糸球体足細胞スリット膜形成と再生に関わる分子機構の解明

2014 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 24591214
• 研究機関: 順天堂大学
• 研究代表者: 栗原 秀剛 順天堂大学, 医学部, 准教授 (80311976)
• 研究分担者: 市村 浩一郎 順天堂大学, 医学部, 准教授 (10343485)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2015-03-31
• キーワード: 腎臓学 / 足細胞 / 糸球体濾過 / 細胞接着 / ネフローゼ

研究実績の概要

糸球体脚細胞スリット膜は濾過の重要な装置である。これまでに、代表者らを含め多くの研究者により、その分子構築が明らかにされてきたが、スリット膜構成分子の集合体形成と再生機構については未だ不明である。本研究では、１）スリット膜分子が足細胞成熟過程でどのように集合体を作るか、２）成熟した足細胞において、濾過をしながらスリット膜がどのようにして再生されるかを明らかにする。当年度は以下のような研究成果を得た。1）昨年度の成果からスリット膜構成分子がaPKCにより細胞膜へ運ばれる機構が明らかにできたが、その運び役となる分子を明らかにする目的でモーター分子の探索を行った結果、KIF11分子が候補として見いだされた。この分子は尿細管上皮細胞のタイト結合に一致して局在しており、細胞間接着分子の運び役としての可能性が示唆された。そこで、KIF11がタイト結合に発現している培養細胞を調べた結果、MDCK細胞と代表者が確立して腎由来のクローンの一つで発現を確認した。これらの細胞を用いてタイト結合分子とKIF11の関係を解析し、KIF11がタイト結合形成に重要な役割を担っていることを示唆する結果を得た。また、足細胞の形態を維持する分子としてmyosin IIAの解析を引き続き行っており、myosin IIAと中間径フィラメントであるビメンチンとの直接の結合を免疫沈降法で解析した結果、変異myosin IIA重鎖を発現する細胞ではビメンチンとの結合が変化していることが明らかとなった。この結果はmyosin IIAの変異がなぜ足細胞の機能に影響を及ぼすかを明らかにする重要なデータである。以上の結果は本年米国細胞生物学会にて発表予定であり、論文作成中である。

研究成果

• [雑誌論文] Podocyte injury-driven intracapillary plasminogen activator inhibitor type 1 accelerates podocyte loss via uPAR-mediated β1-integrin endocytosis. (2015)
  • 著者名/発表者名: KobayashiN, Ueno T, Ohashi K, Yamashita H, Takahashi Y, Sakamoto K, Manabe S, Hara S, Takashima Y, Dan T, Pastan I, Miyata T, Kurihara H, Matsusaka T, Reiser J, Nagata M
  • 雑誌名: Am J Physiol Renal Physiol 巻: 308 ページ: F614-F626
  • DOI: 10.1152/ajprenal.00616.2015.
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Afadin regulates RhoA/Rho-associated protein kinase signaling to control formation of actin stress fibers in kidney podocytes. (2015)
  • 著者名/発表者名: Saito K,Shiino T,Kurihara H,Harita Y,Hattori S, Ohta Y
  • 雑誌名: Cytoskeleton 巻: 72 ページ: 印刷中
  • DOI: 10.1002/cm.21211
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Epithelial protein lost in neoplasm regulates PDGF-mediated focal adhesion dynamics and motility of glomerular mesangaial cells. (2014)
  • 著者名/発表者名: Tsurumi H, Harita Y, Kurihara H, Kosaka H, Hayashi K, Matsunaga A, Kajiho Y, Kanda S, Miura K, Sekine T, Oka A, Ishizuka K, Horita S, Hattori M, Hattori S, Igarashi T
  • 雑誌名: Kidney Int 巻: 86 ページ: 548-557
  • DOI: 10.1038/ki.2014.85.
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] aPKClambda maintains the integrity of glomerular slit diaphragm through trafficking of nephrin to the cell surface. (2014)
  • 著者名/発表者名: Satoh D, Hirose T, Harita Y, Daimon C, Harada T, Kurihara H, Yamashita A, Ohno S
  • 雑誌名: J Biochem 巻: 156 ページ: 115-128
  • DOI: 10.1093/jb/mvu022.
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Laminin alpha1 regulates age-related mesangial cell proliferation and mesangial matrix accumulation through the TGFbeta pathway. (2014)
  • 著者名/発表者名: Ning L, Kurihara H, de Vega S, Ichikawa-Tomikawa N, Xu Z, Nonaka R, Yamada Y, Miner JH, Arikawa-Hirasawa E
  • 雑誌名: Am J Pathol 巻: 184 ページ: 1683-1694
  • DOI: 10.1016/j.ajpath.2014.02.006.
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [学会発表] 足細胞の細胞間接着を制御する新たな機構について (2014)
  • 著者名/発表者名: 栗原秀剛、坂井建雄
  • 学会等名: 第46回日本臨床分子形態学会総会・学術集会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2014-10-17 – 2014-10-18
• [学会発表] 中間径線維タンパクネスチンの足細胞における発現とその機能的意義について (2014)
  • 著者名/発表者名: 栗原秀剛、坂井建雄
  • 学会等名: 第57回日本腎臓学会学術総会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2014-07-04 – 2014-07-06
• [図書] ジュンケイラ組織学 第3版 (2015)
  • 著者名/発表者名: 栗原秀剛
  • 総ページ数: 567頁
  • 出版者: 丸善