線維化におけるＴＧＦ－β情報伝達の関与についての分子基盤の解明

2012 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 24591658
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 研究機関: 熊本大学
• 研究代表者: 尹 浩信 熊本大学, その他の研究科, 教授 (20282634)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2015-03-31
• キーワード: 遺伝子 / 細胞・組織 / シグナル伝達

研究概要

全身性強皮症、肺線維症の組織および病変部の培養線維芽細胞においてDNA microarry法にて過剰発現する分子、発現低下する分子を検討し、またrealtime PCRを用いたmicro RNA arrayによって過剰発現するmicro RNA、発現低下するmicro RNAを同定した。
正常皮膚線維芽細胞を用いてintegrin αVβ5 stable transfectant作成し、integrin αVβ5の過剰発現を確認した。
COL1A2 enhancer、promoterをベクターに組み込んで作成したtransgeneを用いて線維芽細胞特異的integrin αVβ5 transgenic mouseを作成すし、現在phenotypeを解析している。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

線維化病変に過剰発現ないし発現低下する分子を同定することができた。さらに過剰発現するmicro RNA、発現低下するmicro RNAをも同定することができた。integrin αVβ5 stable transfectantも作成でき、線維芽細胞特異的integrin αVβ5 transgenic mouseも完成した。
以上より研究は順調で十分達成できたと考える。

今後の研究の推進方策

integrin αVβ5 stable transfectantを用いてDNA microarry法、realtime PCRを用いたmicro RNA array法、情報伝達protein arrayを行い、線維化phenotypeを形成しているか、すなわちTGF-β受容体が過剰発現しているか、TGF-β情報伝達経路（Smad2、Smad 3、Smad4、p300/CBP、p38 MAPK、PI3 kinase）が過剰リン酸化しているか、I型コラーゲンをはじめとする細胞外マトリックス蛋白および遺伝子が過剰発現しているか、MMP-1などのproteaseの発現が低下しているか、TIMP-1などのprotease inhibitorの発現が亢進しているか詳細に検討する。
線維芽細胞特異的integrin αV transgenic mouseのphenotypeを解析する。

次年度の研究費の使用計画

integrin αVβ5 stable transfectantの解析および線維芽細胞特異的integrin αV transgenic mouseのphenotypeの解析に用いる研究試薬に全額使用する。

研究成果

• [雑誌論文] miR-150 down-regulation contributes to the constitutive type I collagen overexpression in scleroderma dermal fibroblasts via the induction of integrin β3. (2013)
  • 著者名/発表者名: Honda N, Jinnin M, Kira-Etoh T, Makino K, Kajihara I, Makino T, Fukushima S, Inoue Y, Okamoto Y, Hasegawa M, Fujimoto M, Ihn H.
  • 雑誌名: Am J Pathol, 巻: 182 ページ: 206-216
  • 査読あり
• [雑誌論文] The rs2910164 G>C polymorphism in microRNA-146a is associated with the incidence of malignant melanoma. (2013)
  • 著者名/発表者名: Yamashita J, Iwakiri T, Fukushima S, Jinnin M, Miyashita A, Hamasaki T, Makino T, Aoi J, Masuguchi S, Inoue Y, Ihn H.
  • 雑誌名: Melanoma Res, 巻: 23 ページ: 13-20
  • 査読あり
• [雑誌論文] The miR-146a rs2910164G/C polymorphism is associated with telangiectasia in systemic sclerosis. (2013)
  • 著者名/発表者名: Sakoguchi A, Jinnin M, Makino T, Kajihara I, Makino K, Honda N, Nakayama W, Inoue K, Fukushima S, Ihn H.
  • 雑誌名: Clin Exp Dermatol, 巻: 38 ページ: 99-100
  • 査読あり
• [雑誌論文] microRNA-7 down-regulation mediates excess collagen expression in localized scleroderma. (2013)
  • 著者名/発表者名: Etoh M, Jinnin M, Makino K, Yamane K, Nakayama W, Aoi J, Honda N, Kajihara I, Makino T, Fukushima S, Ihn H.
