研究課題/領域番号 |
24591093
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研究機関 | 朝日大学 |
研究代表者 |
竹村 元三 朝日大学, 歯学部, 教授 (40283311)
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研究分担者 |
高橋 知之 久留米大学, 医学部, 准教授 (20332687)
金森 寛充 岐阜大学, 医学部附属病院, 助教 (20456502)
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研究期間 (年度) |
2012-04-01 – 2015-03-31
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キーワード | 心筋梗塞 / リモデリング / 細胞移植 / 遺伝子治療 |
研究実績の概要 |
本研究では、自己筋線維芽細胞をホーミング関連分子で修飾し経静脈投与することにより梗塞部位に移植し、もって内因性ホーミング機構のアナロジーを利用し梗塞組織を構造的に改変し、大型梗塞後心不全に対する非侵襲的細胞治療法の開発を試みる。平成24年度の到達目標は分子標的化筋線維芽細胞の調整である。Green fluorescence protein トランスジェニック(GFP-Tg) マウス (C57BL6バックグラウンド) の皮膚から線維芽細胞を採取・培養し、Transforming growth factor-β1 (TGF-β1) で刺激し筋線維芽細胞に分化させた。次に同細胞の分子標的化を行った。すなわち、マウスのCCR2 (MCP-1の受容体)ならびにIntegrin β1 (fibronectinへの接着因子) の遺伝子をクローニングし、レンチウィルスを用いて、上記筋線維芽細胞に導入した。遺伝子導入はWestern blotならびに免疫染色で確認した。平成25年度以降は分子標的化した筋線維芽細胞を陳旧性心筋梗塞モデルマウスに経静脈的に投与し、心機能ならびに左室リモデリングに対する治療効果を観察した。われわれのグループの他の類似研究において遺伝子導入する分子としては、CCR2 よりIntegrin β1 の方が望ましい結果を見出したため、Integrin β1に絞ってin vivo実験を進めている。実は実験進捗が予定より遅れている。その原因として研究代表者の異動があったことと、実験中、特に細胞移植中ないし直後の動物の死亡率が高いことがあげられる。後者はおそらく経静脈的に移植された細胞が塊を形成し肺塞栓を起こした可能性が高い。今後移植細胞の濃度を下げる、あるいは移植細胞を効率よく分散させるなどの工夫を加え実験を継続してゆく。
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