機能性膜タンパク質の新規分泌生産システムの開発

2013 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 24656505
• 研究種目: 挑戦的萌芽研究
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 生物機能・バイオプロセス
• 研究機関: 神戸大学
• 研究代表者: 山地 秀樹 神戸大学, 工学(系)研究科(研究院), 教授 (40283874)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2014-03-31
• キーワード: 昆虫細胞 / 組み換えタンパク質生産 / 膜タンパク質

研究概要

Bacteriorhodopsinの遺伝子を昆虫細胞用の高発現型プラスミドベクターにクローニングし，昆虫細胞High Fiveにトランスフェクションして培養後の細胞抽出液および細胞膜画分をウェスタンブロット法で分析したところ，細胞内および膜画分にbacteriorhodopsinが発現していることを確認した．日本脳炎ウイルスの表面タンパク質であるprMおよびEの遺伝子が導入され，日本脳炎ウイルス様粒子を分泌生産する組み換え昆虫細胞株に，上記の発現ベクターをトランスフェクションし共発現させることにより，bacteriorhodopsinが組み込まれたウイルス様粒子の分泌発現の検討を進めている．

研究成果

• [雑誌論文] Suitability and perspectives on using recombinant insect cells for the production of virus-like particles (2014)
  • 著者名/発表者名: Hideki Yamaji
  • 雑誌名: Applied Microbiology and Biotechnology 巻: 98 ページ: 1963–1970
  • DOI: 10.1007/s00253-013-5474-9
  • 査読あり
• [雑誌論文] Production of Japanese encephalitis virus-like particles in insect cells (2013)
  • 著者名/発表者名: Hideki Yamaji, Eiji Konishi
  • 雑誌名: Bioengineered 巻: 4 ページ: 438–442
  • DOI: 10.4161/bioe.24514
  • 査読あり
• [雑誌論文] Efficient production of Japanese encephalitis virus-like particles by recombinant lepidopteran insect cells (2013)
  • 著者名/発表者名: Hideki Yamaji, Masataka Nakamura, Miwa Kuwahara, Yusuke Takahashi, Tomohisa Katsuda, Eiji Konishi
  • 雑誌名: Applied Microbiology and Biotechnology 巻: 97 ページ: 1071-1079
  • DOI: 10.1007/s00253-012-4371-y
  • 査読あり
• [雑誌論文] Production of Japanese encephalitis virus-like particles using the baculovirus–insect cell system (2012)
  • 著者名/発表者名: Hideki Yamaji, Maiko Segawa, Masataka Nakamura, Tomohisa Katsuda, Miwa Kuwahara, Eiji Konishi
  • 雑誌名: Journal of Bioscience and Bioengineering 巻: 114 ページ: 657–662
  • DOI: 10.1016/j.jbiosc.2012.06.012
  • 査読あり
• [雑誌論文] 昆虫細胞を用いたウイルス様粒子の生産 (2012)
  • 著者名/発表者名: 山地秀樹
  • 雑誌名: PHARM TECH JAPAN 巻: 28 ページ: 2503-2508
  • URL: http://www.jiho.co.jp/shop/list/detail/tabid/272/catid/75/pdid/92354/Default.aspx
• [学会発表] Efficient production of viral envelope proteins in recombinant insect cells (2013)
  • 著者名/発表者名: Hideki Yamaji, Miwa Kuwahara, Eiji Konishi
  • 学会等名: 23rd ESACT (European Society for Animal Cell Technology) Meeting
  • 発表場所: Lille, France
  • 年月日: 2013-06-24
• [学会発表] Production and purification of Japanese encephalitis virus-like particles from recombinant insect cells (2012)
  • 著者名/発表者名: Yuri Hotta, Azusa Minamitani, Kazuma Narita, Tomohisa Katsuda, Hideki Yamaji
  • 学会等名: The 25th Annual and International Meeting of the Japanese Association for Animal Cell Technology (JAACT2012)
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 2012-11-30
• [学会発表] Secretory production of virus-like particles by recombinant insect cells (2012)
  • 著者名/発表者名: Hideki Yamaji, Miwa Kuwahara, Eiji Konishi
  • 学会等名: The 15th European Congress on Biotechnology of the European Federation of Biotechnology (ECB15)
  • 発表場所: Istanbul, Turkey
  • 年月日: 2012-09-26