| 研究実績の概要 |
１．引き続きAQP11欠損マウスでのオートファジーをLC3-GFPでの蛍光で検索した。腎臓とは違い、肝臓、小腸、筋肉においてオートファジーは野生型とは差がみられなかった。AQP11欠損マウスの腎臓の近位尿細管の初代培養をおこなってオートファジーをLC3-GFPでの蛍光で検索した。野生型細胞と比べてオートファジーが亢進していることがあきらかになった。AQP11欠損マウスの腎臓のオートファジー関連遺伝子の発現をreal-time PCRで定量した。生後２，３，６，８週のマウスを用いて野生型を１にして定量した。Map1lc3b, Becn1, Lamp2はすべての週齢において１以上であったが、Nbr1, Bnip3は１と差がなかった。週齢による変化はすべてにおいてみられなかったので、のう胞腎になってもオートファジーが刺激されていることが推定された。一方、アポトーシス関連遺伝子ではApaf1, Caspase1,4,12が週齢を経るにつれて増加していくことがあきらかになった。さらに酸化ストレス関連の遺伝子ではKeap1, Nrf2も１と差がなかった。以上の結果は2014.11にアメリカ腎臓学会で発表した。
２．AQP11欠損マウスの腎臓と脳のmRNAをそれぞれマイクロアレイで野生型と比較して変化した遺伝子をKeyMolnetで解析したところアポトーシスや小胞体ストレスと関連した遺伝子が腎臓・脳に共通して増加していた。
３．AQP11欠損マウスの脳脈絡叢（AQP11発現）のmRNAをマイクロアレイで野生型と比較したところ、Ｃａ輸送、アポトーシス、細胞接着に関連した遺伝子の増加がみられた。
４．脳の血管内皮細胞（AQP11発現）を密度勾配法で集めてきて遺伝子発現を比較したところ、AQP11欠損マウスではGLUT1の発現が野生型より増加していた。
|
