筋ジストロフィーの遺伝子・幹細胞移植治療の開発

2014 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 24591284
• 研究機関: 独立行政法人国立精神・神経医療研究センター
• 研究代表者: 木村 円 独立行政法人国立精神・神経医療研究センター, トランスレーショナルメディカルセンター, 室長 (60433025)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2015-03-31
• キーワード: 筋ジストロフィー / 遺伝子治療 / 幹細胞移植治療 / 再生医療

研究実績の概要

複数の短縮バージョンのdystrophin遺伝子および、骨格筋への特異的分化誘導を促す因子として転写因子活性をコントロールできるmyoD, Pax7, Pax3、マーカー遺伝子としてEGFP, LacZを発現するLentiviral vectorコンストラクトを作製した。さらに細胞の運命付けを司るregulatable geneとしてmyoD cDNAにestrogen receptor hormone binding domainを組み込んだmyoD-ER(T) 融合遺伝子を用い、dermal fibroblast等異なるcell fateの細胞をソースとし骨格筋への誘導コントロールを基本コンセプトとし、臨床現場で使われている薬剤TamoxifenによってmyoDのON-OFFがコントロールされる系を実現した。発現調節に骨格筋特異的promoter（CK6, MHCK7, CK8など）および異なるmiR targetシークエンス等（樹状細胞等の免疫担当細胞での発現を避け宿主の免疫応答を抑える）の組み合わせを検討した。
短縮型dystrophinについて、モデル動物mdx mouse にベクターを直接投与もしくはex vivoで遺伝子導入を行った。骨格筋線維と骨格筋幹細胞（筋衛星細胞 satellite cellなど）で長期間の遺伝子発現を観察した。長期発現の可否、病理学および病態生理学的な有効性の評価は、未だ検討段階にとどまった。

研究成果

• [雑誌論文] The TREAT-NMD DMD Global Database: Analysis of More than 7,000 Duchenne Muscular Dystrophy Mutations. (2015)
  • 著者名/発表者名: 1)Bladen CL, Salgado D, Monges S, Foncuberta ME, …, Kimura E, …, Bushby K, Verschuuren J, Aartsma-Rus A, Beroud C, Lochmuller H.
  • 雑誌名: Hum mutat. 巻: 36 ページ: 395-402
  • DOI: 10.1002/humu.22758
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Nationwide patient registry for GNE myopathy in Japan. (2014)
  • 著者名/発表者名: Mori-Yoshimura M, Hayashi YK, Yonemoto N, Nakamura H, Murata M, Takeda S, Nishino I, Kimura E.
  • 雑誌名: Orphanet J Rare Dis. 巻: 9 ページ: 150
  • DOI: 10.1186/s13023-014-0150-4
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] 筋ジストロフィーの臨床開発を推進する研究基盤： RemudyとMDCTN - The infrastructure for the clinical research of muscular dystrophies: Remudy and MDCTN (2014)
  • 著者名/発表者名: 木村 円, 中村治雅, 三橋里美, 竹内芙実, 森まどか, 清水玲子, 小牧宏文, 林由起子, 西野一三, 川井 充, 武田伸一
  • 雑誌名: 臨床神経学 巻: 54 ページ: 1069-70
  • DOI: 10.5692/clinicalneurol.54.1069
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [学会発表] Remudy, Japanese national registry for neuromuscular diseases, as a clinical utility model for various rare disease registries with international harmonization (2015)
  • 著者名/発表者名: Kimura E, Nakamura H, Mitsuhashi S, Mori-Yoshimura M, Takahashi PM, Takeuchi F, Wu S, Zheng Y, Matsumura T, Komaki H, Nishino I, Kawai M, Dawkins H, Béroud C, Lochmüller H, Takeda S, and Remudy Muscular Dystrophy Clinical Research Group
  • 学会等名: 14th AOMC Annual Scientific Meeting
  • 発表場所: Shangri-La Hotel, Bangkok, Thailand
  • 年月日: 2015-03-01 – 2015-03-04
• [学会発表] 患者登録システム, Remudy – の意義 (2014)
  • 著者名/発表者名: 木村 円
  • 学会等名: 第1回筋ジストロフィー医療研究会
  • 発表場所: 国立病院機構講堂, 東京
  • 年月日: 2014-10-24 – 2014-10-25
  • 招待講演
• [学会発表] National registry of Japanese dystrophinopathy patients: Remudy (2014)
  • 著者名/発表者名: Takeuchi F, Nakamura H, Mitsuhashi S, Mori-Yoshimura M, Hayashi YK, Shimizu R, Komaki H, Nishino I, Kawai M, Takeda S, Kimura E.
  • 学会等名: 19th International WMS Congress
  • 発表場所: the Academic Center of Berlin, in the Langenbeck-Virchow-Haus, Berlin, Germany
  • 年月日: 2014-10-07 – 2014-10-11
• [学会発表] DMD/BMD patient registry in Japan: Remudy (2014)
  • 著者名/発表者名: Kimura E, Nakamura H, Hayashi YK, Mori-Yoshimura M, Takeuchi F, Shimizu R, Komaki H, Nishino I, Kawai M, Takeda S
  • 学会等名: 13th International Congress on Neuromuscular Diseases ICNMD
  • 発表場所: Acroplis Convention Centre, Nice, France
  • 年月日: 2014-07-05 – 2014-07-10
• [学会発表] 筋ジストロフィーの臨床開発を推進する研究基盤：RemudyとMDCTN (2014)
  • 著者名/発表者名: 木村 円, 中村治雅, 三橋里美, 竹内芙実, 森まどか, 清水玲子, 小牧宏文, 林由起子, 西野一三, 川井 充, 武田伸一
  • 学会等名: 第55回日本神経学会学術大会
  • 発表場所: 福岡国際会議場, 福岡
  • 年月日: 2014-05-21 – 2014-05-24
  • 招待講演
• [図書] Clinical Neuroscience (2015)
  • 著者名/発表者名: 木村 円
  • 総ページ数: 113-5
  • 出版者: 中外医学社
• [図書] BRAIN and NERVE (2014)
  • 著者名/発表者名: 木村 円, 中村治雅, 西野一三
  • 総ページ数: 62-8
  • 出版者: 医学書院