ＤＮＡクランプを用いた新規結晶化シャペロンの開発

2013 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 24657076
• 研究種目: 挑戦的萌芽研究
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 構造生物化学
• 研究機関: 静岡県立大学 (2013); 横浜市立大学 (2012)
• 研究代表者: 橋本 博 静岡県立大学, 薬学部, 教授 (40336590)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2014-03-31
• キーワード: X線結晶構造解析 / タンパク質 / 結晶化

研究概要

本研究は、クランプ分子を結晶化シャペロンとして利用したタンパク質の新規結晶化技術の開発である。PCNAなどのクランプは一般に3量体のリング構造を形成する。クランプは、分子の対称性が高いこと、それ自身が比較的容易に結晶化することから結晶化シャペロンとして有用であると考えた。本研究が開発する結晶化技術は、タンパク質の結晶化における有効な選択肢の1つになると期待できる。いくつかのタンパク質で結晶化を検討したところ、本研究で開発した結晶化シャペロンベクターの有効性が確認できた。

研究成果

• [雑誌論文] A Small Molecule Inhibitor of Monoubiquitinated Proliferating Cell Nuclear Antigen (PCNA) inhibits Repair of Interstrand DNA Crosslink, enhances DNA Double-strand Break, and sensitizes Cancer Cells to Cisplatin (2014)
  • 著者名/発表者名: Akira Inoue, Sotaro Kikuchi, Asami Hishiki, Youming Shao, Richard Heath, Benjamin J. Evison, Marcelo Actis, Christine E. Canman, Hiroshi Hashimoto, & Naoaki Fujii
  • 雑誌名: J. Biol. Chem 巻: 289 ページ: 7109-7120
  • DOI: 10.1074/jbc.M113.520429
• [雑誌論文] Identification of a small molecule PCNA inhibitor that disrupts interactions with PIP-Box proteins and inhibits DNA replication (2012)
  • 著者名/発表者名: Chandanamali Punchihewa, Akira Inoue, Asami Hishiki, Yoshihiro Fujikawa, Michele Connelly, Benjamin Evison, Youming Shao, Richard Heath, Isao Kuraoka, Patrick Rodrigues, Hiroshi Hashimoto, Masanobu Kawanishi, Mamoru Sato, Takashi Yagi, & Naoaki Fujii
  • 雑誌名: J. Biol. Chem 巻: 287 ページ: 14289-14300
  • DOI: 10.1074/jbc.M112.353201
• [学会発表] 損傷乗り越えDNA合成におけるポリメラーゼ相互作用の構造基盤 (2013)
  • 著者名/発表者名: 橋本博
  • 学会等名: 第12回NRGICがん・ゲノム重点セミナー
  • 発表場所: 長崎大学
  • 年月日: 2013-07-05
• [学会発表] Crystal structures of human PCNA in complex with small molecule inhibitors for cancer therapeutics (2012)
  • 著者名/発表者名: H iroshi Hashimoto, Sotaro Kikuchi, Asami Hishiki, Mamoru Sato, Chandanamali Punchihewa, Naoaki Fujii
  • 学会等名: AsCA 12/CRYSTAL 28
  • 発表場所: Adelaide Convention Centre, Adelaide, Australia
  • 年月日: 20121202-06
• [学会発表] 抗がん剤併用薬開発に向けたPCNAと阻害剤との複合体構造 (2012)
  • 著者名/発表者名: 菊池壮太郎、菱木麻美、Chandanamali Punchihewa、藤井直明、佐藤衛、橋本博
  • 学会等名: 第12回日本蛋白質科学会
  • 発表場所: 名古屋国際会議場
  • 年月日: 20120620-22