| 研究実績の概要 |
【内容】「PRPが消化管吻合部の創傷治癒を促進するﾒｶﾆｽﾞﾑの解明」を中心に研究を進めた.
【方法】異なる濃度中のPlatelet-Rich Plasma (PRP) に含まれる成長因子を検討するため, PRP（5×109個/ml）を各濃度に調整し, それぞれに含まれるTGF-β1およびPDGF-BBをELISAにより測定した. ﾋﾄ大腸線維芽細胞株CCD18CoとPRPを0～2%の各濃度に調整した上で共培養し, PRPと共培養を行った際の細胞増殖・Collagen産生を検討した. 共培養24時間後のDNA合成能はBrdUを用い, 共培養72時間後の細胞増殖は CCK-8を用いて検討した. 細胞増殖を検討した培養上清中のCollagen type I濃度をELISAにより検討した. また, Collagen type I mRNAの発現を検討した.
【結果と考察】PRPに含まれるTGF-β1およびPDGF-BBは, PRPの濃度増加に伴い増加した. 大腸線維芽細胞と各濃度のPRPを共培養すると, DNA合成能および細胞増殖能はPRPの濃度依存性に増加した. 共培養72時間後の上清中のCollagen type Iの濃度は濃度依存性に増加したが, 細胞増殖から期待される濃度ではなかった. Collagen type I mRNAの発現はPRP共培養により抑制されており, 個々の線維芽細胞が産生する量はPRP共培養により減少している可能性が示唆された. PRPと共培養を行うことで上清中のcollagen量は濃度依存性に増加したが, 線維芽細胞数の増加による効果であり, 個々の細胞においてはcollagen産生を促進しないことが示唆された．
【結論】in vitroの検討では, PRPの創傷治癒促進効果の主たるﾒｶﾆｽﾞﾑは線維芽細胞に対する増殖促進効果であり, 線維芽細胞数の増加に伴ってCollagen産生量が増大している可能性が明らかとなった．
|