  • 雑誌名: Arch Dermatol Res, 巻: 305 ページ: 9-15
  • 査読あり
• [雑誌論文] Down-regulation of miR-124/ -214 in cutaneous squamous cell carcinoma mediates abnormal cell proliferation via the induction of ERK. (2013)
  • 著者名/発表者名: Yamane K, Jinnin M, Etoh T, Kobayashi Y, Shimozono N, Fukushima S, Masuguchi S, Maruo K, Inoue Y, Ishihara T, Aoi J, Oike Y, Ihn H.
  • 雑誌名: J Mol Med, 巻: 91 ページ: 69-81
  • 査読あり
• [雑誌論文] Intravenous immunoglobulin treatment recovers the down-regulatied levels of Th1 cytokines in the sera and skin of scleroderma patients. (2013)
  • 著者名/発表者名: Kudo H, Jinnin M, Yamane K, Makino T, Kajihara I, Makino K, Honda N, Nakayama W, Fukushima S, Ihn H.
  • 雑誌名: J Dermatol Sci, 巻: 69 ページ: 77-80
  • 査読あり
• [雑誌論文] Serum epidermal growth factor receptor levels in patients with malignant melanoma. (2013)
  • 著者名/発表者名: Kanemura H, Fukushima S, Yamashita J, Jinnin M, Sakai K, Masuguchi M, Aoi J, Makino T, Inoue Y, Ihn H.
  • 雑誌名: Clin Exp Dermatol, 巻: 38 ページ: 172-177
  • 査読あり
• [雑誌論文] Serum miR-21 levels in patients with dermatomyositis. (2013)
  • 著者名/発表者名: Shimada S, Jinnin M, Ogata A, Makino T, Kajihara I, Makino K, Honda N, Nakayama W, Inoue K, Fukushima S, Ihn H.
  • 雑誌名: Clin Exp Rheumatol, 巻: 31 ページ: 161-162
  • 査読あり
• [雑誌論文] Serum levels of interleukin-1α in patients with systemic sclerosis. (2013)
  • 著者名/発表者名: Maekawa T, Jinnin M, Ohtsuki M, Ihn H.
  • 雑誌名: J Dermatol, 巻: 40 ページ: 98-101
  • 査読あり
• [雑誌論文] Suppresion of UV-induced wrinkle formation by induction of HSP70 expression in mice. (2013)
  • 著者名/発表者名: Matsuda M, Hoshino T, Yamakawa N, Tahara K, Adachi H, Sobue G, Maji D, Ihn H, Mizushima T.
  • 雑誌名: J Invest Dermatol, 巻: 133 ページ: 919-928
  • 査読あり
• [雑誌論文] Pyodermatitis vegetans associated with multiple myeloma. (2013)
  • 著者名/発表者名: Kajihara I, Ichihara A, Higo J, Kidou M, Ihn H.
  • 雑誌名: J Dermatol, 巻: 40 ページ: 222-223
  • 査読あり
• [雑誌論文] Diccoidin domain receptor 2 -micro RNA 196a -mediated negative feedback against excess type I collagen expression is impaired in scleroderma dermal fibroblasts. (2013)
  • 著者名/発表者名: Makino K, Jinnin M, Aoi J, Hirano A, Kajihara I, Makino T, Sakai K, Fukushima S, Inoue Y, Ihn H.
  • 雑誌名: J Invest Dermatol, 巻: 133 ページ: 110-119
  • 査読あり
• [雑誌論文] Decreased miR-7 expression in the skin and sera of patients with dermatomyositis. (2013)
  • 著者名/発表者名: Oshikawa Y, JInnin M, Makino T, Kajihara I, Makino K,Honda N, Nakayama W, Inoue K, Fukushima S, Ihn H.
  • 雑誌名: Acta Derm Venereol 巻: 4 ページ: 144‐149
  • 査読あり
• [雑誌論文] Hidradenocarcinoma showing prominent mucinous and squamous differentiation and associated with pgetoid cells. (2013)
  • 著者名/発表者名: Honda Y, Tanigawa H, Harada M, Fukushima S, Masuguchi S, Ishihara T, Ihn H, Iyama KI.
