| 研究課題/領域番号 |
24592574
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| 研究機関 | 北海道大学 |
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研究代表者 |
中丸 裕爾 北海道大学, 大学病院, 講師 (20344509)
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| キーワード | SIRT1 / IL-33 / 鼻アレルギー |
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| 研究概要 |
本年度においてはアレルギー性鼻炎患者下鼻甲介粘膜とコントロールの下鼻甲介粘膜のIL-33とSIRT1の発現量をリアルタイムPCRにて検討した。その結果アレルギー性鼻炎患者の下鼻甲介粘膜においてはIL-33発現量が亢進しSIRT1の発現量は低下していることが判明した。下鼻甲介粘膜のSIRT1抗体での染色により鼻粘膜上皮にSIRT1の発現が亢進していた。
In vitroの実験としては鼻粘膜上皮細胞を単離することを試みた。手術中に採取した鼻粘膜をHam's F-12 medium supplemented with antibiotics (100IU/ml ペニシリン、100ug/mlストレプトマイシン)で洗い、0.1% protease type XIVを含んだHam培地で16時間 4℃で培養した。
シャーレに付着した細胞を鋭匙で回収し洗浄後1well 1*105個/2ｍｌでコラーゲンコートした6wellのdishにまき37度でHam F-12培地で培養した。
現在上皮細胞であることを確認し、SIRT1の抑制剤、促進剤を添加しIL-33の発現量の変化を観察中である。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
鼻粘膜の単離は成功したが、IL-33の量の変化が一定でなく、再現性を得るのに苦労をしている。
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| 今後の研究の推進方策 |
今後は初代培養の鼻粘膜上皮を使い、SIRT1の活性化剤、促進剤によるIL-33の変化をみる。
またSIRT1のsiRNAを使用して、遺伝子をノックダウンして、IL-33の変化を見る予定である。
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| 次年度の研究費の使用計画 |
鼻粘膜の単離は成功したが、IL-33の量の変化が一定でなく、再現性を得るのに苦労をしている。このため次に予定していた試薬等の購入がまだのため次年度使用額となった。
培養試薬の購入、siRNA試薬の購入、RCR試薬の購入にあてる。
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