卵巣癌腹膜播種に対するＴａｔペプチドをベクターとしたカルポニンｈ１遺伝子治療

2014 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 24592520
• 研究機関: 鹿児島大学
• 研究代表者: 小林 裕明 鹿児島大学, 医歯(薬)学総合研究科, 准教授 (70260700)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2015-03-31
• キーワード: カルポニンh1 / カルポニンリピート構造 / 卵巣がん / Cell-penetrating peptide / 腹膜播種 / 分子標的治療

研究実績の概要

癌の浸潤や転移には、細胞の形態、接着、運動、増殖等を担う細胞骨格制御分子群が深く関与している。アクチン結合蛋白質カルポニンh1（CNh1）は細胞骨格アクチンを安定化させる働きをもつ。以前、我々はアデノウィルスベクターを用いてCNh1を卵巣癌細胞に導
入し、癌細胞の増殖能と浸潤能が抑制されることを報告した。さらに卵巣癌腹膜播種モデルマウスに同ウィルスを腹腔内投与し、播種の抑制を介した延命効果を確認した。臨床に応用する場合、Cell-penetrating peptide(CPP)を用いた導入が有用であるが、CNh1の全
長を組み込むことは困難である。そこでCNh1のタンパク質構造のうちアクチンの安定化に有効な最小部位のアミノ酸配列を同定することとした。
平成24-25年度に、CNh1の構造の一部であるカルポニンリピート構造部分（以下、CNR）を卵巣癌細胞株SKOV3i.p.-1とSHIN-3に導入し、免疫染色における細胞質内のアクチン重合促進とアクチンファイバー形成に伴う細胞形態変化、およびアクチンの重合部位に一致したCNR局在を確認した。CNR導入卵巣がん細胞の運動能と浸潤能は有意に抑制されたが、CNh1では抑制できていた増殖能は変化なかった。それを受けて平成26年度は、細胞増殖も抑制しうるアミノ酸配列を再度CNh1の全長から探索し直した。CNR1はCNR配列のさらに小部分の配列であるが、これを卵巣癌細胞に導入したところ良好なアクチン重合促進効果が確認できたため、卵巣がん細胞の運動能、浸潤能、増殖能に与える影響を検討した。CNRでは認めなかった細胞増殖に対する抑制効果が確認できた。
以上より、CNR1は卵巣がんの分子標的治療の候補になりうると考えられ、これをCPPに導入し卵巣がん腹膜播種を治療する新規治療の可能性が示唆された。

研究成果

• [雑誌論文] A very rare case of endometriosis presenting with massive hemoperitoneum. (2015)
  • 著者名/発表者名: Togami S, Kobayashi H, Haruyama M, Orita Y, Kamio M, Douchi T.
  • 雑誌名: J Minim Invasive 巻: 印刷中 ページ: 印刷中
  • DOI: 10.1016/j.jmig.2015.02.014
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Uterine myxoid leiomyosarcoma with tumor embolism extending into the right atrium. (2015)
  • 著者名/発表者名: Imai H, Yagi H, Okugawa K, Kenjo H, Ohgami T, Kawano Y, Kaneki E, Ichinoe A, Asanoma K, Yahata H, Sonoda K, Kobayashi H, Kaku T, Kato K.
  • 雑誌名: Case Rep Obstet Gynecol 巻: 印刷中 ページ: 印刷中
  • DOI: 10.1155/2015/316262
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Administration of standard-dose BEP regimen (bleomycin+etoposide+cisplatin) is essential for treatment of ovarian yolk sac tumour (2015)
  • 著者名/発表者名: Satoh T, Aoki Y, Kasamatsu T, Ochiai K, Takano M, Watanabe Y, Kikkawa F, Takeshima N, Hatae M, Yokota H, Saito T, Yaegashi N, Kobayashi H, Baba T, Kodama S, Saito T
  • 雑誌名: Eur J Cancer 巻: 51 ページ: 340-51
  • DOI: 10.1016/j.ejca.2014.12.004
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Potential proton beam therapy for recurrent endometrial cancer in the vagina. (2015)
  • 著者名/発表者名: Yanazume S, Arimura T, Kobayashi H, Douchi T
  • 雑誌名: J Obstet Gynaecol Res 巻: 41 ページ: 813-816
  • DOI: 10.1111/jog.12611
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Cryotherapy for massive vulvar lymphatic leakage complicated with lymphangiomas following gynecological cancer treatment. (2014)
  • 著者名/発表者名: Yanazume S, Douzono H, Kubo H, Nagata T, Douchi T, Kobayashi H
  • 雑誌名: Jpn J Clin Oncol 巻: 44(11) ページ: 1116-9
  • DOI: 10.1093/jjco/hyu125
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Primary uterine müllerian mucinous borderline tumor (MMBT) associated with adenomyosis: a case report. (2014)
  • 著者名/発表者名: Kawamura K, Kaneki E, Ogawa S, Imamura H, Ohishi Y, Kobayashi H, Kato K
  • 雑誌名: Int J Gynecol Pathol 巻: 33(2) ページ: 146-50
  • DOI: 10.1097/PGP.0b013e318288b364
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] Identification of Calponin h1 responsibility site in actin stabilization for molecular target therapy to ovarian cancer (2015)
  • 著者名/発表者名: Takako Yamane, Kazuo Asanoma, Hiroshi Yagi, Kenzo Sonoda, Norio Wake, Kiyoko Kato, Hiroaki Kobayashi
  • 学会等名: 第67回日本産科婦人科学会学術講演会
  • 発表場所: 横浜市（パシフィコ横浜）
  • 年月日: 2015-04-09 – 2015-04-12