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2012 年度 実績報告書

クライオトモグラフィー法に適したクライオホルダーの開発に向けての試験的研究

研究課題

研究課題/領域番号 24657075
研究機関九州工業大学

研究代表者

安永 卓生  九州工業大学, 大学院情報工学研究院, 教授 (60251394)

研究期間 (年度) 2012-04-01 – 2013-03-31
キーワードクライオ電子顕微鏡 / 構造生物学 / 電子顕微鏡法 / 試料ホルダー / 蛋白質構造解析
研究概要

クライオ電子顕微鏡法のための試料ステージの試験的開発を実施した。既存の低温ステージと比較しながら、低温ステージホルダーについての設計を行い、それに必要なクライオポンプ、制御装置等を購入し、ホルダーの実装を開始したが、予算不足により、ステージ全体の完成には至らなかった。今後、継続的に予算を投入し、ステージの性能測定が可能な試作品を作成する予定である。
そこで、提案書にあったもうひとつの方法を試行した。従来のクライオホルダーを真空引きすることでステージの低温化をはかった。真空引きのための真空ポンプを別途予算にて購入し、その結果、従来、液体窒素ののみで低温化した場合よりも、-10~-15度の温度低下が観察された。かつ、ホルダーデュア内の窒素は固体窒素温度になったことを確認できた。同様の真空引き型のアンチコンタミネータの場合、さらに真空度の改善がなされ、-200度以下となることが実現していくことから、真空度の改善により、更に温度低下が見込める。
また、真空ポンプから持ち込まれる振動に関しては、真空引きのためのホースの種類を変更しながら試行し、柔軟性のあるホースであれば、観察可能な程度の1nmを下回る振動で観察でき、かつ、写真撮影が可能であることが分かった。また、停止した場合も10秒程度であれば、温度が維持され、写真撮影が可能であることが分かった。写真撮影時とポンプの起動を連動することで、更なる改善が期待される。
後者の方法は、手軽であり、かつ、低温下が測れることから、真空引きホースやポンプの高性能化を通して、実用的な方法として提案する。
今後、前者の方法での振動制御に向けて、開発を進めていく。

  • 研究成果

    (4件)

すべて 2013 2012 その他

すべて 雑誌論文 (3件) (うち査読あり 3件) 備考 (1件)

  • [雑誌論文] Kinesin-1 regulates dendrite microtubule polarity in Caenorhabditis elegans2013

    • 著者名/発表者名
      Jing Yan
    • 雑誌名

      eLIFE

      巻: 2 ページ: e00133

    • DOI

      doi: 10.7554/eLife.00133

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Tilt-angle measurement of a sample stage using a capacitive liquid-based inclinometer2012

    • 著者名/発表者名
      Kyoko Matoba
    • 雑誌名

      Microscopy

      巻: 61 ページ: 193-198

    • DOI

      doi: 10.1093/jmicro/dfs034

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Enhanced detection efficiency of genetically encoded tag allows the visualization of monomeric proteins by electron microscopy2012

    • 著者名/発表者名
      Yuko Fukunaga
    • 雑誌名

      Microscopy

      巻: 61 ページ: 229-236

    • DOI

      doi: 10.1093/jmicro/dfs043

    • 査読あり
  • [備考] 安永研究室HP

    • URL

      http://www.yasunaga-lab.bio.kyutech.ac.jp/

URL: 

公開日: 2014-07-24  

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