シェーグレン症候群発症の分子免疫学的解析と制御

2012 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 24591439
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 研究機関: 筑波大学
• 研究代表者: 住田 孝之 筑波大学, 医学医療系, 教授 (00183054)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2015-03-31
• キーワード: 自己抗原 / 自己反応性T細胞 / 自己免疫性唾液腺炎 / ムスカリン作働性アセチルコリン受容体 / T細胞エピトープ / IFN-γ / IL-17 / RORγt

研究概要

シェーグレン症候群発症（SS）の分子機構を明らかし、病因に関わる免疫細胞や免疫分子をターゲットとした新規治療戦略を開発することを目的とした。 H24年度は、SSのモデルとして新規に開発した自己免疫性唾液腺炎（ムスカリン作働性アセチルコリン受容体3(M3R)誘導唾液腺炎、MIS）マウスおよびRORγtトランスジェニックマウスを用いて、以下の研究成果を得た。
1) M3R-/-xIFNγ-/-マウスにM3Rを免疫し、その脾細胞をRag1-/-マウスに移入した結果、有意な唾液腺炎の改善が見られた。この事は、IFN-γがMISの発症に係わっていることを示している。現在、M3R-/-xIL-17-/-→Rag-1-/-マウスを作成中。両マウスの結果を踏まえて、MIS発症に重要なサイトカインを特定する。
2) in vitroにおけるT細胞サイトカイン産生結果から、M3RのN1および第一細胞外ドメインがM3Rの主要なT細胞エピトープである事が判明した。2つのT細胞エピトープをそれぞれ単独でM3R-/-マウスに免疫し、脾細胞をRag-1-/-マウスに細胞移入することにより唾液腺炎を誘導することができた。この事実は、上記T細胞エピトープがMISを誘導する病因に直接係わっている事を示している。アナログペプチド解析を進める。
3) CD2プロモーターを用いてT細胞にRORγtを過剰発現したRORγtトランスジェニックマウスを作成した。本マウスにおいては唾液腺炎を自然発症し、Rag-2-/-マウスに細胞移入した実験から、CD4+T細胞により唾液腺炎を誘導していることが判明した。さらに、in vitroの解析から、foxp3+CD4+Treg細胞の機能異常が生じていることも確認された。今後、本モデルマウスを用いて唾液腺炎発症機構の解明を進める。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

MISマウスを用いて、自己免疫性唾液腺炎発症に係わるサイトカイン、T細胞エピトープを明らかにする事ができたため。RORγtトランスジェニックマウスを用いて、自然発症する唾液腺炎の発症機構の一部を明らかにすることができたため。

今後の研究の推進方策

1)MISマウスにおいて、IL-17-/-xM3R-/-→Rag-1-/-マウスを作成し、MISにおける病因サイトカインを決定する。
2)M3RのN1および細胞外第一ドメインのアナログペプチドを選定し、MISの抗原特異的制御戦略を確立する。3)RORγtトランスジェニックマウスにおいて、自然発症唾液腺炎の発症機構の全貌を解明する。

次年度の研究費の使用計画

該当なし

研究成果

• [雑誌論文] Overexpression of T-bet gene regulates murine autoimmune arthritis (2012)
  • 著者名/発表者名: Kondo Y, Iizuka M, Wakamatsu E, Yao Z, TaharTsuboi H, Sugihara M, Hayashi T, Yoh K, Takahashi S, Matsumoto I, Sumida T.
  • 雑誌名: Arthritis Rheum. 巻: 64(1) ページ: 162-172
  • 査読あり
• [雑誌論文] Analysis of IgG4 class switch-related molecules in IgG4-related disease. (2012)
  • 著者名/発表者名: Tsuboi H, Matsuo N, Iizuka M, Tsuzuki S, Kondo Y, Tanaka A, Moriyama M, Matsumoto I, Nakamura S, Sumida T.
  • 雑誌名: Arthritis Res.Ther. 巻: 14(4) ページ: R171
  • 査読あり
• [雑誌論文] Murine tumor necrosis factor α-induced adipose-related protein (tumor necrosis factor α-induced protein 9) deficiency leads to arthritis via interleukin-6 overproduction with enhanced NF-κB, STAT-3 signaling, and dysregulated apoptosis of macrophages. (2012)
  • 著者名/発表者名: Inoue A, Matsumoto I, Tanaka Y, Umeda N, Tanaka Y, Mihara M, Takahashi S, Sumida T.
  • 雑誌名: Arthritis Rheum. 巻: 64(12) ページ: 3877-3885
  • 査読あり
• [雑誌論文] Pathogenic role of anti-M3muscarinic acetylcholine receptor immune response in Sjögren’s syndrome. (2012)
  • 著者名/発表者名: Sumida T, Iizuka M, Asashima H, Tsuboi H, Matsumoto I.
  • 雑誌名: Presse Med. 巻: 41 ページ: e461-466
  • 査読あり
• [雑誌論文] Activation of invariant NKT cells with glycolipid ligand α-galactosylceramide ameliorates glucose-6-phosphate isomerase peptide-induced arthritis. (2012)
  • 著者名/発表者名: Horikoshi M, Goto D, Segawa S, Yoshiga Y, Iwanami K, Inoue A, Tanaka Y, Matsumoto I, Sumida T.
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 7(12) ページ: e51215
  • 査読あり
• [学会発表] A crucial role of orphan nuclear receptor gt (RORgt) overexpressed CD4+ T cells in sialadenitis like Sjögren’s syndrome. (2012)
  • 著者名/発表者名: Iizuka M, Tsuboi H, Asashima H, Koundo Y, Takahashi S, Matsumoto I, Sumida T.
  • 学会等名: 第41回日本免疫学会学術集会
  • 発表場所: 神戸国際会議場（神戸）
  • 年月日: 20121205-20121205
• [学会発表] Spontaneous sialadenitis like Sjögren’s syndrome in orphan nuclear receptor gt (RORgt) transgenic mice. (2012)
  • 著者名/発表者名: Iizuka M, Tsuboi H, Asashima H, Kondo Y, Takahashi S, Matsumoto I, Sumida T.
  • 学会等名: 2012 ANNUAL SCIENTIFIC MEETING on the College of Rheumatology
  • 発表場所: ワシントンD.C.
  • 年月日: 20121111-20121111
• [学会発表] 自己免疫疾患の発症機序と抗原特異的制御 (2012)
  • 著者名/発表者名: 住田 孝之、坪井 洋人、飯塚 麻菜、近藤 裕也、松本 功
  • 学会等名: 第40回日本臨床免疫学会総会
  • 発表場所: 京王プラザホテル（東京）
  • 年月日: 20120928-20120928
• [学会発表] シェーグレン症候群 VS IgG4関連疾患 (2012)
  • 著者名/発表者名: 住田 孝之
  • 学会等名: 日本内科学会生涯教育講演会（招待講演）
  • 発表場所: 東京国際 フォーラム（東京）
  • 年月日: 20120527-20120527
• [学会発表] Pathogenesis of spontaneous sialadenitis in orphan nuclear receptor RORgt transgenic mice (2012)
  • 著者名/発表者名: Iizuka M, Tsuboi H, Kondo Y, Takahiashi S, Matsumoto I, Sumida T.
  • 学会等名: 56回日本リウマチ学会総会・学術集会
  • 発表場所: グランドプリンスホテル新高輪（東京）
  • 年月日: 20120426-20120426
• [備考] 筑波大学膠原病内科
  • URL: http://www.md.tsukuba.ac.jp/clinical-med/rheumatology/