宿主自然免疫応答に作用するプリオンの感染メカニズムの解明

2014 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 24591482
• 研究機関: 長崎大学
• 研究代表者: 石橋 大輔 長崎大学, 医歯薬学総合研究科(医学系), 助教 (10432973)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2015-03-31
• キーワード: プリオン / 自然免疫

研究実績の概要

平成26年度では、本研究課題にて継続して検討したプリオン感染によるIRF3の抑制機構について詳細に検討を行い、以下の結果を得た。1)レポーターアッセイによりマウスIRF3遺伝子の転写開始地点から上流-119bpに位置するプロモーター領域に結合すると推定された転写因子E2F1やAML1では無く、Oct-1が特異的に転写活性を示すこと2)プリオン持続感染細胞におけるIRF3遺伝子発現の減少と共にそのプロモーター活性が低下していたこと3)異常型プリオン蛋白を減少させる薬剤pentosan polysulfateやCongo-red処置により減少していたプロモーター活性が回復したこと4)クロマチン免疫沈降アッセイによりOct-1が特異的にプロモーター領域と結合していること5)プリオン感染マウスの脳においてOct-1の発現が有意に減少していたことである。つまり、我々は、プリオン感染によるIRF3の低下の要因の一つにOct-1の減少に伴う結果であることを明らかにした。次に、自然免疫関連因子とプリオン感染との関係性について検討を行った。in vitroの系におけるプリオン感染モデルでの自然免疫関連候補因子の挙動について検討するために、非感染培養細胞にプリオンを感染させ、候補因子の発現を経時的にリアルタイムPCR、ウエスタンブロット法にて確認し、因子の選定について検討を行った。さらにin vivoの系におけるプリオン感染モデルマウスを用いても同様の検討を行った。結果、IRF3を介したシグナルカスケードの下流に位置する複数のinterferon stimulated genesの重要性を確認した。本実験によって得られた新たな知見は、これまでのプリオン研究において全く新しい知見と考えられる。

研究成果

• [雑誌論文] Conformational properties of prion strains can be transmitted to recombinant prion protein fibrils in real-time quaking-induced conversion. (2014)
  • 著者名/発表者名: Sano K, Atarashi R, Ishibashi D, Nakagaki T, Satoh K, Nishida N.
  • 雑誌名: Journal of Virology 巻: 88(20) ページ: 11791-11801
  • DOI: doi: 10.1128/JVI.00585-14.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Persistent prion infection disturbs the function of Oct-1, resulting in the down-regulation of murine interferon regulatory factor-3. (2014)
  • 著者名/発表者名: Homma T, Ishibashi D, Nakagaki T, Fuse T, Sano K, Satoh K, Atarashi R, Nishida N.
  • 雑誌名: Scientific reports 巻: 4 ページ: 6006
  • DOI: doi:10.1038/srep06006
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [学会発表] Persistent prion infection disturbs the function of Oct-1, resulting in the down-regulation of murine interferon regulatory factor-3 (2014)
  • 著者名/発表者名: Daisuke Ishibashi, Takujiro Homma, Takehiro Nakagaki, Noriyuki Nishida.
  • 学会等名: 第43回日本免疫学会学術集会 The 43rd Annual Meeting of The Japanese Society for Immunology
  • 発表場所: 国立京都国際会館、京都
  • 年月日: 2014-12-10 – 2014-12-12
• [学会発表] Metabolism of PrPSc differs depending on prion strains (2014)
  • 著者名/発表者名: Daisuke Ishibashi, Takujiro Homma, Takehiro Nakagaki, Ryuichiro Atarashi, Noriyuki Nishida
  • 学会等名: 第62回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: パシフィコ横浜、神奈川
  • 年月日: 2014-11-10 – 2014-11-12
• [学会発表] プリオン感染における宿主自然免疫応答の役割 Role of the host innate immune responses against prion pathogenesis (2014)
  • 著者名/発表者名: 石橋 大輔
  • 学会等名: 第87回日本生化学会大会
  • 発表場所: 国立京都国際会館、京都
  • 年月日: 2014-10-15 – 2014-10-18
  • 招待講演
• [学会発表] 病原体プリオンによる転写因子IRF3の発現抑制機構 (2014)
  • 著者名/発表者名: 石橋大輔、本間拓二郎、西田教行
  • 学会等名: 第 67 回日本細菌学会 九州支部総会 第 51 回日本ウイルス学会 九州支部総会
  • 発表場所: 城山観光ホテル、鹿児島
  • 年月日: 2014-09-05 – 2014-09-06
• [学会発表] 正常型プリオン蛋白のプロテアソーム分解機構を再考する (2014)
  • 著者名/発表者名: 本間 拓二郎、石橋 大輔、新 竜一郎、西田 教行
  • 学会等名: 第33回分子病理学研究会宮城蔵王シンポジウム
  • 発表場所: 宮城蔵王ロイヤルホテル、宮城
  • 年月日: 2014-07-25 – 2014-07-26
• [学会発表] Metabolism of PrPSc differs depending on prion strains (2014)
  • 著者名/発表者名: Daisuke Ishibashi, Takujiro Homma, Takehiro Nakagaki, Kazunori Sano, Naohiro Yamaguchi, Tsuyoshi Mori, Katsuya Satoh, Ryuichiro Atarashi, Noriyuki Nishida
  • 学会等名: Prion2014
  • 発表場所: Trieste, Italy
  • 年月日: 2014-05-27 – 2014-05-30