  • 雑誌名: J Cutan Pathol, 巻: 印刷中 ページ: 印刷中
  • 査読あり
• [雑誌論文] Dots/ globules on dermoscopy in nail-apparatus melanoma. (2013)
  • 著者名/発表者名: Inoue Y, Menzies SW, Fukushima S, Nishi-Kogushi H, Miyashita A, Masuguchi S, Muchemwa F, Kageshita T, Ihn H.
  • 雑誌名: Int J Dermatol, 巻: 印刷中 ページ: 印刷中
  • 査読あり
• [雑誌論文] Scleroderma dermal fibroblasts overexpress vascular endothelial growth factor due to autocrine transforming growth factor  signaling. (2013)
  • 著者名/発表者名: Kajihara I, Jinnin M, Honda N, Makino K, Makino T, Masuguchi S, Sakai K, Fukushima S, Inoue Y, Ihn H.
  • 雑誌名: Mod Rheumatol, 巻: 印刷中 ページ: 印刷中
  • 査読あり
• [雑誌論文] Serum chemokine levels as prognostic markers in patients with early systemic sclerosis: a multicentre, prospective, observational study. (2013)
  • 著者名/発表者名: Hasegawa M, Asano M, Endo H, Fujimoto M, Goto D, Ihn H, Inoue K, Ishikawa O, Kawaguchi Y, Kuwana M, Ogawa F, Takahashi H, Tanaka S, Sato S, Takehara K.
  • 雑誌名: Mod Rheumatol, 巻: 印刷中 ページ: 印刷中
  • 査読あり
• [雑誌論文] Case of paraneoplastic pemphigus with follicular lymphoma treated with rituximab. (2013)
  • 著者名/発表者名: Aoi J, Makino K, Sakai k, Masuguchi S, Fukushima S, Jinnin M, Inoue Y, Koga H, Hashimoto T, Ihn H.
  • 雑誌名: J Dermatol, 巻: 40 ページ: 285-286
  • 査読あり
• [雑誌論文] The down-regulation of microRNA let-7a contributes to excessive expression of type I collagen in systemic and localized scleroderma. (2013)
  • 著者名/発表者名: Makino K, Jinnin M, Hirano A, Yamane K, Eto M, Kusano T, Honda N, Kajihara K, Makino T, Sakai K, Masuguchi S, Fukushima S, Ihn H.
  • 雑誌名: J Immunol, 巻: 190 ページ: 3905-3915
  • 査読あり
• [雑誌論文] Clinical significance of cobble stone appearance on the skin of patients with systemic sclerosis. (2012)
  • 著者名/発表者名: Kajihara I, Jinnin M, Makino T, Toihata-Yonemitsu A, Sakai K, Masuguchi S, Fukushima S, Ihn H.
  • 雑誌名: J Eur Acad Dermatol Venereol, 巻: 26 ページ: 123－125
  • 査読あり
• [雑誌論文] Investigation of prognostic factors for skin sclerosis and lung function in Japanese patients with systemic sclerosis: a multicenter prospective observational study. (2012)
  • 著者名/発表者名: Hasegawa M, Asano Y, Endo H, Fujimoto M, Goto D, Ihn H, Inoue K, Ishikawa O, Kawaguchi Y, Kuwana M, Muro Y, Ogawa F, Sasaki T, Takahashi H, Tanaka S, Takehara K, Sato S.
  • 雑誌名: Rheumatology, 巻: 51 ページ: 129－133
  • 査読あり
• [雑誌論文] Prediction of additional lymph node positivity and clinical outcome of micrometastases in sentinel lymph nodes in cutaneous melanoma: A multi-institutional study of 450 patients in Japan. (2012)
  • 著者名/発表者名: Namikawa K, Yamazaki N, Nakai Y, Ihn H, Tomita Y, Uhara H, Takenouchi T, Kiyohara Y, Moroi Y, Yamamoto Y, Otsuka F, Kamiya H, Iizuka H, Hatta N, Kadono T.
