分子標的治療薬ｍＴＯＲ阻害剤と放射線を併用した新たな口腔癌治療開発の基礎的研究

2012 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 24593025
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 研究機関: 長崎大学
• 研究代表者: 飛田 尚慶 長崎大学, 大学病院, 講師 (00336174)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2015-03-31
• キーワード: mTOR / 口腔癌細胞 / 増殖抑制

研究概要

【研究目的】
3種類の扁平上皮癌株：①口腔癌本体由来株; ②肺転移由来株; ③シスプラチン耐性株それぞれを培養し、70%コンフルエントに増殖した時点でmTOR阻害剤のRAD001, Torin 1を培地内に添加し、両薬剤の癌細胞に対する抗腫瘍効果を比較・検討することである。
【実験結果】
#1 各阻害剤の50%細胞抑制濃度(50IC)測定: まずHela(扁平上皮癌各)細胞に対する2剤の50%細胞抑制濃度(50IC)を検討した。32Pラベル化したATPとPI3Kキナーゼアッセイ法を使用して測定した。方法は、RAD001, Torin 1を無血清のDMEM培地に溶解した後70%コンフルエントまで培養し、液体シンチレーションカウンターで測定した。結果はRAD001での50ICは25nMであり、Torin1の50ICは1.5μMであった。現在肺転移由来細胞とシスプラチン由来細胞に関して同様の実験を進めている。
#2 扁平上皮癌細胞の増殖能力およびViabilityの検討: Hela細胞が70%コンフルエントになった時点で、RAD001, Torin 1 の50IC濃度を培地に添加し、増殖抑制効果をMTT法により検討した。結果はRAD001の50IC濃度では40%まで増殖能力が抑制された。また、Torin 1では20%まで増殖能抑制効果が認められた。

現在までの達成度 (区分)

4: 遅れている

理由

本年度は施設の移動があり、研究環境が全く異なったため、実験環境を再構築する必要があった。そのために、環境を整えるための時間に多く取られ、研究遂行に遅延が生じた。

今後の研究の推進方策

本年度は昨年度に遂行出来なかった事を上半期までに終わらせる事を第一に行う。同時に本年度の実験計画に基づいた基礎データを収集することも平行して行い、年末までには当初の実験計画に沿った所まで到達出来る様な計画を立てる。

次年度の研究費の使用計画

昨年度実行出来なかった転移株および抗癌剤耐性株の細胞を入手、2種類のmTOR阻害剤での50%細胞増殖抑制濃度をPI3Kキナーゼアッセイで測定することと、PI3K/Aktの阻害効果を確認することに、今年度の配当予算を重点的に当てる。また、最新情報を積極的に収集するために、旅費の配分をやや多めにする予定である。

研究成果

• [雑誌論文] Spontaneous eruption of involved second molar in unicystic ameloblastoma of the mandible after marsupialization followed by enucleation: a case report. (2012)
  • 著者名/発表者名: Sano K, Yoshimura H, Tobita T, Kimura S, Imamura Y.
  • 雑誌名: J Oral Maxillofac Surg. 巻: 71 ページ: 66-71
  • DOI: 10.1016/j.joms.2012.04.014
  • 査読あり
• [雑誌論文] Gustatory sweating in the submandibular region following neck dissection: a case with thermographic evaluation and review of the literature. (2012)
  • 著者名/発表者名: Yoshimura H, Tobita T, Kumakiri M, Sano K.
  • 雑誌名: J Oral Maxillofac Surg. 巻: 70 ページ: 667-673
  • DOI: 10.1016/j.joms.2012.06.179
  • 査読あり
• [雑誌論文] Applicability of buccal fat pad grafting for oral reconstruction. (2012)
  • 著者名/発表者名: Toshihiro Y, Nariai Y, Takamura Y, Yoshimura H, Tobita T, Yoshino A, Tatsumi H, Tsunematsu K, Ohba S, Kondo S, Yanai C, Ishibashi H, Sekine J.
  • 雑誌名: Int J Oral Maxillofac Surg. 巻: 42 ページ: 640-610
  • DOI: 10.1016/j.ijom.2012.07.009
  • 査読あり
• [雑誌論文] Metachronous manifestation of carcinoma ex pleomorphic adenoma in a buccal minor salivary gland and the contralateral parotid gland: a case report and review of the literature. (2012)
  • 著者名/発表者名: Sano K, Fujita S, Sekine J, Uehara M, Sakihama N, Hayashi T, Yoshimura H, Tobita T.
  • 雑誌名: J Oral Maxillofac Surg. 巻: 70 ページ: 2701-2712
  • DOI: 10.1016/j.joms.2011.12.016.