細胞遊走及びサイトカイン産生を標的とした関節リウマチの新規治療薬開発の基礎的検討

2014 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 24591442
• 研究機関: 順天堂大学
• 研究代表者: 岩田 哲史 順天堂大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (00396871)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2015-03-31
• キーワード: コラーゲン誘導関節炎 / 関節リウマチ / ドッキング蛋白質 / インテグリン / シグナル伝達 / Nedd9 / Cas-L / マクロライド

研究実績の概要

本研究では、Cas-Lの関節炎発症機構における病態生理学的役割について解析を行うとともに、新規マクロライド化合物5-Iの炎症性サイトカイン抑制作用とコラーゲン誘導関節炎抑制効果について検討した。
1) Cas-Lノックアウトマウス（KO）と野生型マウス（WT）にII型コラーゲンで関節炎（CIA）を誘導した場合、KOマウスでは発症の遅延と重症度の低下が観察された。2) KOマウスとWTマウスの血清中抗コラーゲン抗体価を測定した結果、KOマウスでは抗体価が有意に低値であり、コラーゲン再刺激後の細胞増殖反応は低下していた。3) KOマウスとWTマウス間での骨髄細胞移植実験では、KOマウス骨髄を致死量の放射線を照射したWTマウスへ移植した群［KO→WT］と、WTマウス骨髄を致死量の放射線を照射したKOマウスへ移植した群［WT→KO］にCIAを誘導したところ、［KO→WT］では、［WT→KO］に比較して重症度の低下を認めた。
KOマウスとWTマウスの脾臓由来CD4陽性T細胞に対し、抗CD3抗体と抗CD28抗体およびインテグリンリガンドで共刺激を行い、その細胞増殖反応を評価した。この結果、抗CD3抗体/抗CD28抗体での共刺激ではKOマウスの方で有意に細胞増殖反応が高値であった。逆に、抗CD3抗体/インテグリンリガンドでの共刺激系では、KOマウスの方で細胞増殖反応が高値であった。
4) KOマウスでは、血清中の炎症性サイトカインの低下・抑制性サイトカインの上昇が認められた。
5) 本研究では、抗菌作用のない新規マクロライド化合物5-Iを導出し、その炎症性サイトカイン抑制とマウスコラーゲン誘導関節炎抑制効果を見出した。さらに、ヒトリンパ球を用いたマイクロアレイ解析の結果、5-I及びロキシスロマイシンは、Thl7細胞への分化に重要な核内転写因子ROR-gammatの発現を抑制することを明らかにした。

研究成果

• [雑誌論文] Comparison of Two Commercial ELISAs against an In-House ELISA for Measuring Soluble CD26 in Human Serum. (2015)
  • 著者名/発表者名: Ohnuma K, Saito T, Hatano R, Hosono O, Iwata S, Dang NH, Ninomiya H, Morimoto C.
  • 雑誌名: J Clin Lab Anal 巻: 29(2) ページ: 106-11
  • DOI: 10.1002/jcla.21736
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] CD26-mediated induction of EGR2 and IL-10 as potential regulatory mechanism for CD26 costimulatory pathway. (2015)
  • 著者名/発表者名: Hatano R, Ohnuma K, Otsuka H, Komiya E, Taki I, Iwata S, Dang NH, Okumura K, Morimoto C.
  • 雑誌名: J Immunol 巻: 194(3) ページ: 960-72
  • DOI: doi: 10.4049/jimmunol.1402143
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Regulation of Pulmonary Graft-versus-Host Disease by IL-26+CD26+CD4 T Lymphocytes. (2015)
  • 著者名/発表者名: Ohnuma K, Hatano R, Aune TM, Otsuka H, Iwata S, Dang NH, Yamada T, Morimoto C.
  • 雑誌名: J Immunol 巻: 194(8) ページ: 3697-712
  • DOI: doi: 10.4049/jimmunol.1402785
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Modulation of immunological responses and amelioration of collagen-induced arthritis by the novel roxithromycin derivative 5-I. (2015)
  • 著者名/発表者名: Otsuki N, Iwata S, Yamada T, Hosono O, Dang NH, Hatano R, Ohnuma K, Morimoto C.
  • 雑誌名: Mod Rheumatol 巻: [Epub ahead of print] ページ: 1-9
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] The role of Cas-L/NEDD9 as a regulator of collagen-induced arthritis in a murine model. (2015)
  • 著者名/発表者名: Katayose T, Iwata S, Oyaizu N, Hosono O, Yamada T, Dang NH, Hatano R, Tanaka H, Ohnuma K, Morimoto C.
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun 巻: 460(4) ページ: 1069-75
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2015.03.156
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Regulation of somatostatin receptor 4-mediated cytostatic effects by CD26 in malignant pleural mesothelioma. (2014)
  • 著者名/発表者名: Yamamoto J, Ohnuma K, Hatano R, Okamoto T, Komiya E, Yamazaki H, Iwata S, Dang NH, Aoe K, Kishimoto T, Yamada T, Morimoto C.
  • 雑誌名: Br J Cancer 巻: 110(9) ページ: 2232-45
  • DOI: 10.1038/bjc.2014.151
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] CD26-mediated regulation of periostin expression contributes to migration and invasion of malignant pleural mesothelioma cells. (2014)
  • 著者名/発表者名: Komiya E, Ohnuma K, Yamazaki H, Hatano R, Iwata S, Okamoto T, Dang NH, Yamada T, Morimoto C.
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun 巻: 447(4) ページ: 609-15
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2014.04.037
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [学会発表] T細胞共刺激分子CD26に基づく全身性エリテマトーデスの病態および疾患活動性の新規バイオマーカーの探索 (2015)
  • 著者名/発表者名: 波多野 良，大沼 圭，石井 智徳，岩田 哲史，奥村 康，関川 巖，森本 幾夫
  • 学会等名: 第59回 日本リウマチ学会 総会・学術集会
  • 発表場所: 名古屋国際会議場（名古屋）
  • 年月日: 2015-04-25