  • 雑誌名: J Dermatol, 巻: 39 ページ: 130－137
  • 査読あり
• [雑誌論文] Serum levels of soluble CD21 in patients with sclerosis. (2012)
  • 著者名/発表者名: Tomita M, Kadono T, Yazawa N, Kawashima T, Tamaki Z, Ashida R, Ohmatsu H, Asano Y, Sugaya M, Kubo M, Ihn H, Tamaki K, Sato S.
  • 雑誌名: Rheumatol Int, 巻: 32 ページ: 317－321
  • 査読あり
• [雑誌論文] Serum levels of soluble CD163 in patients with systemic sclerosis. (2012)
  • 著者名/発表者名: Nakayama W, Jinnin M, Makino K, Kajihara I, Makino T, Fukushima S, Inoue Y, Ihn H.
  • 雑誌名: Rheumatol Int, 巻: 32 ページ: 403－407
  • 査読あり
• [雑誌論文] Increased accumulation of thrombospondin-2 due to low degradation activity stimulates type I collagen expression in scleroderma fibroblasts. (2012)
  • 著者名/発表者名: Kajihara I, Jinnin M, Yamane K, Makino T, Honda N, Igata T, Masuguchi S, Fukushima S, Okamoto Y, Hasegawa M, Fujimoto M, Ihn H.
  • 雑誌名: Am J Pathol, 巻: 180 ページ: 703－714
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cutaneous type adult T-cell leukemia/lymphoma successfully treated with narrow-band ultraviolet B phototherapy. (2012)
  • 著者名/発表者名: Kudo K, Fukushima S, Masuguchi S, Sakai K, Jinnin M, Ihn H.
  • 雑誌名: Clin Exp Dermatol, 巻: 37 ページ: 183－184
  • 査読あり
• [雑誌論文] The role of angiopoietin-like protein 2 in pathogenesis of dermatomyositis. (2012)
  • 著者名/発表者名: Ogata A, Endo M, Aoi J, Takahashi O, Kadomatsu T, Miyata K, Tian Z, Jinnin M, Fukushima S, Ihn H, Oike Y.
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun, 巻: 418 ページ: 494－499
  • 査読あり
• [雑誌論文] Circulating miR-142-3p levels in patients with systemic sclerosis. (2012)
  • 著者名/発表者名: Makino K, Jinnin M, Kajihara I, Honda N, Sakai K, Masuguchi S, Fukushima S, Inoue Y, Ihn H.
  • 雑誌名: Clin Exp Dermatol, 巻: 37 ページ: 34－39
  • 査読あり
• [雑誌論文] TGF-β-mediated down-regulation of microRNA-196a contributes to the constitutive up-regulated type I collagen expression in scleroderma dermal fibroblasts. (2012)
  • 著者名/発表者名: Honda N, Jinnin M, Kajiwara I, Makino T, Makino K, Masuguchi S, Fukushima S, Okamoto Y, Hasegawa M, Fujimoto M, Ihn H.
  • 雑誌名: J Immunol, 巻: 188 ページ: 3323－3331
  • 査読あり
• [雑誌論文] Increased serum levels of miR-1266 in patients with psoriasis vulgaris. (2012)
  • 著者名/発表者名: Ichihara A, Jinnin M, Oyama R, Yamane K, Fujisawa A, Sakai K, Masuguchi S, Fukushima S, Maruo K, Ihn H.
  • 雑誌名: Eur J Dermatol, 巻: 22 ページ: 68－71
  • 査読あり
• [雑誌論文] Impaired IL-17 signaling pathway contributes to the increased collagen expression in scleroderma fibroblasts. (2012)
  • 著者名/発表者名: Nakajima T, Jinnin M, Honda N, Kajihara I, Makino T, Masuguchi S, Fukushima S, Okamoto Y, Hasegawa M, Fujimoto M, Ihn H.
