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分化や疾患など生命現象に関わる遺伝子群を網羅的に同定することは、生命現象のメカニズムの解明や疾患の新たな治療法を開発する上で非常に重要である。そのような遺伝子を網羅的に同定する手法の開発のために、本年度ではまず、ポジティブコントロールとして作用を示す、特定の遺伝子発現を制御できるサンプルの作製を行った。このサンプルを用いることにより、どれくらいの濃度で存在すれば、その機能を発揮できるかについての重要な情報を得ることができる。まず、その遺伝子を特異的に認識し発現調節が可能な候補サンプル４種類をデザインし、化学合成したフラグメントを出発物質として、それぞれのサンプルを３ステップで作製した。さらに、標的遺伝子発現を定量的にモニターできる系の構築も行った。最終的に得られた４種類のサンプルを個別に、モニター系と同時に動物細胞に導入した。１日以上において経時的に細胞を回収し、細胞抽出液を調製した。各々の細胞抽出液中の標的遺伝子の発現量を酵素的に定量したところ、すべてのサンプルで有意な遺伝子発現が見られ、特に一つのサンプルで、動物細胞への導入後３日培養して得られた抽出液において、顕著な標的遺伝子の発現が見られた。同じ実験を複数回繰り返し、この結果の再現性を確認することができた。さらに効果的な遺伝子発現を達成するために、さらなる５種類のサンプルをデザインし、それらの作製を行った。現在最後のステップを実施中で、完成次第遺伝子発現調節能を評価する予定である。
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