血友病Ａインヒビター制御を目的とした人工多能性幹細胞の応用

2014 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 24591430
• 研究機関: 自治医科大学
• 研究代表者: 窓岩 清治 自治医科大学, 医学部, 講師 (70296119)
• 研究分担者: 小林 英司 自治医科大学, 医学部, 客員教授 (00245044) ; 大森 司 自治医科大学, 医学部, 講師 (70382843)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2015-03-31
• キーワード: 血友病 / インヒビター / 免疫寛容 / 人工多能性幹細胞 / 遺伝子治療 / 細胞移植療法 / 胸腺上皮細胞

研究実績の概要

本研究は、血液凝固第VIII因子に対する同種抗体（第VIII因子インヒビター）の発症リスクが高い重症型血友病A患者に対して、患者自身の体細胞から樹立した人工多能性幹細胞（iPS細胞）を用いた遺伝子細胞治療法により、インヒビター産生を特異的に制御するため臨床研究への応用を目的とする。本年度は、血友病Aマウス由来iPS細胞にSIVベクターを用いてAIREプロモーターの下流にヒト第VIII因子cDNAを連結させたコンストラクトを遺伝子導入させた後に、新規に確立したin vitro分化誘導系により胸腺上皮細胞へ分化誘導させ、高解像度超音波システムガイド下でマイクロインジェクション法を用いて、血友病Aマウスの胸腺組織に選択的に細胞移植を行った。FVIIIを発現するiPS細胞由来胸腺上皮細胞の移植マウスに対して、FVIIIの反復刺激により生じる抗FVIII抗体価をBethesda法により定量解析した。FVIII遺伝子を導入したiPS細胞由来胸腺上皮細胞の移植マウスは、非遺伝子導入胸腺上皮細胞移植マウスに比較してFVIII反復刺激後の抗FVIII価が有意に低下した（24.8±37.0 vs 98.9±69.1 BU/mL, p=0.025）。これらのことから、iPS細胞由来胸腺上皮細胞を用いた遺伝子細胞治療法は、血友病Aに対する免疫寛容導入療法の有用な研究基盤となると考えられる。

研究成果

• [雑誌論文] Endothelial cells and fibrinolysis in sepsis-induced DIC (2015)
  • 著者名/発表者名: Madoiwa, S.
  • 雑誌名: J Intensive Care 巻: 3 ページ: 1-8
  • DOI: 10.1186/s40560-015-0075-6
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Changes in blood coagulation-fibrinolysis markers by pneumatic tourniquet during total knee joint arthroplasty with venous thromboembolism. (2014)
  • 著者名/発表者名: Watanabe, H., I. Kikkawa, S. Madoiwa, H. Sekiya, S. Hayasaka, and Y. Sakata.
  • 雑誌名: J Arthroplasty 巻: 29 ページ: 569-573
  • DOI: 10.1016/j.arth.2013.08.011
  • 査読あり
• [雑誌論文] Addition of recommendations for the use of recombinant human thrombomodulin to the "Expert consensus for the treatment of disseminated intravascular coagulation in Japan" (2014)
  • 著者名/発表者名: Wada, H., D. I. C. s. Japanese Society of Thrombosis Hemostasis, K. Okamoto, T. Iba, S. Kushimoto, K. Kawasugi, S. Gando, S. Madoiwa, T. Uchiyama, T. Mayumi, and Y. Seki.
  • 雑誌名: Thromb Res 巻: 2014 ページ: 924-925
  • DOI: 10.1016/j.thromres.2014.07.033
  • 査読あり
• [雑誌論文] Living donor liver transplantation from an asymptomatic donor with mild coagulation factor IX deficiency: report of a case. (2014)
  • 著者名/発表者名: Sanada, Y., H. Sasanuma, Y. Sakuma, K. Morishima, N. Kasahara, Y. Kaneda, A. Miki, T. Fujiwara, A. Shimizu, M. Hyodo, Y. Hirata, N. Yamada, N. Okada, Y. Ihara, T. Urahashi, S. Madoiwa, J. Mimuro, K. Mizuta, and Y. Yasuda.
  • 雑誌名: Pediatr Transplant 巻: 18 ページ: E270-273
  • DOI: 10.1111/ petr.12358
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Paxillin is an intrinsic negative regulator of platelet activation in mice. (2014)
  • 著者名/発表者名: Sakata, A., T. Ohmori, S. Nishimura, H. Suzuki, S. Madoiwa, J. Mimuro, K. Kario, and Y. Sakata.
  • 雑誌名: Thromb J 巻: 12 ページ: 1
  • DOI: 10.1186/1477-9560-12-1
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] The prevalence of neutralizing antibodies against adeno-associated virus capsids is reduced in young Japanese individuals. (2014)
  • 著者名/発表者名: Mimuro, J., H. Mizukami, M. Shima, T. Matsushita, M. Taki, S. Muto, S. Higasa, M. Sakai, T. Ohmori, S. Madoiwa, K. Ozawa, and Y. Sakata.
  • 雑誌名: J Med Virol 巻: 86 ページ: 1990-1997
  • DOI: 10.1002/jmv.23818
  • 査読あり
• [雑誌論文] Combination of thrombin-antithrombin complex, plasminogen activator inhibitor-1, and protein C activity for early identification of severe coagulopathy in initial phase of sepsis: a prospective observational study. (2014)
  • 著者名/発表者名: Koyama, K., S. Madoiwa, S. Nunomiya, T. Koinuma, M. Wada, A. Sakata, T. Ohmori, J. Mimuro, and Y. Sakata.
  • 雑誌名: Crit Care 巻: 18 ページ: R13
  • DOI: 10.1186/cc13190
  • 査読あり
• [雑誌論文] Production of functional coagulation factor VIII from iPSCs using a lentiviral vector. (2014)
  • 著者名/発表者名: Kashiwakura, Y., T. Ohmori, J. Mimuro, S. Madoiwa, M. Inoue, M. Hasegawa, K. Ozawa, and Y. Sakata.
  • 雑誌名: Haemophilia 巻: 20 ページ: e40-44
  • DOI: 10.1111/hae.12311