細胞極性崩壊による発癌機構に着目した婦人科腫瘍の悪性化予測バイオマーカーの開発

2014 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 24592506
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 長阪 一憲 東京大学, 医学部附属病院, 助教 (30624233)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2015-03-31
• キーワード: 細胞極性決定因子 / リン酸化機構 / 網羅的転写産物解析

研究実績の概要

ハイリスクHPV感染から子宮頸癌に至る癌化の過程について、発癌過程に関与するメカニズムを検証し、癌化を予測できる診断薬や治療薬開発へと応用することを目的とした。網羅的転写産物解析 (CAGE法)による検証：全ヒトゲノムシークエンス側にマップされた全転写産物の発現解析をもとに、バイオインフォマティクスのデータベースを用いた発現解析（KEGGパスウェイ解析）を施行し、その生物学的解釈を行った。CINから癌へ至る過程で上方制御、および下方制御されている転写産物群をそれぞれ抽出した。プロテオミクス解析による検証： 細胞抽出液中で免疫沈降されたhScrib蛋白質を用いて、マススペクトロメトリーによる質量解析を行い、蛋白複合体の同定を行った。次にリン酸化蛋白質分析によりhScrib内リン酸化部位とリン酸化伝達系について検討を行った。CAGE法による網羅的オミックス解析によって得られた宿主側の転写産物のうち、CIN1細胞株に比して、頸癌細胞株で最も抑制されていた遺伝子群が細胞極性・接着系であった。また、リン酸化蛋白質分析によりhScribのリン酸化部位とリン酸化伝達系について検討を行ったところ、ERKとhScribは特異的配列を介して直接結合することで、Ras-ERK系路の活性化と増殖能獲得を抑制することがわかった。さらにhScribのリン酸化機構を制御する蛋白質としてプロテインホスファターゼ（PP1γ）を同定した。また臨床検体を用いた検証では、子宮頸癌組織ではPP1γの細胞内発現が、約20％の検体で消失していること、CIN組織では異型度の段階が上がるに従い細胞内局在に異常をきたすこと、を確認した。

研究成果

• [雑誌論文] Characterization of novel transcripts of human papillomavirus type 16 using cap analysis gene expression technology. (2015)
  • 著者名/発表者名: Taguchi A, Nagasaka K, Kawana K, Hashimoto K, Kusumoto-Matsuo R, Plessy C, Thomas M, Nakamura H, Bonetti A, Oda K, Kukimoto I, Carninci P, Banks L, Osuga Y, Fujii T.
  • 雑誌名: J Virol 巻: 89 ページ: 2448-52
  • DOI: doi: 10.1128/JVI.03433-14.
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] HPV-16 impairs the subcellular distribution and levels of expression of protein phosphatase 1γ in cervical malignancy. (2015)
  • 著者名/発表者名: Seiki T, Nagasaka K, Kranjec C, Kawana K, Maeda D, Nakamura H, Taguchi A, Matsumoto Y, Arimoto T, Wada-Hiraike O, Oda K, Nakagawa S, Yano T, Fukayama M, Banks L, Osuga Y, Fujii T.
  • 雑誌名: BMC Cancer 巻: 7 ページ: 230
  • DOI: doi: 10.1186/s12885-015-1141-0
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] High-risk human papillomavirus correlates with recurrence after laser ablation for treatment of patients with cervical intraepithelial neoplasia 3: a long-term follow-up retrospective study. (2014)
  • 著者名/発表者名: Inaba K, Nagasaka K, Kawana K, Arimoto T, Matsumoto Y, Tsuruga T, Mori-Uchino M, Miura S, Sone K, Oda K, Nakagawa S, Yano T, Kozuma S, Fujii T.
  • 雑誌名: J Obstet Gynaecol Res 巻: 40 ページ: 554-560
  • DOI: doi: 10.1111/jog.12196.
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Positive peritoneal cytology at interval surgery is a poor prognositic factor in patients with stage T3c advanced ovarian carcinoma: A retrospective study. (2014)
  • 著者名/発表者名: Nagasaka K, Kawana K, Tomio K, Tsuruga T, Mori-Uchino M, Miura S, Tanikawa M, Miyamoto Y, Ikeda Y, Sone K, Adachi K, Matsumoto Y, Arimoto T, Oda K, Osuga Y, Fujii T.
  • 雑誌名: J Obstet Gynaecol Res 巻: Nov. 25 ページ: 554-560
  • DOI: doi: 10.1111/jog.12616.
  • 査読あり
• [学会発表] HPV検査と細胞診の臨床的意義：HPV life cycleの視点から (2014)
  • 著者名/発表者名: 長阪一憲
  • 学会等名: 日本臨床細胞学会学術総会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 2014-11-02 – 2014-11-03
  • 招待講演
• [図書] 臨床検査ガイド2015 (2015)
  • 著者名/発表者名: 長阪一憲 矢野哲
  • 総ページ数: 842-845
  • 出版者: 文光堂