腫瘍関連マクロファージによる大腸癌の化学療法薬耐性獲得機構の解明

2014 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 24591971
• 研究機関: 鈴鹿医療科学大学
• 研究代表者: 米田 操 鈴鹿医療科学大学, 保健衛生学部, 准教授 (60600492)
• 研究分担者: 白石 泰三 三重大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (30162762) ; 広川 佳史 三重大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (30322738) ; 石井 健一朗 三重大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (90397513)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2015-03-31
• キーワード: 大腸癌 / 化学療法薬耐性獲得 / 腫瘍関連マクロファージ / ナフトピジル / IL-1beta / スフェロイド形成

研究実績の概要

本年度は、実験１としてヒト大腸癌細胞との共培養で正常マクロファージに誘導される腫瘍関連マクロファージTAMs様分化をフェニルピペラジン誘導体ナフトピジルが阻害できるか否かを、また実験２としてヒト大腸癌細胞と正常マクロファージをin vitroで３次元培養したときの形態像を検討した。
実験１）我々は初年度の検討で、下部のウェル内でマクロファージ様PMA-THP-1細胞を、上部のセルカルチャーインサート内にヒト大腸癌細胞株HT29を培養し、PMA-THP-1細胞における遺伝子変化をリアルタイムPCR法で解析した。この時、HT29細胞と共培養したPMA-THP-1細胞ではIL-1beta mRNAが有意に増加することを見出した。つまり、HT29細胞が産生・分泌する何らかのパラクライン因子がPMA-THP-1に作用し、PMA-THP-1細胞がTAMs様分化誘導という機能転換を引き起こしている可能性が示唆された。そこで、この共培養実験系を活用して、HT29細胞によるTAMs様分化誘導という現象に対するナフトピジルの作用を検証した。その結果、ナフトピジルの添加により、HT29細胞と共培養したPMA-THP-1細胞にて観察されたIL-1beta mRNA発現増加が完全に阻害された。つまり、ナフトピジルはHT29細胞が産生・分泌し、PMA-THP-1細胞にTAMs様分化を誘導するパラクライン因子の産生や働きを阻害する作用があることを見出した。
実験２）HT29細胞単独で３次元培養すると球状のスフェロイドを形成した。一方、HT29細胞とPMA-THP-1細胞を混合して３次元培養すると、スフェロイド表面から足を延ばすような形で外へ向かって腫瘍が成長していく特徴的な形態像を示した。この時、病理組織学的には顕著な差を認めなかった。

研究成果

• [雑誌論文] Corrigendum: Human β-defensin-3 inhibits migration of colon cancer cells via downregulation of metastasis-associated 1 family, member 2 expression (2015)
  • 著者名/発表者名: Uraki S, Sugimoto K, Shiraki K, Tameda M, Inagaki Y, Ogura S, Kasai C, Nojiri K, Yoneda M, Yamamoto N, Takei Y, Nobori T, Ito M
  • 雑誌名: Int J Oncol 巻: 46 ページ: 1858
  • DOI: 10.3892/ijo.2015.2868
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Report of a case of acinar cell carcinoma with its differential diagnosis on endoscopic ultrasound-guided fine-needle aspiration cytology (2014)
  • 著者名/発表者名: Yoneda M, Kanayama K, Imai H, Shiraishi T
  • 雑誌名: J Cytol 巻: 31 ページ: 93-95
  • DOI: 10.4103/0970-9371.138677
  • 査読あり
• [雑誌論文] Inflammatory suppressive effect of prostate cancer cells with prolonged exposure to transforming growth factor β on macrophage-differentiated cells via downregulation of prostaglandin E2 (2014)
  • 著者名/発表者名: Hayashi A, Hirokawa YS, Kagaya M, Fujiwara M, Yoneda M, Kanayama K, Uchida K, Ishii K, Shiraishi T
  • 雑誌名: Oncol Lett 巻: 8 ページ: 1513-1518
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Splenectomy increases the number of circulating hematopoietic stem/progenitor cells in patients with hepatitis C virus-associated liver cirrhosis (2014)
  • 著者名/発表者名: Masuya M, Shiraki K, Sugimoto K, Yamamoto N, Yoneda M, Kanayama K, Nishikawa K, Ino K, Tawara I, Ohishi K, Sakurai H, Usui M, Shiraishi T, Isaji S, Takei Y and Katayama N
  • 雑誌名: Hepatology Research 巻: 44 ページ: E376-E385
  • DOI: 10.1111/hepr.12319
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Effects of mycobacteria major secretion protein, Ag85B, on allergic inflammation in the lung (2014)
  • 著者名/発表者名: Tsujimura Y, Inada H, Yoneda M, Fujita T, Matsuo K, Yasutomi Y
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 9 ページ: e106807
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0106807
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Radiofrequency ablation after arterial injection of miriplatin-iodized oil suspension into swine liver: ablative zone size and tissue platinum concentration (2014)
  • 著者名/発表者名: Yamanaka T, Takaki H, Nakatsuka A, Uchida K, Junji U, Fujimori M, Hasegawa T, Yoneda M, Shiraishi T, Sakuma H, Yamakado K
  • 雑誌名: Cardiovasc Intervent Radiol 巻: 37 ページ: 1047-1052
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [学会発表] リウマチ性疾患と関節液診断 (2015)
  • 著者名/発表者名: 米田 操
  • 学会等名: 日本臨床検査学会近畿支部
  • 発表場所: 京都府京都市・京都保健衛生専門学校
  • 年月日: 2015-01-25 – 2015-01-25
• [学会発表] 膵EUS-FNAにおける良性病変の細胞学的検討－従来法とLBC法の比較の細胞像の比較－ (2014)
  • 著者名/発表者名: 金山 和樹、米田 操、今井 裕、北山 美佳、柴原 亜希子、藤田 良浩、内田 克典、小塚 祐司、広川 佳史、白石 泰三
  • 学会等名: 日本臨床細胞学会
  • 発表場所: 新潟県新潟市・新潟コンベンションセンタ－
  • 年月日: 2014-11-09 – 2014-11-10
• [学会発表] EUS-FNA標本作成の工夫と細胞像（膵領域） (2014)
  • 著者名/発表者名: 米田 操、金山 和樹、今井 裕、白石泰三
  • 学会等名: 日本臨床細胞学会
  • 発表場所: 山口県下関市・海峡メッセ下関
  • 年月日: 2014-11-08 – 2014-11-09
• [学会発表] 上部消化管GISTのEUS-FNA診断における影響因子の検討 (2014)
  • 著者名/発表者名: 金山 和樹、今井 裕、米田 操、北山 美佳、柴原 亜希子、藤田 良浩、藤原 雅也、林 昭伸、広川 佳史、白石 泰三
  • 学会等名: 日本臨床細胞学会
  • 発表場所: 神奈川県横浜市・パシフィコ横浜
  • 年月日: 2014-06-06 – 2014-06-07