ＨＤＡＣ阻害剤の併用療法のターゲットとしてのＨＳＰ７０の可能性の探究

2013 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 24591626
• 研究機関: 岡山大学
• 研究代表者: 藤井 一恭 岡山大学, 大学病院, 助教 (70452571)
• 研究分担者: 近藤 格 独立行政法人国立がん研究センター, 創薬プロテオーム研究分野, 分野長 (30284061)
• キーワード: HDAC阻害剤 / HSPA1A / 感受性

研究概要

前年度に作成したHSPA1Aを恒常的に発現するJurkat細胞の亜株を用いた検討では、HSPA1A高発現亜株ではコントロール細胞と比べてHDAC阻害剤による増殖抑制やアポトーシス誘導が阻害されていた。HSPA1A高発現株では無刺激の状態でも抗アポトーシス分子のXIAP、bcl-2、p-badの発現が亢進しており、さらにHDAC阻害剤負荷後のアポトーシス誘導分子の誘導も抑制されており、HSPA1Aの高発現が（特に内因性の）カスパーゼ依存性アポトーシスを阻害することによりHDAC阻害剤阻害剤の感受性を阻害することが示唆された。
続いてHSPA1Aが、HDAC阻害剤の併用療法のターゲットとなり得るか、解析を行った。HSPA1A高発現株であるHut78細胞にHSP阻害剤であるKNK437をボリノスタットもしくはバルプロ酸と併用したところ、いずれの薬剤においてもアポトーシス誘導は亢進した。さらにKNK437併用によるHDAC阻害剤の増殖抑制効果は、combination indexが1未満で、相乗効果があることがわかった。
そこで、HSPA1Aに対して設計されたi-Lenti siRNA発現ベクターをHut78にトランスフェクションし，このベクターが耐性遺伝子として持つpuromycinでセレクションを行うことでHSPA1Aが恒常的にノックダウンされた亜株を樹立しHDAC阻害剤に対する感受性を調べたところ、empty vectorを組み込んだ亜株と比べて無刺激では細胞増殖に明らかな変化は認めなかったが、HDAC阻害剤による増殖抑制効果は亢進しており、アポトーシスの亢進も認めた。
すなわちHSPA1AはHDAC阻害剤に対する抵抗性のマーカーとなるだけではなく、治療のターゲットとしても有望な分子であることが明らかになった。

現在までの達成度 (区分)

1: 当初の計画以上に進展している

理由

今年度はHSPA1AがHDAC阻害剤の併用療法のターゲットとなり得ることをin vitroの実験系で確認することができた。

今後の研究の推進方策

HDAC阻害剤の効果は多岐にわたる。またHSP70も細胞内においてさまざまな働きをしている。このため、HDAC阻害剤の併用療法のターゲットとしてHSPA1Aを用いた場合、どのようなメカニズムが働いているのか網羅的に検討する。

