研究課題
血液腫瘍性疾患の治療にsgRNAを用いたTRUE gene silence法を用いることを目的とし、sgRNAをマウスゼノグラフトモデルに投与したin vivoの実験を行い、sgRNAの臨床的有用性についての検討を行った。Bcl-2 mRNAをtargetとしてsgRNAを作成し、Bcl-2を高発現している白血病細胞株をマウスに移植し、移植と同時にsgRNAも投与した。sgRNAを投与したモデルにおいて腫瘍生着率の低下と生存期間の延長が認められた。以上の検討のように、本研究グループでデザインしたヘプタマーsgRNAを用いて、腫瘍細胞の増殖に必須なタンパクと考えられる腫瘍抗原のmRNAを阻害する方法が白血病等の腫瘍に対する治療法として応用可能であるかどうかについて明らかにする目的で検行った。本科学研究費を用いて行った検討で、sgRNAによるmRNA切断法を効果的に応用できる腫瘍抗原等の種類として、WT1，PRAME，hTERT，Bcl-2等を確認することができた。すなわち、WT1, PRAME，hTERT, Bcl-2等のmRNAと結合して、tRNA前駆体様構造を示す様にデザインしたsgRNAを腫瘍細胞に加えることにより、腫瘍細胞に内在するtRNaseZLを用いて、腫瘍抗原mRNAを効果的に切断できることを明らかにした。今回の検討では、主に白血病等の造血器腫瘍細胞を対象として、腫瘍細胞のアボトーシス・分化の抑制、増殖を促進する因子に対し、tRNA前駆体様構造を形成することができるようにデザインしたsgRNAを用いて当該mRNAの発現を抑制することにより、アポトーシスの誘導、細胞増殖の抑制が可能かどうかの検討を行い、有効なsgRNAをいくつか選択した。また、これらのsgRNAを用いた腫瘍細胞のアポト一シス誘導、細胞増殖の抑制が、我々が想定した腫瘍細胞に内在性のtRNaseZLをもちいたメカニズムにより行われていることを、sgRNAで処理した腫瘍細胞の当該mRNAをシークエンスすることにより確認することができ、sgRNAを用いた核酸医薬の開発がかのうであることを明らかにした。
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Int J Med Sci
巻: 13 ページ: 0-0
10.7150/ijms.13601
Mol Med Rep
巻: 12 ページ: 2443-50
10.3892/mmr.2015.3685
Int J Oncol
巻: 46 ページ: 1699-709
10.3892/ijo.2015.2846
