| 研究課題/領域番号 |
24591937
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 研究機関 | 浜松医科大学 |
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研究代表者 |
菊池 寛利 浜松医科大学, 医学部, 助教 (70397389)
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| 研究分担者 |
今野 弘之 浜松医科大学, 医学部, 教授 (00138033)
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| 研究期間 (年度) |
2012-04-01 – 2015-03-31
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| キーワード | 消化管間質腫瘍 / 癌幹細胞 / マイクロアレイ / 分子標的治療 |
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| 研究概要 |
固形癌における癌幹細胞 (cancer stem cell; CSC) 理論と同様に、消化管間質腫瘍（Gastrointestinal stromal tumor : GIST）にもstem cell が存在するとの仮説に基づき、この細胞集団の同定さらに遺伝子発現の特徴から、GIST に対する新規治療標的を同定することを最終目的とし、以下に示す実験を行った。
１．外科手術にて切除した胃GIST臨床検体5例から、cancer tissue originated spheroids (CTOS) 作成方法を用いて、GIST originated spheroids (GISTOS) を作成した。具体的には、GIST 組織をミンス後Liberase DH にて酵素処理し、金属フィルターにて濾過し、organoids を作成する。これをStemPro(+ supplements)培養液中で培養しGISTOS を得た。
２．得られたGISTOSをウシ血清存在下で培養することにより、分化したGIST細胞を得た。この細胞からDNAを抽出し、元の腫瘍と同じc-kit遺伝子変異を有していることを確認した。
３．得られたGISTOSをヌードマウスの皮下へ移植し、GIST 皮下腫瘍の形成を試みたが、未だ成功にいたっていない。GISTOSが移植先のヌードマウス皮下にて、元のGISTと同様の組織像を持つ腫瘍を形成することにより、GISTOSがstem cellとしての特徴を持つことが示されるため、以後の研究を遂行するために必要な実験として、現在改良を重ね継続中である。
４．得られたGISTOS(stem cell +++)と元の臨床GIST(stem cell +/-)における遺伝子発現を、マイクロアレイにて比較解析する準備を行っている。上記２．の結果が得られた際には速やかに解析を行う予定である。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
外科手術検体5例からの、GIST originated spheroids (GISTOS)作成は成功し、GISTOSのサンプルおよび元の腫瘍は保存済である。得られたGISTOS(stem cell +++)と元の臨床GIST(stem cell +/-)における遺伝子発現を、マイクロアレイにて比較解析する予定であり準備はできているが、解析開始までに、GISTOSがstem cellとしての特徴を持つことを確認する必要があると考える。このため、得られたGISTOSをヌードマウスの皮下へ移植し、GIST 皮下腫瘍の形成を試みたが、移植マウスに生着せず未だ成功にいたっていない。現在改良を重ね検討中であるが、手術によって得られる臨床検体を要する実験であり、新規手術症例を待つ必要が生じるため、各実験開始までに時間を要する。これらの理由から、研究の進行が当初の計画より遅れている。
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| 今後の研究の推進方策 |
外科手術検体から得られたGISTOSをヌードマウスの皮下へ移植し、形成された皮下腫瘍が元のGISTと同様の組織像を持つことを確認する。これにより、GISTOSがstem cellとしての特徴を持つことが示されるため、以後の研究を遂行する。
GISTOS(stem cell +++)と元の臨床GIST(stem cell +/-)における遺伝子発現を、マイクロアレイにて比較検討し、GIST におけるstem cell 特異的に発現している、新規治療標的となり得る分子を同定する。
ヌードマウスの皮下GIST腫瘍において、新規標的に対する中和抗体あるいは利用可能であれば低分子阻害剤をimatinib に加えて投与した場合の腫瘍増殖抑制効果を検討する。
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| 次年度の研究費の使用計画 |
該当なし
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