2012 年度実施状況報告書

重度外傷・熱傷患者における免疫学的モニタリングによる臓器不全発症の予知

研究課題

研究課題/領域番号	24592748
研究種目	基盤研究(C)
研究機関	慶應義塾大学
研究代表者	関根和彦慶應義塾大学, 医学部, 研究員 (90296715)
研究期間 (年度)	2012-04-01 – 2015-03-31
キーワード	外傷 / 熱傷 / 免疫 / 白血球 / 臓器不全
研究概要	【背景と目的】重度外傷・熱傷患者は、感染症が契機となって多臓器不全で死亡することが多い。われわれは免疫能評価のために白血球表面抗原における網羅的解析(immunophenotyping: IP)の方法を開発し、外傷・熱傷患者における感染症による病態悪化の予測できる可能性を示した。本課題の目的は、熱傷・外傷患者のIPと臓器不全発症との関連性を明らかにすることである。【対象患者】重度の外傷・熱傷により集中治療室での入院加療を要した患者【IP解析法】PEG処理スライドガラスに、解析予定の白血球表面抗原に対する抗体をアレイ状に並べた基盤を作成した。対象患者から採取した赤血球除去白血球液を基板上で incubation後、基板上に微細定常波を作ることができる専用チェンバーを用いて基盤を洗浄処理し、アレイ上に残った白血球を光学顕微鏡下に定量解析した。【アレイに使用した抗体】CD4, CD8, CD11c, CD25, CD16b, CD25, CD36, CD45, CD66b, C-C Chemokine receptor (CCR)2, CCR4, CCR5, CXC chemokine receptor (CXCR)3, CRth2, Toll like receptor (TLR) 2【検討項目】 IP解析と臓器不全との関連性における基礎的検討を行った。【結果と考察】健常人3人および熱傷・外傷患者5人に対して、本法によるIP解析を計10回施行した。熱傷・外傷患者においては、うち3人が感染症を発症し、うち2人が多臓器不全に進展した。多臓器不全を合併した患者では、各種CD抗原においてCCR5とCCR4が非合併患者や健常人の対照群よりもやや高い発現を示した。今後はさらに網羅的IP解析を行い、臓器不全発症をはじめとした臨床経過との詳細な比較を行う予定である。
現在までの達成度 (区分)	現在までの達成度 (区分) 2: おおむね順調に進展している理由健常人および対象患者からの検体を用いたIP解析検査は順調に行われている。今後はさらに検体を集積し、データ解析を進める予定である。
今後の研究の推進方策	対象患者を複数の施設から集積する予定とし、さらなる解析の集積を行う。IP解析により臓器不全に関して有用なphenotypic changeが観測できれば、これらを用いて臓器不全の予測に役立てられるかどうかを検討する。
次年度の研究費の使用計画	本年度研究資金の残額が生じたのは、効率的な資材の調達等によるものである。残額は次年度の消耗品購入に充て、予定された患者・検体数以上の解析を行う予定である。次年度においても、研究計画に沿って研究を進め、解析に必要な消耗品等を中心に研究費を使用する予定としている。また得られた結果の公表のため、各種学会や研究会での口頭発表や、各種学術雑誌での誌上発表を行う予定である。