研究成果

• [雑誌論文] α-Parvin, a pseudopodial constituent, promotes cell motility and is associated with lymph node metastasis of lobular breast carcinoma. (2014)
  • 著者名/発表者名: Ito M, Hagiyama M, Mimae T, Inoue T, Kato T, Yoneshige A, Nakanishi J, Kondo T, Okada M, Ito A.
  • 雑誌名: Breast Cancer Res Treat. 巻: 144 ページ: 59-69
  • DOI: 10.1007/s10549-014-2859-0.
  • 査読あり
• [雑誌論文] A higher correlation of the antibody activities against the calcium-dependent epitopes of desmoglein 3 quantified by ethylenediaminetetraacetic acid-treated enzyme-linked immunosorbent assay with clinical disease activities of pemphigus vulgaris. (2013)
  • 著者名/発表者名: Kamiya K, Aoyama Y, Shirafuji Y, Hamada T, Morizane S, Fujii K, Iwatsuki K.
  • 雑誌名: J Dermatol Sci. 巻: 70 ページ: 190-195
  • DOI: 10.1016/j.jdermsci.2013.02.011.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Casting doubt on the traditional approach of cancer biomarker discovery through proteomics. (2013)
  • 著者名/発表者名: Kondo T.
  • 雑誌名: Expert Rev Proteomics. 巻: 11 ページ: 9-12
  • DOI: 10.1586/14789450.2014.871496.
• [雑誌論文] Proteomics identified nuclear N-myc downstream-regulated gene 1 as a prognostic tissue biomarker candidate in renal cell carcinoma. (2013)
  • 著者名/発表者名: Hosoya N, Sakumoto M, Nakamura Y, Narisawa T, Bilim V, Motoyama T, Tomita Y, Kondo T.
  • 雑誌名: Biochim Biophys Acta. 巻: 1834 ページ: 2630-2639
  • DOI: 10.1016/j.bbapap.2013.08.009.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Gene expression network analysis of ETV1 reveals KCTD10 as a novel prognostic biomarker in gastrointestinal stromal tumor. (2013)
  • 著者名/発表者名: Kubota D, Yoshida A, Tsuda H, Suehara Y, Okubo T, Saito T, Orita H, Sato K, Taguchi T, Yao T, Kaneko K, Katai H, Kawai A, Kondo T.
  • 雑誌名: PLoS One. 巻: 8 ページ: e73896
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0073896.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Proteomics study of open biopsy samples identifies peroxiredoxin 2 as a predictive biomarker of response to induction chemotherapy in osteosarcoma. (2013)
  • 著者名/発表者名: Kubota D, Mukaihara K, Yoshida A, Tsuda H, Kawai A, Kondo T.
  • 雑誌名: J Proteomics. 巻: 91 ページ: 393-404
  • DOI: 10.1016/j.jprot.2013.07.022.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Laser microdissection and two-dimensional difference gel electrophoresis reveal the role of a novel macrophage-capping protein in lymph node metastasis in gastric cancer. (2013)
  • 著者名/発表者名: Ichikawa H, Kanda T, Kosugi S, Kawachi Y, Sasaki H, Wakai T, Kondo T.
  • 雑誌名: J Proteome Res. 巻: 12 ページ: 3780-3791
  • DOI: 10.1021/pr400439m.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Proteomic approach toward molecular backgrounds of drug resistance of osteosarcoma cells in spheroid culture system. (2013)
  • 著者名/発表者名: Arai K, Sakamoto R, Kubota D, Kondo T.
  • 雑誌名: Proteomics. 巻: 13 ページ: 2351-2360
  • DOI: 10.1002/pmic.201300053.
  • 査読あり
