線溶系インヒビター（ＰＡＩ－１）欠損症ｉＰＳ細胞から成熟分化細胞の確立と機能解析

2014 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 24591420
• 研究機関: 浜松医科大学
• 研究代表者: 佐野 秀人 浜松医科大学, 医学部, 助教 (80623842)
• 研究分担者: 浦野 哲盟 浜松医科大学, 医学部, 教授 (50193967) ; 鈴木 優子 浜松医科大学, 医学部, 准教授 (20345812)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2015-03-31
• キーワード: PAI-1 / iPS細胞 / 内皮細胞 / 血管新生 / 細胞接着

研究実績の概要

これまでにPlasminogen Activator Inhibitor-1（PAI-1）欠損患者の血液から樹立したiPS細胞を用いて、血管内皮細胞に分化させ単離した。この単離した血管内皮細胞についての詳細な解析を行った。1) 細胞の形状については、PAI-1欠損患者由来iPS細胞から単離した内皮細胞（PAI-1 iPS-ECs）は、コントロールiPS細胞由来内皮細胞（Control iPS-ECs）と大きな差異はなかった。2) 細胞の接着性について、継続培養していくとPAI-1 iPS-ECsで培養皿からの剥離が早かった。細胞間での接着についても検討中である。3) Tube formationについて、Matrigel上でiPS-ECsの培養を行いTube formationを観察したところ、PAI-1 iPS-ECsにおいて形成抑制が見られた。4) 細胞の遊走について、PAI-1 iPS-ECsはControl iPS-ECsに比べてVEGF存在下で遊走能の促進が見られたが、VEGF非存在下においてもPAI-1 iPS-ECsは顕著な遊走能が観察された。以上の結果より、血管新生先端部で見られるTip-Stalk内皮細胞間の相互作用において、PAI-1が寄与していることが示唆された。今後は、ヒトPAI-1と血管新生について、細胞接着等を含めた分子レベルでの詳細な検討を更に続けていく。

研究成果

• [雑誌論文] Endogenously generated plasmin at the vascular wall injury site amplifies lysine binding site-dependent plasminogen accumulation in microthrombi. (2015)
  • 著者名/発表者名: Brzoska T., Tanaka-Murakami A., Suzuki Y., Sano H., Kanayama N., Urano T.
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 10 ページ: e0122196
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0122196
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Endothelial HIF-2 mediates protection and recovery from ischemic kidney injury. (2014)
  • 著者名/発表者名: Kapitsinou P.P., Sano H., Michael M., Kobayashi H., Davidoff O., Bian A., Yao B., Zhang M.Z., Harris R.C., Duffy K.J., Erickson-Miller C.L., Sutton T.A., Haase V.H.
  • 雑誌名: J Clin Invest. 巻: 124 ページ: 2396
  • DOI: 10.1172/JCI69073
  • 査読あり
• [学会発表] PAI-1欠損患者由来iPS細胞を用いた血管内皮細胞機能の解析 (2015)
  • 著者名/発表者名: 佐野秀人、大津真、岩城孝行、長橋ことみ、Brzoska Tomasz 、鈴木優子、金山尚裕、浦野哲盟
  • 学会等名: 第37回日本血栓止血学会学術集会
  • 発表場所: 甲府市
  • 年月日: 2015-05-21 – 2015-05-23
• [学会発表] Genenration and differentiation of iPS cells derived from plasminogen activator inhibitor-1 deficient patient (2015)
  • 著者名/発表者名: Sano H, Otsu M, Iwaki T, Nagahashi K, Brzoska T, Suzuki Y, Kanayama N, Urano T
  • 学会等名: 第92回 日本生理学会大会
  • 発表場所: 神戸市
  • 年月日: 2015-03-21 – 2015-03-23
• [学会発表] Genenration and differentiation of inducible pluripotent stem (iPS) cells derived from plasminogen activator inhibitor-1 deficient patient (2014)
  • 著者名/発表者名: Sano H, Otsu M, Iwaki T, Nagahashi K, Suzuki Y, Kanayama N, Urano T
  • 学会等名: 22nd International Congress on Fibrinolysis and Proteolysis
  • 発表場所: フランス、マルセイユ
  • 年月日: 2014-07-06 – 2014-07-09
• [学会発表] Plasminogen Activator Inhibitor-1欠損患者からのiPS細胞樹立 (2014)
  • 著者名/発表者名: 佐野秀人、大津真、岩城孝行、長橋ことみ、鈴木優子、金山尚弘、浦野哲盟
  • 学会等名: 第36回日本血栓止血学会学術集会
  • 発表場所: 大阪市
  • 年月日: 2014-05-29 – 2014-05-31
• [学会発表] Generation of inducible pluripotent stem (iPS) cells from plasminogen activator inhibitor-1 deficient patient and differentiation into endothelial cells (2014)
  • 著者名/発表者名: Sano H, Otsu M, Iwaki T, Nagahashi K, Suzuki Y, Kanayama N, Urano T
  • 学会等名: 18th International Vascular Biology Meeting
  • 発表場所: 京都市
  • 年月日: 2014-04-14 – 2014-04-17