| 研究課題/領域番号 |
24592178
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 研究機関 | 藤田保健衛生大学 |
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研究代表者 |
林 拓郎 藤田保健衛生大学, 医学部, 講師 (40296611)
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| 研究分担者 |
廣瀬 雄一 藤田保健衛生大学, 医学部, 教授 (60218849)
伊藤 圭介 藤田保健衛生大学, 医学部, 助教 (70622934)
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| 研究期間 (年度) |
2012-04-01 – 2015-03-31
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| キーワード | グリオーマ / ベバシズマブ |
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| 研究概要 |
ヒトグリオーマ細胞からcancer stem cellの分離について検討中である。現在のところ、fibroblast growth factor、 epidermal growth factorの添加により、分離培養を試みているが、継代により死滅する細胞が多く、cancer stem cellの生物学的特徴を明らかにする段階には至っていない。
グリオーマ細胞株をヌードマウスの線条体に移植する手技は確立したが、グリオーマの増大に伴い、個体が腫瘍死するため、in vivoでのアバスチン、ラパマイシン投与に至っていない。移植指摘細胞数に関して検討中であるが、現在のところ、1x105個と考えている。
グリオーマ細胞株をin vitroで培養し、ベバシズマブ、ラパマイシンを投与し、至適濃度を決定した。アバスチンは1.0mg/ml （4日間）、ラパマイシンは50 nM（6時間）である。さらに、薬剤投与後の細胞に関して、VEGF、HIF1α、HSP90などの蛋白発現に関して、免疫組織学的染色法ならびにウェスタンブロッティング法を用いて経時的に解析している。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
4: 遅れている
理由
①cancer stem cell の分離が困難であること
②cancer stem cell の代用としてグリオーマ細胞株を脳内移植したが、腫瘍増大により死亡してしまう固体が多いこと
から、大幅な研究の修正が必要となったため。
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| 今後の研究の推進方策 |
ベバシズマブ、ラパマイシン投与を
①グリオーマ細胞株を用いた培養系で行い、VEGF、HIF1α等のたんぱく発現を解析する
②グリオーマ細胞株を用いた動物皮下移植モデルを用いてVEGF、HIF1α等のたんぱく発現を解析する
ことを第一に行い、併行してcancer stem cell分離を行いたい。
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| 次年度の研究費の使用計画 |
平成24年度と同様に物品費・旅費等に使用し、現在のところ特に大口の物品購入は予定していない。
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