  • 雑誌名: J Immunol, 巻: 188 ページ: 3573-3583
  • 査読あり
• [雑誌論文] Photosensitivity and acute liver insufficiency in late-onset erythropoietic protoporphyria with a chromosome 18q abnormality. (2012)
  • 著者名/発表者名: Oshikawa Y, Fukushima S, Miyake T, Kawaguchi T, Motomura K, Nakashima Y, Nakamura K, Jinnin M, Ihn H.
  • 雑誌名: Case Rep Dermatol 巻: ４ ページ: 14-149
  • 査読あり
• [雑誌論文] Overexpression of hepatocyte growth factor receptor in scleroderma dermal fibroblasts is caused by autocrine transforming growth factor βsignaling. (2012)
  • 著者名/発表者名: Kajihara I, Jinnin M, Makino T, Masuguchi S, Sakai K, Fukushima S, Maruo K, Inoue Y, Ihn H.
  • 雑誌名: BioScience Trends, 巻: 6 ページ: 136－142
  • 査読あり
• [雑誌論文] microR-92a expression in the sera and dermal fibroblasts increases in patients with scleroderma. (2012)
  • 著者名/発表者名: Sing T, Jinnin M, Yamane K, Honda N, Makino K, Kajihara I, Makino T, Sakai K, Mashuguchi S, Fukushima S, Ihn H.
  • 雑誌名: Rheumatology, 巻: 51 ページ: 1550-1556
  • 査読あり
• [雑誌論文] Kinase family member 20A as is a novel melanoma-associated antigen. (2012)
  • 著者名/発表者名: Yamashita J, Fukushima S, Jinnin M, Honda N, Makino K, Sakai K, Masuguchi S, Inoue Y, Ihn H.
  • 雑誌名: Acta Derm Venereol, 巻: 92 ページ: 593-597
  • 査読あり
• [雑誌論文] CD163 expression is increased in the involved skin and sera of patients with systemic lupus erythematosus. (2012)
  • 著者名/発表者名: Nakayama W, Jinnin M, Makino K, Kajihara I, Makino T, Fukushima S, Sakai k, Inoue Y, Ihn H.
  • 雑誌名: Eur J Dermatol, 巻: 22 ページ: 512-517
  • 査読あり
• [雑誌論文] Serum angiopoietin-like protein 3 concentrations in rheumatic diserases. (2012)
  • 著者名/発表者名: Hayashi Y, Jinnin M, Makino T, Kajihara I, Makino K, Honda N, Nakayama W, Inoue K, Fukushima S, Ihn H.
  • 雑誌名: Eur J Dermatol, 巻: 22 ページ: 500-504
  • 査読あり
• [雑誌論文] Diagnostic and prognostic value of subcutaneous tissue biopsy in patients with cardiac amyloidosis. (2012)
  • 著者名/発表者名: Takashio S, Izumiya Y, Jinnin M, Yamamuro M, Kojima S, Ihn H, Ogawa H.
  • 雑誌名: Am J Cardiol, 巻: 110 ページ: 1507-1511
  • 査読あり
• [雑誌論文] Tsukushi controls the hair cycle by regulating TGF-β1 signaling. (2012)
  • 著者名/発表者名: Niimori D, Kawano R, Felemban A, Niimori-Kita K, Tanaka H, Ihn H, Ohta K.
  • 雑誌名: Dev Biol, 巻: 372 ページ: 81-87
  • 査読あり
• [雑誌論文] Case of blastic plasmaytoid dendritic cell neoplasm. (2012)
  • 著者名/発表者名: Aoi J, Ogata A, Makino T, Sakai K, Masuguchi S, Fukushima S, Jinnin M, Inoue Y, Ihn H.
  • 雑誌名: J Dermatol, 巻: 39 ページ: 1066-1067
  • 査読あり
• [雑誌論文] Serum concentration of angiogenin in patients with rheumatic diseases. (2012)
  • 著者名/発表者名: Kuwahara A, Jinnin M, Makino T, Kajihara I, Makino K, Honda N, Nakayama W, Inoue K, Fukushima S, Ihn H.
  • 雑誌名: BioScience Trends, 巻: 6 ページ: 229-233
  • 査読あり
• [学会発表] Interleukin-23 signaling contributes to the increased collagen production in scleroderma fibroblasts. (2012)
  • 著者名/発表者名: Nakayama W, Jinnin M, Fukushima S, Ihn H.
