下垂体腺腫におけるマイクロＲＮＡ分子ネットワークの解明

2014 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 24591365
• 研究機関: 徳島大学
• 研究代表者: 吉本 勝彦 徳島大学, ヘルスバイオサイエンス研究部, 教授 (90201863)
• 研究分担者: 岩田 武男 徳島大学, ヘルスバイオサイエンス研究部, 助教 (10350399) ; 水澤 典子 徳島大学, ヘルスバイオサイエンス研究部, 助教 (80254746)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2015-03-31
• キーワード: 下垂体腺腫 / miRNA

研究実績の概要

前年度までの解析において、ACTH産生腺腫においてmiR-132、miR-551bの発現が低下していること、両者のいずれかを発現させるとACTH産生腫瘍由来細胞株AtT-20の発現増殖が抑制されること、miR-551bの標的遺伝子の一つがEBBB4遺伝子であることを、ルシフェラーゼアッセイにより明らかにした。
発現低下の機序を明らかにする目的で、2個のACTH産生腺腫および2個の正常下垂体組織より抽出したゲノムDNAをバイサルファイト処理した。miR-551bは第3染色体長碗26.2領域に位置するEGFEM1Pのイントロン3部分に位置している。miR-551bの正確なプロモーター部位は明らかにされていないが、EGFEM1Pのエクソン1とイントロン1にまたがる領域に42個のCpG配列があるため、この部分に焦点を当て解析した。その結果、正常下垂体およびACTH産生腺腫いずれにおいてもCpG部位はメチル化されていなかった。本結果は別の部位に存在するCpGアイランドのメチル化が関与している可能性やmiR-551bが位置する3q26.2のゲノムDNAのコピー数が減少している可能性がある。ACTH産生腺腫におけるゲノムDNAのコピー数の解析にはarray commpative genomic hybridizationなどの方法を用いる必要が有る。
また、この解析過程においてACTH産生腺腫および非機能性腺腫において14q32に位置するインプリンティング領域におけるmiRNAクラスターやlong non-coding RNAの一つであるMEG3およびRTL1の発現が低下していることを見出した。この発現低下の機序の解析を進めている。

研究成果

• [雑誌論文] Germline deletion and a somatic mutation of the PRKAR1A gene in a Carney complex-related pituitary adenoma. (2015)
  • 著者名/発表者名: T Iwata, T Tamanaha, R Koezuka, M Tochiya, H Makino, I Kishimoto, N Mizusawa, S Ono, N Inoshita, S Yamada, A Shimatsu, K Yoshimoto.
  • 雑誌名: Eur J Endocrinol. 巻: 172 ページ: K5－10
  • DOI: 10.1530/EJE-14-0685
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] FGFR4 Polymorphic Variants Modulate Phenotypic Features of Cushing Disease. (2014)
  • 著者名/発表者名: Nakano-Tateno T, Tateno T, Hlaing MM, Zheng L, Yoshimoto K, Yamada S, Asa SL, Ezzat S.
  • 雑誌名: Mol Endocrinol. 巻: 28 ページ: 525-533
  • DOI: 10.1210/me.2013-1412
  • 査読あり
• [雑誌論文] A Novel C-terminal Nonsense Mutation, Q315X, of the Aryl Hydrocarbon Receptor-Interacting Protein Gene in a Japanese Familial Isolated Pituitary Adenoma Family. (2014)
  • 著者名/発表者名: Iwata T, Yamada S, Ito J, Inoshita N, Mizusawa N, Ono S, Yoshimoto K.
  • 雑誌名: Endocr Pathol. 巻: 25 ページ: 273-281
  • DOI: 10.1007/s12022-014-9318-7
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] MicroRNAs in Human Pituitary Adenomas. (2014)
  • 著者名/発表者名: Li XH, Wang EL, Zhou HM, Yoshimoto K, Qian ZR.
  • 雑誌名: Int J Endocrinol. 巻: 2014 ページ: 435171
  • DOI: 10.1155/2014/435171
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] PRKAR1A を含む広範な胚細胞性欠失を認めた下垂体性巨人症の一例 (2014)
  • 著者名/発表者名: 肥塚諒、玉那覇民子、菱田藍、橡谷真由、大畑洋子、槇野久士、島津章、岩田武男、吉本勝彦、井下尚子、山田正三、岸本一郎
  • 学会等名: 第24回 臨床内分泌代謝Update
  • 発表場所: 大宮ソニックシティ （埼玉県・大宮市）
  • 年月日: 2014-11-28 – 2014-11-29
• [学会発表] 成長ホルモン産生腺腫におけるPRKACA遺伝子活性化変異の検討 (2014)
  • 著者名/発表者名: 小野信二、岩田武男, 水澤典子, 山田正三、吉本勝彦
  • 学会等名: 第14回日本内分泌学会四国地方会
  • 発表場所: 徳島大学医学部（徳島県・徳島市）
  • 年月日: 2014-09-06 – 2014-09-06