| 研究課題/領域番号 |
24592483
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 研究機関 | 埼玉医科大学 |
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研究代表者 |
板倉 敦夫 埼玉医科大学, 医学部, 教授 (70262897)
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| 研究分担者 |
梶原 健 埼玉医科大学, 医学部, 准教授 (80286103)
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| 研究期間 (年度) |
2012-04-01 – 2015-03-31
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| キーワード | 絨毛細胞 / HTR-8/SVneo / microRNA / microarray / 低酸素 / 浸潤能 / 増殖能 / 網羅的解析 |
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| 研究概要 |
1.低酸素環境によるEVT細胞挙動を確認
EVTの細胞株であるHTR-8/SVneo を2％の低酸素下で培養し、細胞増殖能、浸潤能、移動能について20％の標準酸素下培養時と比較し、低酸素下では増殖能、移動能は明らかな変化はないが、浸潤能が低下することが確認された。
2.低酸素環境によるEVT細胞microRNA発現変化
HTR-8/SVneoの低酸素暴露によるmicroRNA(miRNA)の発現変化をmicroarray法による網羅的検索により明らかにした。結果は、これまでの先行研究報告と同様なプロファイルであり、再現性を確認したのちに定量的PCRによって発現量の差を確認した。
3.低酸素環境によるEVT細胞mRNA発現変化と標的遺伝子の決定
HTR-8/SVneoを同じく低酸素培養を行い、mRNAの発現変化をDNA microarray法による網羅的検索によって明らかにした。これらの検索によって、今後の解析を行う候補となるmiRNAとmRNAの発現データを統合的に解析し、3～5個の遺伝子を決定した。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
細胞株入手が予想より時間がかかり、本格的実験開始までに時間がかかったが、共同研究者の努力により、年度終了時には計画通りの進行となった。
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| 今後の研究の推進方策 |
今年度は、現在の研究組織、それぞれのエフォートで目的とする研究の達成が可能と考える。
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| 次年度の研究費の使用計画 |
当初計画案と大きな変更はない。
miRNA mimics antagomirを用いた表現型解析を行い、miRNA target geneの制御関係をLuciferase assayで評価する予定である。
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