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2012 年度 実施状況報告書

メチシリン耐性ブドウ球菌の遺伝子解析による慢性中耳炎遷延化の病態解明と治療戦略

研究課題

研究課題/領域番号 24592552
研究種目

基盤研究(C)

研究機関高知大学

研究代表者

小森 正博  高知大学, 教育研究部医療学系, 講師 (30565742)

研究分担者 小林 泰輔  高知大学, 教育研究部医療学系, 准教授 (30253313)
上原 良雄  高知大学, 教育研究部医療学系, 助教 (60346723)
研究期間 (年度) 2012-04-01 – 2015-03-31
キーワードメチシリン耐性黄色ブドウ球菌 / 慢性中耳炎 / 遺伝子解析 / MLST
研究概要

黄色ブドウ球菌の起原には地域特異性があり、その地域にてさまざまな変異をしてきた。そして、獲得した遺伝子から病院にて病原となった院内関連型メチシリン耐性黄色ブドウ球菌(MRSA)と一般社会に存在する市中関連型MRSAに大別される。院内関連型MRSAには多剤耐性に関与する遺伝子を持つものがある。一方で、市中関連型MRSAにも毒素遺伝子を持ち院内関連型MRSA以上に重篤な肺炎や菌血症を引き起こすものがある。近年のグローバル化の中で市中関連型MRSA肺炎が病院内で発生したり、特定の地域を越えてMRSAが広がったりする傾向がある。
慢性中耳炎の起炎菌は黄色ブドウ球菌が約半数を占め、近年増加傾向にある。その検討は抗生剤の感受性あるいは院内関連型・市中関連型からなされており、耳鼻咽喉科領域の感染性疾患において、遺伝解析を詳細に行った報告や、健常者のブドウ球菌株と疾患から分離されたブドウ球菌株をマッチングさせた報告は認められない。今回の第1の目的は、従来法ではできなかった進化的時間軸を反映した系統樹を作成できるMulti-locus sequence typing (MLST)法により耳漏中の黄色ブドウ球菌の遺伝子解析を行い、健常者の鼻腔内の黄色ブドウ球菌との違いを明らかにすることである。
慢性中耳炎のClonig Complex(CC)8とCC5の割合は健常者のものより多く、その理由としてこれらのCCにはMRSAが含まれているためと考えられた。さらに、慢性中耳炎では健常者に多いCC188、CC508が少なく、健常者に少ないCC121、CC509、CC59が多かった。
耳漏から分離された黄色ブドウ球菌は健常者鼻腔のものと比較して明らかに偏りがあり、健常者鼻腔内では稀とされる菌株が多いことを明らかにした。今後、慢性中耳炎をきたしやすい黄色ブドウ球菌の特徴について検討を加える。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

MLST法による遺伝子解析は順調に遂行され、健常者との差も見出しつつある。他の耐性遺伝子や毒素遺伝子について、検討数は少ないが、作製したプライマーが作用することを確認できた。

今後の研究の推進方策

現在保存している菌株を用いて、耐性遺伝子や毒素遺伝子について検討するともに、薬剤感受性をデータベースに入力していく。なお、菌株が増える毎にMLST法による遺伝子解析も合わせて行う。

次年度の研究費の使用計画

PCR試薬の追加購入やDNAシークエンサー(当大学総合研究センター実験実習機器施設に設置)にて塩基配列を同定する際の検査依頼料ならびに必要試薬の追加購入を行う。国内2学会(大分、宮崎)ならびに国際学会(カナダ、バンクーバー)における発表を予定している。また、初期データを国内学会誌へ投稿する。

  • 研究成果

    (2件)

すべて 2012

すべて 学会発表 (2件)

  • [学会発表] 慢性中耳炎の耳漏から分離されたブドウ球菌の遺伝子解析;健常者の鼻腔内ブドウ球菌との比較2012

    • 著者名/発表者名
      小森正博
    • 学会等名
      第22回日本耳科学会総会・学術講演会
    • 発表場所
      名古屋国際会議場(名古屋市)
    • 年月日
      20121004-20121006
  • [学会発表] 慢性中耳炎の耳漏から分離された黄色ブドウ球菌の遺伝子解析2012

    • 著者名/発表者名
      小森正博
    • 学会等名
      第57回日本ブドウ球菌研究会
    • 発表場所
      広島大学東京オフィス(東京)
    • 年月日
      20120921-20120922

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公開日: 2014-07-24  

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