Ｙ‐ボックス結合蛋白‐１（ＹＢ－１）を標的としたがん克服への新しい取組み

2012 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 24650646
• 研究機関: 九州大学
• 研究代表者: 桑野 信彦 九州大学, 薬学研究科(研究院), その他 (80037431)
• 研究分担者: 小田 義直 九州大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (70291515)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2014-03-31
• キーワード: YB-1タンパク質 / 分子生物学 / 増殖因子受容体 / HER2/ErbB2 / 分子標的治療薬 / ラパチニブ / がん治療適正化 / 免疫組織解析

研究概要

Y-ボックス結合蛋白質-1（YB-1）/dbpBは転写だけでなくDNA障害修復、ゲノム安定化RNA安定化など多様な制御を示すコールドショックドメインを持つ原始的な蛋白分子である。我々はがん細胞の多剤耐性を担うABCトランスポーターであるP-糖蛋白質/ABCB1/MDR1の制御因子であることを1994年に明らかにした。以来YB-1のがん細胞の悪性進展への関与について、現在まで研究を継続してきている。
本研究ではYB-1ががん細胞の増殖や分子標的薬の感受性に関与するか否か、さらにがん患者の治療適正化への臨床的意義について明らかにしようとしている。近年胃がんに対する分子標的治療としてHER2/erbB2標的薬ハーセプチン（Trastuzumab）の有効性が報告され注目を集めている。我々は今回胃がん細胞でYB-1によるHER2発現と分子標的薬の感受性の制御について以下の研究成果を得た。
1．胃がん細胞のYB-1をsiRNAによりノックダウンすると、EGFRファミリー蛋白質の中でHER2発現をより特異的に蛋白質mRNAレベルで抑制した。2．YB-1ノックダウンによりEGFRファミリーの中でEGFRとHER2を標的とするチロシンキナーゼ阻害剤Lapatinibの感受性が著明に低下した。3．胃癌の外科切除標本を対象にした免疫組織学解析によりYB-1の核内局在がHER2発現と有意に相関することが観察された。
以上の結果から、YB-1-HER2経路は胃がんのHER2発現と分子標的治療適正化のために有用なバイオマーカーとなることを期待している。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

本研究の目的はYB-1とその制御遺伝子群を標的としたがん治療研究を発展させることである。そのためにYB-1を標的とすることにより、1.耐性がんの克服、2．がんの増大・転移の抑制および、3．新しい治療創出について基盤づくりを行うことを計画した。
現在までに我々は、YB-1を標的とすることにより、ヒト胃がん細胞でEGFRファミリー遺伝子群の中で特異的にHER2発現を制御すること、さらに、HER2やEGFRを標的とする分子標的薬LapatinibやErlotinibの感受性をYB-1が著明に変化させることを見出した。さらに胃がん患者において、がん部位のがん細胞のYB-1核内局在がHER2発現と有意（P=0.026）に相関することが観察された。以上の結果は本研究の目標とする、耐性がんの克服と新しい治療創出に向けて貢献することが大きいと期待される。
YB-1によるHER2遺伝子発現の制御に関する胃がん細胞における現在の研究成果は、これまで報告してきた乳がんや肺がん細胞を対象とした、基礎及び臨床研究の成果とよく一致する。このことは広く様々な癌においてYB-1がEGFRファミリー遺伝子の中でもHER2を制御していることを支持している。その分子メカニズムに関しては、既に構築しているYB-1の発現誘導Tet-Onシステムを用いて検討を進めつつある。他方、乳がんや胃がん細胞においてHER2遺伝子増幅にYB-1が関与し、がんの悪性進展に関与するか否かについても仕事を進めている。

今後の研究の推進方策

我々は当初の計画に沿って本年度の研究成果を更に発展させるとともに、以下のことをさらに推進させて本研究を達成させていきたい。すなわち、
1．YB-1のHER2やDNA合成関連のcdc6遺伝子の発現を制御する分子メカニズムを明らかにする。そのために胃がんや乳がんその他のがん細胞を対象にYB-1の発現誘導Tet-Onシステムを構築したので、HER2やcdc6遺伝子の発現様式とがん細胞の特異性の有無を検討していく。2．YB-1の発現が甲状腺癌の悪性度や分化度と相関するか否かを、YB-1のファミリーの一つdbpCの発現と対比しながら免疫組織学的解析を進めていく。3．YB-1は乳がんのオンコジンであり、ゲノムの安定性の鍵を握っていることが知られている。またHER2の遺伝子増幅は乳がんで広く観察され、乳がんの予後因子であると考えられている。我々は、HER2遺伝子増幅にYB-1の発現が関与しているか否かを、乳がんや胃がんのがん組織を対象にFISH法や免疫組織染色法で解析を進めていく。4．YB-1の発現誘導システムを用いて、がん細胞の増殖や転移に対するYB-1の効果を明らかにする。と同時に動物治療実験系で、YB-1のがん増大や転移への治療効果について明らかにする。

