白血病におけるＷＴ１遺伝子のがん遺伝子機能解析とＷＴ１分子標的療法の開発

2014 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 24591395
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 尾路 祐介 大阪大学, 医学(系)研究科(研究院), 寄附講座教授 (20294100)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2015-03-31
• キーワード: WT1 / DNA repair / chemoresistance

研究実績の概要

【ＷＴ1遺伝子のゲノム安定性・ＤＮＡ損傷修復への関与について】 WT1の4種のisoformのうち1種のisoform(WTC isoform)のみが3つのDNA損傷修復関連因子XRCC2, Rad51D, Rad54の発現を増加させることをこれまでに明らかにした。今年度は、WTC isoformが転写因子として直接これらの遺伝子発現を制御しうるかを検討し、クロマチン免疫沈降法によりWTC isoformタンパクがXRCC2およびRad51Dプロモーターの複数の領域に結合することを明らかにした。さらに免疫組織化学の二重染色法を用いて、肺癌細胞においてWT1タンパクがXRCC2タンパクおよびRad51Dタンパクのそれぞれと癌細胞特異的に共発現していることを明らかにした(Mol Carcinog, in press)。
【ＷＴ1遺伝子の腫瘍細胞の代謝制御について】 ＷＴ1タンパクは細胞代謝経路の重要な酵素Y1およびY2タンパクと直接結合する。まず、発現精製した全長のWT1タンパクがin vitroでY1およびY2タンパクの酵素活性を上昇させることを示し、WT1タンパクが直接Y1およびY2タンパクに結合しそれらの酵素活性を調節しうることを明らかにした。次にWT1タンパクとY1およびY2との結合領域をY1およびY2とWT1の部分配列タンパクとの親和性の表面プラズモン共鳴法による解析により決定した。さらにY1およびY2におけるWT1タンパクとの結合領域を明らかにするために、それぞれのタンパクの部分タンパクの発現・精製を行い、これらと結合するWT1の部分配列タンパクを表面プラズモン共鳴法により同定した。
【WT1分子標的療法の開発】 細胞死を誘導するWT1ペプチドはWT1を発現しない細胞においては細胞死を誘導せず、その効果がWT1を発現する腫瘍細胞に特異的であることを確認した。

研究成果

• [雑誌論文] Transduction of a Novel HLA-DRB1*04:05-restricted, WT1-specific TCR Gene into Human CD4+ T Cells Confers Killing Activity Against Human Leukemia Cells. (2015)
  • 著者名/発表者名: Katsuhara A, Fujiki F, Aoyama N, Tanii S, Morimoto S, Oka Y, Tsuboi A, Nakajima H, Kondo K, Tatsumi N, Nakata J, Nakae Y, Takashima S, Nishida S, Hosen N, Sogo S, Oji Y, Sugiyama H.
  • 雑誌名: Anticancer Res 巻: 35 ページ: 1251-1261
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Wilms tumor 1 peptide vaccination combined with temozolomide against newly diagnosed glioblastoma: safety and impact on immunological response. (2015)
  • 著者名/発表者名: Hashimoto N, Tsuboi A, Kagawa N, Chiba Y, Izumoto S, Kinoshita M, Kijima N, Oka Y, Morimoto S, Nakajima H, Morita S, Sakamoto J, Nishida S, Hosen N, Oji Y, Arita N, Yoshimine T, Sugiyama H.
  • 雑誌名: Cancer Immunol Immunother 巻: - ページ: -
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Two distinct effector memory cell populations of WT1 (Wilms' tumor gene 1)-specific cytotoxic T lymphocytes in acute myeloid leukemia patients. (2015)
  • 著者名/発表者名: Nakae Y, Oka Y, Fujiki F, Morimoto S, Kamiya T, Takashima S, Nakata J, Nishida S, Nakajima H, Hosen N, Tsuboi A, Kyo T, Oji Y, Mizuguchi K, Kumanogoh A, Sugiyama H.
  • 雑誌名: Cancer Immunol Immunother 巻: - ページ: -
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Wilms' tumor gene WT1 promotes homologous recombination-mediated DNA damage repair. (2014)
  • 著者名/発表者名: Oji Y, Tatsumi N, Kobayashi J, Fukuda M, Ueda T, Nakano E, Saito C, Shibata S, Sumikawa M, Fukushima H, Saito A, Hojo N, Suzuki M, Hoshikawa T, Shimura T, Morii E, Oka Y, Hosen N, Komatsu K, Sugiyama H.
  • 雑誌名: Mol Carcinog 巻: - ページ: -
  • DOI: 10.1002/mc.22248
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Prognostic significance of specific anti-WT1 IgG antibody level in plasma in patients with ovarian carcinoma. (2014)
  • 著者名/発表者名: Andersson C, Oji Y, Ohlson N, Wang S, Li X, Ottander U, Lundin E, Sugiyama H, Li A.
  • 雑誌名: Cancer Med 巻: 3 ページ: 909-918
  • DOI: 10.1002/cam4.244
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] The translation elongation factor eEF2 is a novel tumor associated antigen overexpressed in various types of cancers. (2014)
  • 著者名/発表者名: Oji Y, Tatsumi N, Fukuda M, Nakatsuka S, Aoyagi S, Hirata E, Nanchi I, Fujiki F, Nakajima H, Yamamoto Y, Shibata S, Nakamura M, Hasegawa K, Takagi S, Fukuda I, Hoshikawa T, Murakami Y, Mori M, Inoue M, Naka T, Tomonaga T, Shimizu Y, Nakagawa M, Hasegawa J, Nezu R, Inohara H, Izumoto S, Nonomura N, Yoshimine T, et al.
  • 雑誌名: Int J Oncol 巻: 44 ページ: 671-681
  • DOI: 10.3892/ijo.2014.2318
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] The Wilms' Tumor Gene WT1 - 17AA/- KTS Splice Variant Increases Tumorigenic Activity Through Up-Regulation of Vascular Endothelial Growth Factor in an In Vivo Ovarian Cancer Model. (2014)
  • 著者名/発表者名: Yamanouchi K, Ohta T, Liu Z, Oji Y, Sugiyama H, Shridhar V, Matsumura S, Takahashi T, Takahashi K, Kurachi H.
  • 雑誌名: Transl Oncol 巻: 24 ページ: 580-589
  • DOI: 10.1016/j.tranon.2014.07.008
  • 査読あり / オープンアクセス
• [備考] 大阪大学免疫造血制御学研究室
  • URL: http://sahswww.med.osaka-u.ac.jp/~hmtonc/index.html