  • 学会等名: The 37 th Annual Meeting of the Japanese Society for Investigative Dermatology
  • 発表場所: ロワジールホテル＆スパタワー那覇（Okinawa）
  • 年月日: 20121207-20121209
• [学会発表] microRNA-150 down-regulation contributes to the constitutive type I collagen overexpression in scleroderma dermal fibroblasts via the induction of integrinβ3. (2012)
  • 著者名/発表者名: Honda N, Jinnin M, Makino K, Makino T, Fukushima S, Inoue Y, Okamoto Y, Hasegawa M, Fujimoto M, Ihn H.
  • 学会等名: The 37 th Annual Meeting of the Japanese Society for Investigative Dermatology
  • 発表場所: ロワジールホテル＆スパタワー那覇（Okinawa）
  • 年月日: 20121207-20121209
• [学会発表] Excessive expression of type I collagen in systemic and localized scleroderma is caused by the down-regulation of microRNA let-7a. (2012)
  • 著者名/発表者名: Makino K, Jinnin M, Yamane K, Eto M, Kusano T, Honda N, Kajihara I, Makino T, Sakai K, Masuguchi S, Fukushima S, Ihn H.
  • 学会等名: The 37 th Annual Meeting of the Japanese Society for Investigative Dermatology
  • 発表場所: ロワジールホテル＆スパタワー那覇（Okinawa）
  • 年月日: 20121207-20121209
• [学会発表] Intravenous immunoglobulin treatment recovers the down-regulated levels of Th1 cytokines in the sera and skin of scleroderma patients. (2012)
  • 著者名/発表者名: Kudo H, Jinnin M, Yamane K, Makino T, Kajihara I, Makino K, Honda N, Nakayama W, Fukushima S, Ihn H.
  • 学会等名: The 37 th Annual Meeting of the Japanese Society for Investigative Dermatology
  • 発表場所: ロワジールホテル＆スパタワー那覇（Okinawa）
  • 年月日: 20121207-20121209
• [学会発表] Decreased adiponectin levels in the patients with diffuse cutaneous systemic sclerosis. (2012)
  • 著者名/発表者名: Fukushima S, Jinnin M, Arakawa H, Makino T, Kajihara I, Makino K, Honda N, Inoue Y, Ihn H.
  • 学会等名: The 37 th Annual Meeting of the Japanese Society for Investigative Dermatology
  • 発表場所: ロワジールホテル＆スパタワー那覇（Okinawa）
  • 年月日: 20121207-20121209
• [学会発表] Dysregulated discoidin domain receptor 2-microRNA196a ‐mediated negative feedback against excess type I collagen expression in scleroderma dermal fibroblasts. (2012)
  • 著者名/発表者名: Makino K, Jinnin M, Aoi J, Kajihara I, Makino T, Sakai K, Fukushima S, Inoue Y, Ihn H.
  • 学会等名: American College of Rheumatology
  • 発表場所: Washington D.C.（アメリカ）
  • 年月日: 20121109-20121114
• [学会発表] microRNA-150 down-regulation contributes to the constitutive type I collagen overexpression in scleroderma dermal fibroblasts via the induction of integrin β3. (2012)
  • 著者名/発表者名: Honda N, JInnin M, Makino K, Makino T, Fukushima S, Inoue Y, Okamoto Y, Hasegawa M, Fujimoto M, Ihn H.
  • 学会等名: 42 nd annual ESDR Meeting
  • 発表場所: Venice（イタリア）
  • 年月日: 20120919-20120922
• [学会発表] The levels of adiponectin are decreased in the skin and sera of diffuse cutaneous systemic sclerosis patients. (2012)
  • 著者名/発表者名: Kubo Y, Fukushima S, Jinnin M, Makino T, Kajihara I, Ichihara A, Makino K, Ihn H.
  • 学会等名: Annual European Congress of Rheumatology
  • 発表場所: Berlin(ドイツ）
  • 年月日: 20120606-20120609