次年度の研究費の使用計画

該当なし

研究成果

• [雑誌論文] Y-box binding protein-1 (YB-1) contributes to both HER2/ErbB2 expression and lapatinib sensitivity in human gastric cancer cells. (2013)
  • 著者名/発表者名: Shibata, T., Kan, H., Murakami, Y., Ureshino, H., Watari, K., Kawahara, A., Kage, M., Hattori, S., Ono, M., and Kuwano, M.
  • 雑誌名: Molec. Cancer Therapeut. 巻: 12 ページ: 737-746
  • DOI: 10.1158/1535-7163.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Sorting nexin 2-mediated membrane trafficking of c-Met contributes to sensitivity of molecular targeted drugs. (2013)
  • 著者名/発表者名: Ogi, S., Fujita, H., Kashihara, M., Yamamoto, C., Sonoda, K., Okamoto, I., Nakagawa, K., Ohdo, S., Tanaka, Y., Kuwano, M., Ono, M.
  • 雑誌名: Cancer Sci. 巻: 104 ページ: inpress
  • DOI: 10.1111/cas.12117.
  • 査読あり
• [雑誌論文] The antitumor effect of a novel angiogenesis inhibitor (an octahydronaphthalene derivative) targeting both VEGF receptor and NF-kB pathway (2012)
  • 著者名/発表者名: Watari, K., Nakamura, M., Fukunaga, Y., Furuno, A., Shibata, T., Kawahara, A., Hosoi, F., Kuwano, T., Kuwano, M., and Ono, M.
  • 雑誌名: Int. J.Cancer 巻: 131 ページ: 310-321
  • DOI: 10.1002/ijc.26356
• [雑誌論文] Association of the expression of mutant epidermal growth factor receptor protein as determined with mutation-specific antibodies in non-small cell lung cancer with progression-free survival after gefitinib treatment. (2012)
  • 著者名/発表者名: Azuma, K., Okamoto, I., Kawahara, A., Taira, T., Nakashima, K., Hattori, S., Kinoshita, T., Takeda, M., Nakagawa, K., Takamori, S., Kuwano, M., Ono, M., Kage, M.
  • 雑誌名: J.Thorac. Oncol. 巻: 7 ページ: 122-127
  • DOI: 10.1097/JTO.0b013e31822eeba2.
  • 査読あり
• [雑誌論文] NDRG1/Cap43/Drg-1 may predict tumor angiogenesis and poor outcome in patients with lung cancer. (2012)
  • 著者名/発表者名: Azuma,K., Kawahara,A., Hattori,S., Taira,T., Tsurutani,J., Watari,K., Shibata,T., Murakami,Y., Takamori,S., Ono,M., Izumi,H., Kage,M., Yanagawa,T., Nakagawa,K., Hoshino,T., Kuwano,M.
  • 雑誌名: J. Thorac. Oncol. 巻: 7 ページ: 779-789
  • DOI: 10.1097/JTO.0b013e31824c92b4.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Loss of activating EGFR mutant gene contributes to acquired resistance to EGFR tyrosine kinase inhibitors in lung cancer cells. (2012)
  • 著者名/発表者名: Tabara,K., Kanda,R., Sonoda,K., Kubo,T., Murakami,Y., Kawahara,A., Azuma,K., Abe,H., Kage,M., Yoshinaga,A., Tahira,T., Hayashi,K., Arao,T., Nishio,K., Rosell,R., Kuwano,M., Ono,M.
  • 雑誌名: PLoS ONE 巻: 7 ページ: e41017
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0041017.
  • 査読あり
• [雑誌論文] N-myc downstream regulated gene 1 (NDRG1) promotes metastasis of human scirrhous gastric cancer cells through epithelial mesenchymal transition. (2012)
