| 研究課題/領域番号 |
24592584
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 研究機関 | 日本医科大学 |
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研究代表者 |
RUBY Pawankar 日本医科大学, 医学部, 教授 (00287674)
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| 研究期間 (年度) |
2012-04-01 – 2015-03-31
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| キーワード | 鼻茸 / アトピー / Treg 細胞 |
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| 研究概要 |
アレルギー性副鼻腔炎を伴う鼻茸（アトピー型鼻茸）と非アレルギー性副鼻腔炎を伴う鼻茸（非アトピー型鼻茸）とアレルギー性鼻炎鼻粘膜の発症機序や再発を明らかにする為、手術により採取したアトピー型と非アトピー型鼻茸組織中におけるCD4+,CD45RO,Treg 細胞 (FOXP3)好酸球 を免疫組織学的に検討した。
アレルギー性鼻炎鼻粘膜に比べ、アレルギー性副鼻腔炎を伴う鼻茸（アトピー型鼻茸）と非アレルギー性副鼻腔炎を伴う鼻茸（非アトピー型鼻茸）における CD4+,CD45RO, 好酸球 が有意に多くみられました。さらに、アトピー型鼻茸の方が最も多くみられました。
しかしCD4+CD25+,Treg 細胞 (FOXP3)はアレルギー性鼻炎鼻粘膜に比べアトピー型鼻茸と非アトピー型鼻茸には僅かでした。アトピー型鼻茸と非アトピー型鼻茸におけるサイトカインプロフィール: IL-4, IL-5, IL-13, IL-10, IFN-gamma を検討した。アトピー型と非アトピー鼻茸組織中におけるIL-4, IL-5, IL-10, IFN-gamma の蛋白量に差はみられませんでした。一方、IL-13 とIgE はアトピー型鼻茸に多くみられました。アトピー型と非アトピー型鼻茸組織中おける好酸球とIgEの間には関連性がみられました。IgEとTreg 細胞 (FOXP3）の間には negative の関連性がみられました。
鼻茸からT細胞を分離しStaphylococcal enterotoxin A、Bで刺激して活性化したT細胞と同患者末梢血から分離したＢ細胞を培養し、IgE産生を次回検討する予定です。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
手術により採取したアトピー型と非アトピー型鼻茸とアレルギー性鼻炎鼻粘膜織中におけるCD4+,CD8+,CD45RO, CD4+CD25+,Treg 細胞 (FOXP3),好酸球 を免疫組織学的に検討して結果は順調にでています。アトピー型と非アトピー鼻茸組織中におけるIL-4, IL-5, IL-13, IL-10, IFN-gamma、IgE をELISAにて検討して結果は順調にでています。
アトピー型と非アトピー型鼻茸組織中おける好酸球やIgEとCD4+,CD8+,CD45RO, CD4+CD25+,Treg 細胞 (FOXP3)の関連性を検討して結果は順調にでています。
サンプル数が足りなかった為、CD4+, Treg 細胞とIL-4, IL-10, IFN-gammaを免疫組織学的に二重染色しましたが、フローサイトメトリ(FACS)はまだ実施出来ていません。アトピー型と非アトピー鼻茸からT細胞を分離しStaphylococcal enterotoxin A、Bで刺激して活性化したT細胞と同患者末梢血から分離したＢ細胞を培養し、IgE産生を検討はまだ実施出来ていません。
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| 今後の研究の推進方策 |
H24に実施出来なかったCD4+, Treg 細胞とIL-4, IL-10, IFN-gammaを、フローサイトメトリ(FACS)にて検討する予定です。同様にアトピー型と非アトピー鼻茸からT細胞を分離しStaphylococcal enterotoxin A、Bで刺激して活性化したT細胞と同患者末梢血から分離したＢ細胞を培養し、IgE産生を検討する予定です。
H25の分としてアトピー型と非アトピー型鼻茸組織をexplant cultureし、ダニ抗原で刺激し鼻茸組織中におけるCD4+,CD8+,CD45RO, CD4+CD25+,Treg 細胞 (FOXP3),Th17細胞 を免疫組織学的に検討する。アトピー型と非アトピー型鼻茸組織をexplant cultureし、ダニ抗原で刺激し鼻茸組織中のIL-4, IL-5, IL-13, IL-10, IL-17, IFN-gamma をELISAにて検討する。
アトピー型と非アトピー鼻茸組織をexplant cultureし、Staphylococcal enterotoxin A、Bを加え、アトピー型と非アトピー鼻茸組織中におけるCD4+,CD8+,CD45RO, CD4+CD25+,Treg 細胞 (FOXP3),Th17細胞 を免疫組織学的に検討する。
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| 次年度の研究費の使用計画 |
免疫染色: \200,000 フローサイトメトリ関係: \400,000
抗体 .リコンビナント: \300,000培養関係: \100,000
ELISA kit: \100,000SAE, Allergen: \100,000
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