| 研究課題/領域番号 |
24591926
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| 研究機関 | 公益財団法人田附興風会 |
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研究代表者 |
黄 政龍 公益財団法人田附興風会, 医学研究所 第1研究部, 研究主幹 (10271511)
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| 研究分担者 |
庄司 剛 公益財団法人田附興風会, 医学研究所 第1研究部, 主任研究員 (80402840)
福井 基成 公益財団法人田附興風会, 医学研究所 第12研究部, 部長 (50342697)
竹村 昌也 名古屋市立大学, 大学院医学研究科, 助教 (30378707)
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| 研究期間 (年度) |
2012-04-01 – 2015-03-31
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| キーワード | 癌 / プログレッション / TM4SF / Wnt / 遺伝子治療 |
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| 研究実績の概要 |
我々はアデノウィルスベクターを用いて，TM4SF減弱癌細胞株へのTM4SF誘導（CD9誘導ベクターとCD82誘導ベクター）とWnt高発現癌細胞株へのshRNA発現によるWnt抑制（Wnt1抑制ベクター，Wnt2B抑制ベクター，Wnt5A抑制ベクター）について，in vitroの遺伝子治療実験を行い，機能的解析を行った．その結果，CD9減弱癌細胞株であるA549とHT1080では，CD9誘導ベクターによりTranswell 法で細胞運動能の抑制がみられた．同様に，CD82減弱癌細胞株であるA549とMAC10に対するCD82誘導ベクターでも細胞運動能の抑制がみられた．Wntシグナルでは，Wnt2B高発現癌細胞株であるA549とHela, PANC1に対して，Wnt2B抑制ベクターがMTTアッセイで強力な細胞増殖抑制を認め，更にフローサイトメーターとTUNEL法でもアポトーシスの誘導が見られた．一方，Wnt1抑制ベクターとWnt5A抑制ベクターによる細胞増殖抑制とアポトーシス誘導の効果は少なかった．
次に，CD9誘導+Wnt2B抑制とCD82+Wnt2B抑制による機能的解析を行った．CD9誘導自体がWnt2B発現を抑制することより，CD9誘導+Wnt2B抑制の遺伝子治療の方が，Wnt標的遺伝子であるc-Mycとsurvivinの発現抑制が強くみられ，腫瘍増殖抑制効果がより強く認められたた．そのため，CD9誘導+Wnt2B抑制がプログレッションの抑制に最も有効な組み合わせと考えた．しかし，新規ターゲットの検索行うためには，複合遺伝子治療で，CD9誘導とWnt2B抑制の両方ともに行われている細胞の集団の選別が必要である．アデノウィルスベクターでは単一ユニットしか搭載できず，リポソームベクターの導入効率が低いこともあり，両方ともに行われている細胞集団の選別には未だ至っていない．
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