| 研究課題/領域番号 |
24651061
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| 研究機関 | 広島大学 |
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研究代表者 |
古武 弥一郎 広島大学, 大学院医歯薬保健学研究院, 准教授 (20335649)
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| 研究期間 (年度) |
2012-04-01 – 2014-03-31
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| キーワード | チューブリン / 環境化学物質 / ユビキチン化阻害 |
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| 研究概要 |
細胞骨格タンパク質であるチューブリンは重合して微小管を構成し、物質輸送等の細胞にとって不可欠な役割を果たしている。しかし従来、チューブリンに作用し毒性発現する環境化学物質は、重合・脱重合を直接阻害する物質を除いて見出されていなかった。ところが近年我々は、環境中に存在する特定の化学物質がチューブリンに結合することによりそのユビキチン化が阻害され、毒性に繋がる可能性を明らかにした。そこで本研究では、環境化学物質の毒性標的としてチューブリンに着目し、チューブリンを毒性ターゲットとする化学物質を同定することにより、化学物質のリスク評価を行うことを目的とする。
チューブリンのユビキチン化阻害を引き起こす化学物質のひとつとして、パーキンソン病関連神経毒性物質MPP+を見出している。本年度は、MPP+がチュブリンのユビキチン化阻害を起こす比較的低濃度 (10 microM) において、その後どのような過程を経て細胞がダメージを受けるのか検証を行った。
SH-SY5Y細胞に10 microM MPP+を曝露し続けると、1週間後に約40%の生存率低下が認められた。この緩慢な細胞死の際に何が起きているのかを詳細に調べたところ、細胞死が認められないMPP+添加開始48時間後に、オートファゴソームのマーカータンパク質であるLC3-II発現の増加が認められた。オートファジーフラックスアッセイを行った結果、オートファゴソームの分解が阻害されていることが示唆され、低濃度MPP+はオートファジーを阻害することが明らかとなった。
来年度はこのオートファジー阻害とユビキチン化阻害、およびその細胞輸送への影響について調べる予定である。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
新しい興味深い知見は得られたものの、本来の目的であるチューブリンを介した毒性メカニズムの解明は進展していないため。
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| 今後の研究の推進方策 |
チューブリンのユビキチン化阻害が引き起こす細胞輸送の異常について、ライブイメージング等を用いて明らかにする予定である。
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| 次年度の研究費の使用計画 |
主として実験に用いる蛍光色素、顕微鏡使用料等に充てる。
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