  • 著者名/発表者名: Ureshino, H., Murakami, Y., Watari, K., Izumi, H., Kawahara, A., Kage, M., Arao, T., Nishio, K., Yanagihara, K., Kinoshita, H., Kuwano, M., Ono, M.
  • 雑誌名: PLoS ONE 巻: 7 ページ: e41312
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0041312.
  • 査読あり
• [学会発表] Y-box結合タンパク-1(YB-1)はヒト胃癌においてHER2/ErbB2発現とラパチニブの感受性を制御する. (2013)
  • 著者名/発表者名: 柴田智博、菅仁史、村上雄一、渡公佑、河原明彦、鹿毛政義、和泉弘人、桑野信彦、小野眞弓．
  • 学会等名: 第17回日本がん分子標的治療学会学術集会
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 20130612-20130614
• [学会発表] Interleukin-1 （IL-1）と下流シグナル活性化による肺癌のリンパ節転移亢進の機序と制御―Interleukin 1 promotes lymph node metastasis by lung cancer cells through modification of tumor stromal cells (2012)
  • 著者名/発表者名: 柴田智博、渡 公佑、河原明彦、村上雄一、鍋島弘嗣、東 公一、鹿毛政義、向田直史、桑野信彦、高橋 隆、小野眞弓．
  • 学会等名: 第71回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 北海道
  • 年月日: 20120921-20120921
• [学会発表] 肺癌の活性化EGFR標的薬剤に対する新規耐性獲得メカニズム―A novel mechanism for acquired resistance to EGFR-TKI in human lung cancer: loss of activating mutant EGFR gene allele (2012)
  • 著者名/発表者名: 神田利奈、村上雄一、河原明彦、東 公一、鹿毛政義、田平知子、桑野信彦、小野眞弓．
  • 学会等名: 第71回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 北海道
  • 年月日: 20120921-20120921
• [学会発表] JSMO10周年記念企画 わが国における臨床腫瘍学の歩みと今後の展望 ～JSMOの歴史と展望～：２）JSMO設立後10年の歩み：学術集会 (2012)
  • 著者名/発表者名: 桑野信彦．
  • 学会等名: 第10回日本臨床腫瘍学会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 20120726-20120726
  • 招待講演
• [学会発表] N-myc downstream regulated gene-1 （NDRG1）はがん血管新生に重要な役割をはたす―NDRG1-deficient mice exhibit suppression of tumor angiogenesis and macrophage infiltration (2012)
  • 著者名/発表者名: 渡 公佑、柴田智博、村上雄一、桑野信彦、小野眞弓．
  • 学会等名: 第21回日本がん転移学会学術集会・総会
  • 発表場所: 広島
  • 年月日: 20120712-20120712
• [学会発表] ヒト肝細胞癌の悪性進展への上皮間葉系転換（EMT）の関与と新しい治療標的分子の探索 (2012)
  • 著者名/発表者名: 野田正樹、渡 公佑、村上雄一、和泉弘人、荒尾徳三、西尾和人、桑野信彦、小野眞弓．
  • 学会等名: 第16回（平成24年度）日本がん分子標的治療学会学術集会
  • 発表場所: 福岡
  • 年月日: 20120628-20120628
• [学会発表] N-myc downstream regulated gene-1（NDRG1）はがん血管新生に重要な役割をはたす (2012)
  • 著者名/発表者名: 渡 公佑、柴田智博、河原明彦、村上雄一、鹿毛政義、桑野信彦、小野眞弓．
  • 学会等名: 第16回（平成24年度）日本がん分子標的治療学会学術集会
  • 発表場所: 福岡
  • 年月日: 20120628-20120628
• [学会発表] Sorting nexin 2 (SNX2) controls drug sensitivity to molecular targeted anticancer agents through membrane trafficking of c-Met protein in cancer cell. (2012)
  • 著者名/発表者名: Mayumi Ono, Sayaka Ogi, Chizuko Yamamoto, Hideaki Fujita, Michihiko Kuwano.
  • 学会等名: AACR Annual Meeting 2012
  • 発表場所: アメリカ シカゴ
  • 年月日: 20120401-20120404
• [学会発表] NDRG1は胃癌の血管新生をIL-1/AP-1を介して促進する―NDRG1 promotes tumor angiogenesis through interleukin-1 (IL-1)/AP-1 activation pathway in human gastric cancer cells (2012)
  • 著者名/発表者名: 村上雄一、渡公佑、嬉野浩樹、河原明彦、鹿毛政義、桑野信彦、小野眞弓
  • 学会等名: 第71回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 北海道
  • 年月日: 2012-09-20