極性の変化による網膜色素上皮の環境制御に関する研究

2014 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 24592634
• 研究機関: 鹿児島大学
• 研究代表者: 園田 祥三 鹿児島大学, 鹿児島大学・医歯(薬)学総合研究科・助教, 助教 (20325806)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2015-03-31
• キーワード: 網膜色素上皮細胞 / 極性細胞 / 細胞培養

研究実績の概要

網膜色素上皮細胞 (RPE)は眼内の恒常性を保つために重要な役割を担っている。網膜疾患の病態を解明すべく、RPE培養細胞を用いた研究が行われているが、従前は生体RPEがもつバリア機能、細胞間接着装置、物質輸送能などを持たない細胞 (細胞極性を持たない細胞)を用いられており、生体の環境を厳密に反映しているとはいえない。我々は、ブタ細胞をtranswell上に培養し、安定的に極性を持つRPE培養法を確立し実験を行った。本研究で、極性RPEを用いた実験では､極性の有無によってTNFaやトロンビンなどに対する反応が異なることを見いだしている。従来の細胞ではTNFa刺激によりVEGF分泌は亢進していたが、極性細胞では逆の結果が得られた。トロンビン刺激ではKi-67の発現が極性細胞ではほとんど認められなかった。極性細胞有無による様々な細胞刺激の違いを初めて示すことができ、この反応の違いがより正確に病態を理解する事につながると考えらる。すなわち、正常および病初期においては、RPE細胞は極性を有しており、病期の進行にともに細胞障害が進み、同時に極性が失われてゆくと考えられる。RPEのような極性を有する細胞においては、極性の有無を考慮する必要があることを初めて示すことができた。
また、我々は細胞指向性を持つあらたなPEGリポソーム､眼内挿入可能な超小型の超音波プローブ開発をおこなった。本研究では、25Gサイズのプローブを用いて、網膜へのGFP遺伝子導入を行った。

研究成果

• [雑誌論文] Different Effects of Thrombin on VEGF Secretion, Proliferation, and Permeability in Polarized and Non-polarized Retinal Pigment Epithelial Cells. (2015)
  • 著者名/発表者名: Terasaki H, Shirasawa M, Otsuka H, Yamashita T, Uchino E, Hisatomi T, Sonoda S, Sakamoto T.
  • 雑誌名: Curr Eye Res 巻: 印刷中 ページ: 印刷中
  • DOI: NA
  • 査読あり
• [雑誌論文] PENETRATION OF BEVACIZUMAB AND RANIBIZUMAB THROUGH RETINAL PIGMENT EPITHELIAL LAYER IN VITRO. (2015)
  • 著者名/発表者名: Terasaki H, Sakamoto T, Shirasawa M, Yoshihara N, Otsuka H, Sonoda S, Hisatomi T, Ishibashi T.
  • 雑誌名: retina 巻: 35 ページ: 1007-1015
  • DOI: NA
  • 査読あり
• [雑誌論文] Luminal and Stromal Areas of Choroid Determined by Binarization Method of Optical Coherence Tomographic Images. (2015)
  • 著者名/発表者名: Sonoda S, Sakamoto T, Yamashita T, Uchino E, Kawano H, Yoshihara N, Terasaki H, Shirasawa M, Tomita M, Ishibashi T.
  • 雑誌名: Am J Ophthalmol 巻: 15 ページ: 1123-1131
  • DOI: 10.1016
  • 査読あり
• [雑誌論文] Choroidal structure in normal eyes and after photodynamic therapy determined by binarization of optical coherence tomographic images. (2014)
  • 著者名/発表者名: Sonoda S, Sakamoto T, Yamashita T, Shirasawa M, Uchino E, Terasaki H, Tomita M.
  • 雑誌名: Invest Ophthalmol Vis Sci 巻: 55 ページ: 3893-3899
  • DOI: 10.1167
  • 査読あり
• [学会発表] 網膜干渉断層計における正常人の脈絡膜血管構造の解析 (2014)
  • 著者名/発表者名: 園田祥三
  • 学会等名: 第31回日本眼循環学会
  • 発表場所: 大阪、大阪国際会議場
  • 年月日: 2014-11-28 – 2014-11-30
• [学会発表] 光干渉断層計における脈絡膜血管構造の解析 (2014)
  • 著者名/発表者名: 園田祥三
  • 学会等名: 第68回日本臨床眼科学会
  • 発表場所: 神戸、神戸国際展示場
  • 年月日: 2014-11-13 – 2014-11-16