝星細胞でのビタミンAの取り込みに比較し、膵星細胞では、その活性が低いため、と考えられた。

研究成果

• [雑誌論文] Production of knockout mice by DNA microinjection of various CRISPR/Cas9 vectors into freeze-thawed fertilized oocytes. (2015)
  • 著者名/発表者名: Nakagawa, Y., Sakuma, T., Sakamoto, T., Ohmuraya, M., Nakagata, N. and Yamamoto, T.
  • 雑誌名: BMC Biotechnol. 巻: - ページ: -
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] SPINK1 Status in Colorectal Cancer, Impact on Proliferation, and Role in Colitis-associated Cancer. (2015)
  • 著者名/発表者名: Ida, S., Ozaki, N., Hirashima, K., Zaitsu, Y., Taki, K., Sakamoto, Y., Miyamoto, Y., Oki, E., Morita, M., Watanabe, M., Maehara, Y., Yamamura, K., Baba, H. and Ohmuraya, M.
  • 雑誌名: Mol Cancer Res. 巻: - ページ: -
  • 査読あり
• [雑誌論文] Staging laparoscopy leads to rapid induction of chemotherapy for unresectable pancreatobiliary cancers. (2015)
  • 著者名/発表者名: Hashimoto, D., Chikamoto, A., Sakata, K., Nakagawa, S., Hayashi, H., Ohmuraya, M., Hirota, M., Yoshida, N., Beppu, T. and Baba, H.
  • 雑誌名: Asian journal of endoscopic surgery. 巻: 8 ページ: 59-62
  • DOI: doi: 10.1111/ases.12138.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Clinical features and management of pancreatic solid pseudopapillary tumor. (2014)
  • 著者名/発表者名: Tsukamoto, M., Hashimoto, D., Chikamoto, A., Abe, S., Ohmuraya, M. and Baba, H.
  • 雑誌名: Am Surg. 巻: 80 ページ: 1212-1215
  • 査読あり
• [雑誌論文] Generation and analysis of serine protease inhibitor Kazal type 3-Cre driver mice. (2014)
  • 著者名/発表者名: Sakata, K., Ohmuraya, M., Araki, K., Suzuki, C., Ida, S., Hashimoto, D., Wang, J., Uchiyama, Y., Baba, H. and Yamamura, K.
  • 雑誌名: Exp Anim. 巻: 63 ページ: 45-53
  • 査読あり
• [雑誌論文] Autophagy regulation in pancreatic acinar cells is independent of epidermal growth factor receptor signaling. (2014)
  • 著者名/発表者名: Ozaki, N., Fukuchi, Y., Tomiyoshi, SR., Uehara, H., Ida, S., Wang, J., Araki, K., Sibilia, M., Baba, H., Yamamura, K. and Ohmuraya, M.
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun. 巻: 446 ページ: 224-230
  • DOI: doi: 10.1016/j.bbrc.2014.02.111.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Application of Oocyte Cryopreservation Technology in TALEN-Mediated Mouse Genome Editing. (2014)
  • 著者名/発表者名: Nakagawa, Y., Sakuma, T., Nakagata, N., Yamasaki, S., Takeda, N., Ohmuraya, M. and Yamamoto, T.
  • 雑誌名: Exp Anim. 巻: 63 ページ: 349-355
  • 査読あり
• [雑誌論文] Pancreatic cancer in the remnant pancreas following primary pancreatic resection. (2014)
  • 著者名/発表者名: Hashimoto, D., Chikamoto, A., Ohmuraya, M., Sakata, K., Miyake, K., Kuroki, H., Watanabe, M., Beppu, T., Hirota, M. and Baba, H.
  • 雑誌名: Surg Today. 巻: 44 ページ: 1313-1320
  • DOI: doi: 10.1007/s00595-013-0708-0.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Pancreaticodigestive anastomosis and the postoperative management strategies to prevent postoperative pancreatic fistula formation after pancreaticoduodenectomy. (2014)
  • 著者名/発表者名: Hashimoto, D., Chikamoto, A., Ohmuraya, M., Hirota, M. and Baba, H.
  • 雑誌名: Surg Today. 巻: 44 ページ: 1207-1213
  • DOI: doi: 10.1007/s00595-013-0662-x.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Impact of Postoperative Weight Loss on Survival After Resection for Pancreatic Cancer. (2014)
  • 著者名/発表者名: Hashimoto, D., Chikamoto, A., Ohmuraya, M., Abe, S., Nakagawa, S., Beppu, T., Takamori, H., Hirota, M. and Baba, H.
  • 雑誌名: JPEN J Parenter Enteral Nutr. 巻: - ページ: -
  • 査読あり
• [学会発表] オートファジー不全と慢性膵炎発症メカニズムの解明 (2014)
  • 著者名/発表者名: 大村谷昌樹,坂田和也,高城克暢,松元美由紀,荒木喜美,山村研一
  • 学会等名: 第37回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: パシフィコ横浜、横浜市、神奈川県
  • 年月日: 2014-11-25 – 2014-11-27
• [学会発表] SPINK insufficiency causes impaired autophagy resulting in chronic pancreatitis. (2014)
  • 著者名/発表者名: Ohmuraya, M., Sakata, K., Mareninova, O., Notohara, K., Gukovsky, I., Gukovskaya, A.
  • 学会等名: 2014 APA/JPS 45th Anniversary Meeting
  • 発表場所: Hapuna Beach Prince Hotel、ハワイ島、ハワイ、米国
  • 年月日: 2014-11-05 – 2014-11-08
• [学会発表] SPINK不全に伴うオートファジーの異常と慢性膵炎の発症 (2014)
  • 著者名/発表者名: 大村谷昌樹
  • 学会等名: 第22回若手膵臓研究会
  • 発表場所: 生田神社会館、神戸市、兵庫県
  • 年月日: 2014-10-22 – 2014-10-22
• [学会発表] オートファジー不全と慢性膵炎発症メカニズムの解明 (2014)
  • 著者名/発表者名: 大村谷昌樹
  • 学会等名: 第23回日本Cell Death学会学術集会
  • 発表場所: 東京医科歯科大学、東京都
  • 年月日: 2014-07-18 – 2014-07-19
• [学会発表] 急性膵炎におけるオートファジー選択的基質p62の役割 (2014)
  • 著者名/発表者名: 大村谷昌樹,能登原憲司,廣田昌彦
  • 学会等名: 第45回日本膵臓学会
  • 発表場所: 北九州国際会議場、北九州市、福岡
  • 年月日: 2014-07-11 – 2014-07-12