新規マウス軟部肉腫高肺転移株の樹立と肺転移再現動物モデルの開発

2014 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 24592233
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 中 紀文 大阪大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (90601964)
• 研究分担者: 吉川 秀樹 大阪大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (60191558)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2015-03-31
• キーワード: 骨軟部腫瘍 / 肉腫細胞株 / 動物実験モデル / 転移能 / plexin / semaphorin

研究実績の概要

マウス良性神経系軟部腫瘍TR6BC1から尾静注→肺転移形成→in vitro細胞培養→再度尾静注の操作（Fidler法）を繰り返し，マウス軟部肉腫で初めて自然肺転移を生じる高肺転移株TR6BC1-LMを樹立することに成功した．本細胞株はマウス尾静注のみならず背部皮下への移植によってほぼ100%の確率で肺転移巣を形成することが確認された．TR6BC1-LMは2次元の増殖能は親株と同程度であったが，3次元の増殖能やマウスでの腫瘤形成能は親株に比べ有意に増大しており，運動能，浸潤能も有意に亢進していた．両細胞株の発現解析を行い生物学的機能の差を生じる機能分子の候補を複数確認した．
最終年度に複数の候補機能分子の中から，神経系細胞で軸索伸展や遊走能に関与する Semaphorin4D/PlexinB1シグナル伝達路に焦点を絞り，発現および機能解析実験を行った．高肺転移株TR6BC1-LM においてSemaphorin4Dの受容体であるPlexinB1はRNAレベル，タンパクレベルでともに発現が増強していた，RNA干渉による機能抑制実験において運動能，浸潤能が著しい減弱を示すことが観察され，Semaphorin4D/PlexinB1シグナルが肺転移能を賦与する機能分子群の一つである可能性が示唆された．
上記の知見を臨床応用するために，今後，Semaphorin4D/PlexinB1シグナル伝達路を特異的に抑制する候補化合物を入手し，in vitro, in vivo の実験系で運動能，浸潤能およびマウスでの腫瘤形成能，肺転移能に対する抑制効果を検討していく予定である．

研究成果

• [雑誌論文] Tailored Therapeutic Strategies for Synovial Sarcoma: Receptor Tyrosine Kinase Pathway Analyses Predict Sensitivity to the mTOR Inhibitor RAD001. (2014)
  • 著者名/発表者名: Yasui H, Naka N, Imura Y, Outani H, Kaneko K, Hamada KI, Sasagawa S, Araki N, Ueda T, Itoh K, Myoui A, Yoshikawa H.
  • 雑誌名: Cancer Lett. 巻: 347 ページ: 114-122
  • DOI: 10.101610.1016/j.canlet.2014.01.027.
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Expression of noggin, an antagonist of bone morphogenetic protein, in schwannoma: A possible mechanism. (2014)
  • 著者名/発表者名: Kaneko K, Higuchi C, Naka N, Yoshikawa H.
  • 雑誌名: Oncol Lett 巻: 8 ページ: 111-116
  • DOI: 10.3892/ol.2014.2138.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Deflection of VEGF action by SS18-SSX and composite VEGF- and CXCR4-targeted therapy in synovial sarcoma. (2014)
  • 著者名/発表者名: Wakamatsu T, Naka N, Sasagawa S, Tanaka T, Takenaka S, Araki N, Ueda T, Nishizawa Y, Yoshikawa H, Itoh K.
  • 雑誌名: Cancer Sci. 巻: 105 ページ: 1124-1134
  • DOI: 10.1111/cas.12469.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Establishment of a novel clear cell sarcoma cell line (Hewga-CCS), and investigation of the antitumor effects of pazopanib on Hewga-CCS. (2014)
  • 著者名/発表者名: Outani H, Tanaka T, Wakamatsu T, Imura Y, Hamada K, Araki N, Itoh K, Yoshikawa H, Naka N.
  • 雑誌名: BMC Cancer 巻: 14 ページ: 455
  • DOI: 10.1186/1471-2407-14-455.
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Combined targeting of mTOR and c-MET signaling pathways for effective management of epithelioid sarcoma. (2014)
  • 著者名/発表者名: Imura Y, Yasui H, Outani H, Wakamatsu T, Hamada K, Nakai T, Yamada S, Myoui A, Araki N, Ueda T, Itoh K, Yoshikawa H, Naka N.
  • 雑誌名: Mol Cancer 巻: 13 ページ: 185
  • DOI: 10.1186/1476-4598-13-185.
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [学会発表] 類上皮肉腫に対するmTORとc-METを標的とした抗腫瘍効果 (2014)
  • 著者名/発表者名: 伊村慶紀，王谷英達，濱田健一郎，名井 陽，中 紀文，吉川秀樹
  • 学会等名: 第73回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2014-09-25 – 2014-09-27
  • 招待講演
• [学会発表] 肉腫と幹細胞 (2014)
  • 著者名/発表者名: 中 紀文
  • 学会等名: 第47回日本整形外科学会骨・軟部腫瘍学術集会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 2014-07-17 – 2014-07-18
  • 招待講演
• [学会発表] 類上皮肉腫に対するmTOR阻害剤(RAD001)とMET阻害剤(INC280)の併用による抗腫瘍効果 (2014)
  • 著者名/発表者名: 伊村慶紀，安井広彦，王谷英達，濱田健一郎，竹中 聡，名井 陽，中 紀文，吉川秀樹
  • 学会等名: 第47回日本整形外科学会骨・軟部腫瘍学術集会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 2014-07-17 – 2014-07-18
• [学会発表] 滑膜肉腫へのmTOR阻害剤の効果を予測するバイオマーカーの提案 (2014)
  • 著者名/発表者名: 安井広彦，伊村慶紀，王谷英達，濱田健一郎，竹中 聡，名井 陽，中 紀文，吉川秀樹
  • 学会等名: 第47回日本整形外科学会骨・軟部腫瘍学術集会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 2014-07-17 – 2014-07-18
• [学会発表] Combined targeting of mTOR and c-MET significantly inhibits epithelioid sarcoma cell growth. (2014)
  • 著者名/発表者名: Yoshinori Imura, Norifumi Naka, Hirohiko Yasui, Hidetatsu Otani, Keiko Kaneko, Satoshi Takenaka, Kenichiro Hamada, Satoru Sasagawa, Akira Myoui, Nobuhito Araki, Takafumi Ueda, Kazuyuki Itoh, Hideki Yoshikawa
  • 学会等名: Metastasis research society 15th International Biennial Congress
  • 発表場所: Heidelberg, Germany
  • 年月日: 2014-06-28 – 2014-07-01
• [学会発表] Dynamic analysis of lung metastasis by mouse osteosarcoma. (2014)
  • 著者名/発表者名: Takaaki Tanaka, Yoshihiro Yui, Norifumi Naka, Toru Wakamatsu, Kazuyuki Itoh, Hideki Yoshikawa
  • 学会等名: Metastasis research society 15th International Biennial Congress
  • 発表場所: Heidelberg, Germany
  • 年月日: 2014-06-28 – 2014-07-01