• [雑誌論文] The prognostic value of pfetin: a validation study in gastrointestinal stromal tumors using a commercially available antibody. (2013)
  • 著者名/発表者名: Kubota D, Mukaihara K, Yoshida A, Suehara Y, Saito T, Okubo T, Gotoh M, Orita H, Tsuda H, Kaneko K, Kawai A, Kondo T, Sato K, Yao T.
  • 雑誌名: Jpn J Clin Oncol. 巻: 43 ページ: 669-675
  • DOI: 10.1093/jjco/hyt057.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Interactomic approach for evaluating nucleophosmin-binding proteins as biomarkers for Ewing's sarcoma. (2013)
  • 著者名/発表者名: Haga A, Ogawara Y, Kubota D, Kitabayashi I, Murakami Y, Kondo T.
  • 雑誌名: Electrophoresis. 巻: 34 ページ: 1670-1678
  • DOI: 10.1002/elps.201200661.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Quantitative proteomic analysis identified paraoxonase 1 as a novel serum biomarker for microvascular invasion in hepatocellular carcinoma. (2013)
  • 著者名/発表者名: Huang C, Wang Y, Liu S, Ding G, Liu W, Zhou J, Kuang M, Ji Y, Kondo T, Fan J.
  • 雑誌名: J Proteome Res. 巻: 12 ページ: 1838-1846
  • DOI: 10.1021/pr3011815.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Use of potassium channel tetramerization domain-containing 12 as a biomarker for diagnosis and prognosis of gastrointestinal stromal tumor. (2013)
  • 著者名/発表者名: Hasegawa T, Asanuma H, Ogino J, Hirohashi Y, Shinomura Y, Iwaki H, Kikuchi H, Kondo T.
  • 雑誌名: Hum Pathol. 巻: 44 ページ: 1271-1277
  • DOI: 10.1016/j.humpath.2012.10.013.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Erdheim-Chester病が強く疑われた下垂体機能低下症の一例 (2013)
  • 著者名/発表者名: 三好智子, 大塚文男, 稲垣兼一, 田中康司, 越智可奈子, 藤井一恭, 藤井伸治, 当真貴志雄, 中村絵里, 塚本尚子, 武田昌也, 三村由香里, 小倉俊郎, 景山甚郷, 槇野博史
  • 雑誌名: 日本内分泌学会雑誌 巻: 89 ページ: 21-23
• [雑誌論文] 【皮膚リンパ腫-いかに診断・治療するか】 皮膚リンパ腫に対する分子標的薬 HDAC阻害剤の作用機序と使い方 (2013)
  • 著者名/発表者名: 藤井一恭
  • 雑誌名: 医学のあゆみ 巻: 245 ページ: 589-592
• [雑誌論文] Close Up実験法(Series 244) 蛍光二次元電気泳動法のポイント (2013)
  • 著者名/発表者名: 近藤格
  • 雑誌名: 実験医学 巻: 31 ページ: 2985-2990
• [雑誌論文] 【臨床検査における電気泳動解析法の活用】 プロテオーム解析における電気泳動法の活用 (2013)
  • 著者名/発表者名: 近藤格
  • 雑誌名: 医療と検査機器・試薬 巻: 36 ページ: 297-300
• [学会発表] がん細胞の薬剤抵抗性分子機序：HDAC阻害剤を例として (2013)
  • 著者名/発表者名: 藤井一恭
  • 学会等名: 第65回日本皮膚科学会西部支部学術大会
  • 発表場所: かごしま県民交流センター
  • 年月日: 20131109-20131110
• [学会発表] Multicentric Castleman’s disease（MCD）の一例
  • 著者名/発表者名: 吉岡愛育、藤井一恭、濱田利久、岩月啓氏、野田和代、宮原信明
  • 学会等名: 第259回日本皮膚科学会岡山地方会
  • 発表場所: 岡山コンベンションセンター
• [学会発表] Mタンパク血症を背景とし、深部静脈血栓症と皮膚随伴症状を伴った２例
  • 著者名/発表者名: 梅村啓史、浅越健治、光井聖子、瀧口徹也、藤井一恭、岩月啓氏
  • 学会等名: 第260回日本皮膚科学会岡山地方会
  • 発表場所: 岡山コンベンションセンター
• [学会発表] 帯状疱疹発症後に一時軽快したHIV関連乾癬
  • 著者名/発表者名: 藤井一恭、竹原彩、青山裕美、岩月啓氏
  • 学会等名: 岡山県医師会皮膚科部会・岡山市医師会皮膚科・泌尿器科専門医部会学術講演会
  • 発表場所: 岡山衛生会館
• [学会発表] Sezary細胞におけるVersicanの発現とその生物学的意義
  • 著者名/発表者名: 藤井一恭
  • 学会等名: 第32回岡山研究皮膚科フォーラム
  • 発表場所: 岡山コンベンションセンター
• [学会発表] TNF阻害剤による薬剤性障害の2例
  • 著者名/発表者名: 深松紘子、濱田利久、藤井一恭、青山裕美、岩月啓氏、西田圭一郎、若林宏、川畑智子、高橋義雄
  • 学会等名: 日本皮膚科学会第368回福岡地方会
  • 発表場所: ホテルニューオータニ博多
• [図書] 今日の処方 改訂第5版 (2013)
  • 著者名/発表者名: 浦部晶夫、大田健、川合眞一、島田和幸、菅野健太郎 編集、藤井一恭他
  • 総ページ数: 1198
  • 出版者: 南江堂
• [図書] 抗がん薬の臨床薬理 (2013)
  • 著者名/発表者名: 相羽惠介 編、藤井一恭、岩月啓氏他
  • 総ページ数: 731
  • 出版者: 南山堂