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2014 年度 実績報告書

歯髄炎の病態形成における象牙芽細胞の細菌侵襲に対する免疫機構の解明

研究課題

研究課題/領域番号 24592870
研究機関徳島大学

研究代表者

高橋 加奈子  徳島大学, 大学病院, 特任講師 (80403715)

研究分担者 湯本 浩通  徳島大学, 大学病院, 講師 (60284303)
平尾 功治  徳島大学, 大学病院, 助教 (00581399)
研究期間 (年度) 2012-04-01 – 2015-03-31
キーワード歯髄炎 / 象牙芽細胞 / 免疫応答
研究実績の概要

本研究は歯髄炎の病態成立における生体防御機構において、象牙芽細胞を主役とした自然免疫機構を解明しようとするものである。
ラット由来の株化細胞で象牙芽細胞の特性を有したKN-3細胞を使用し、Pattern Recognition Receptor(PRR)特異的リガンド(TLR-2; Pam3CSK4, TLR-4; E. coli LPS)あるいは炎症性サイトカイン(IL-1β, TNF-α, IFN-γ)にて一定時間刺激した。刺激を受けたKN-3細胞における培養上清中へのAlarmin(HMGB1)の産生・放出をWestern blot法にて解析した。その結果、各刺激物質により刺激後24時間で培養上清中にHMGB1の放出が認められた。また、このHMGB1の放出をELISA法にて定量したところ、HMGB1の放出は全ての刺激物質において認められたが、コントロールと比較して各刺激物質との間に有意差は認められなかった。しかしながらカテキン(EGCG)を添加することによってこれらのHMGB1放出は抑制された。
また、KN-3におけるPRRの発現をFACSにて解析したところ、細胞内レセプターであるNOD1およびNOD2の発現を認めた。しかしながらTLR-2, TLR-4の発現はほとんど認められなかった。次にこれらのレセプターのリガンドやTNF-αでKN-3を刺激し培養上清を回収し抗体アレイ法やELISA法にて解析したところ、TNF-αやNOD1リガンドであるiE-DAP刺激において培養上清中のMCP-1, CCL20, CXCL3濃度の上昇が認められた。また、各リガンドで刺激したKN-3からtotal RNAを回収しreal-time PCR法にて解析したところ、iE-DAP刺激において上記サイトカインのmRNA発現の増加が認められた。

  • 研究成果

    (4件)

すべて 2015 2014

すべて 雑誌論文 (2件) (うち査読あり 2件、 オープンアクセス 1件、 謝辞記載あり 2件) 学会発表 (2件)

  • [雑誌論文] Electromagnetic wave irradiation promotes osteoblastic cell proliferation and up-regulates growth factor via activation of the ERK1/2 and p38 MAPK pathways2015

    • 著者名/発表者名
      Yumoto H, Hirao K, Tominaga T, Bando N, Takahashi K, Matsuo T
    • 雑誌名

      Cellular Physiology and Biochemistry

      巻: 35 ページ: 601-605

    • DOI

      10. 1159/000369722

    • 査読あり / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] Modulatory roles of interferon-γ through indoleamine 2, 3-dioxygenase induction in innate immune response of dental pulp cells2014

    • 著者名/発表者名
      Takegawa D, Nakanishi T, Hirao K, Yumoto H, Takahashi K, Matsuo T
    • 雑誌名

      Journal of Endodontics

      巻: 40 ページ: 1382-1387

    • DOI

      10. 1016/j.jopen. 2014. 03. 018

    • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
  • [学会発表] イグサ抽出液のオーラルヘルスケア製品への応用に関する研究2014

    • 著者名/発表者名
      細川由樹, 湯本浩通, 平尾功治, 高橋加奈子, 松尾敬志
    • 学会等名
      第141回 日本歯科保存学会
    • 発表場所
      山形県山形市 山形テルサ
    • 年月日
      2014-10-30 – 2014-10-31
  • [学会発表] ラット象牙芽細胞様細胞(KN3)における細菌関連病原因子刺激に対する自然免疫反応の解析2014

    • 著者名/発表者名
      平尾功治, 湯本浩通, 中西正, 篠原千尋, 高橋加奈子, 武川大輔, 細川由樹, 松尾敬志
    • 学会等名
      第140回 日本歯科保存学会
    • 発表場所
      滋賀県立芸術劇場びわ湖ホール(滋賀県大津市)
    • 年月日
      2014-06-19 – 2014-06-20

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公開日: 2016-06-01  

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